Основи на имунологията - имуноанализ

Свързан имуносорбентен анализ

Имуноанализът или ензимно-имунологичните методи се основават на използването на антитела, конюгирани с ензими, главно пероксидаза от хрян или алкална фосфатаза. За да се открие свързването на белязани антитела с антигена, се добавя субстрат, разграден от ензим, прикрепен към lgG, оцветяващ в жълто-кафяво (пероксидаза) или жълто-зелено (фосфатаза). Те също така използват ензими, които разграждат не само хромогенен, но и лумогенен субстрат. В този случай при положителна реакция се появява блясък. Подобно на имунофлуоресценцията, ензимният имуноанализ се използва за откриване на антигени в клетките или за титруване на антитела върху антигенсъдържащи клетки.

Най-популярният вид ензимен имуноанализ е имуносорбцията. Антигенът се сорбира върху твърд носител, който може да бъде целулоза, полиакриламид, декстран и различни пластмаси. Най-често носителят е повърхността на микропанелните кладенци. Тестът на кръвния серум се добавя към ямките с адсорбирания антиген, след това белязаният с ензим антисерум и субстратът. Положителните резултати се вземат предвид от промяната в цвета на течната среда. За да се открият антигени, антителата се сорбират върху носителя, след това тестваният материал се въвежда в ямките и реакцията се развива с белязан с ензими антимикробен серум. Повишаването на чувствителността на имунофлуоресцентните и ензимните имуноаналитични методи се улеснява от въвеждането на авидин и биотин в реакционната система.