Пренатално откриване на криптични пренареждания чрез усилване на мултиплекс лигиране на сонда

пренатално

  • Резюме
  • Основна
  • МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
  • Пациентите
  • Усилване чрез мултиплекс сонда за лигиране
  • Флуоресценция in situ хибридизация
  • РЕЗУЛТАТИ
  • Пациент А
  • Пациент Б
  • Пациент С
  • Пациент D
  • ДИСКУСИЯ

Резюме

Цел: Вродените малформации са основна причина за заболеваемост и смъртност при новородени и геномните дисбаланси са важна част от тяхната етиология. Целта на това проучване е да се оцени способността за пренатален скрининг на амплификация на пренатална мултиплекс лигираща сонда за откриване на криптични хромозомни дисбаланси при плодове с ултразвукови аномалии с неизвестна етиология.

Методи: Амплификацията на мултиплексна лигираща сонда се извършва с три отделни комплекта сонди: две за субмеломерните области и една за локусите на синдрома на умствена изостаналост. Шестдесет и един плода със значителни аномалии при ултразвук и нормален кариотип с минимална разделителна способност от 400 ленти бяха тествани между януари 2007 г. и януари 2009 г.

Резултати: Идентифицирахме четири небалансирани пренареждания: микроделеция 18pter/amp 5pter, микроделеция 9pter, микроделеция 15q11q13 и нетипично представена микроделеция 22q11. След генетично консултиране две от бременностите бяха прекъснати.

Заключение: Анализът чрез амплификация на мултиплексна лигационна сонда идентифицира клинично значими пренареждания при 6,5% от плодовете с ултразвукови аномалии, идентифицирани преди раждането. Това проспективно проучване подчертава, че скринингът чрез амплификация с мултиплексна лигираща сонда на плодове с ултразвукови аномалии през пренаталния период е технически осъществим и подходящ за диагностика и прогноза.

Основна

Вродените дефекти са основна причина за заболеваемост и смъртност при новородени и се диагностицират при около 3% от населението. Някои вродени дефекти се откриват чрез ултразвук по време на пренаталния период. Стандартният кариотип, получен чрез вземане на проби от хорионни ворсинки или амниоцентеза, разкрива хромозомни аберации при 18 до 35% от засегнатите плодове. 1, 2 За да се увеличи тази скорост на откриване, методи с висока разделителна способност, базирани на флуоресценция in situ хибридизация (FISH), сравнителна геномна хибридизация (разпръсната метафаза или решетка-CGH) и количествени техники на мултиплексни верижни реакции при многоверижни (PCR) като (MLPA) или са приложени количествени мултиплексни PCR на къси фрагменти, но тяхното използване при пренатална диагностика остава ограничено.

Преди това е доказано, че FISH, специфичен за теломери, е полезен инструмент за откриване на делеции и дублирания при плодове с големи малформации. 3, 4 Наскоро беше установено, че е възможно матричен CGH анализ на фетални проби за откриване на промени в ДНК с малък брой копия. 5 до 8 MLPA е бърз и икономически ефективен метод за скрининг за асиметрични небалансирани субтеломерни пренареждания и интерстициални дисбаланси, разположени в области, свързани с умствена изостаналост (синдром на умствена изостаналост [MRS] -MLPA). Това е така, защото MLPA изисква по-малко от 2 дни и резултатите от MLPA могат да бъдат налични след 3 дни (след 4 дни, ако се изисква тестване на FISH). Към днешна дата само едно проучване комбинира MRS-MLPA със субтеломерна MLPA, което подобрява степента на откриване на дисбаланса от 5,8% на 10,1% при деца с умствена изостаналост. 9