QuantiFERON TBC тест; Централна военна спешна университетска болница Др
QuantiFERON TBC тест
Главна информация
Туберкулозата (TB) е заразно респираторно инфекциозно заболяване, причинено от бактерии, включени в комплекса на Mycobaterium tuberculosis (M. tuberculosis, M. bovis и M. africanum).
Туберкулозната инфекция включва както активни, така и латентни форми; Латентна туберкулоза възниква, когато човек се изложи на М. tuberculosis и тялото контролира инфекцията, но не успява да я изкорени. Изчислено е, че приблизително 10% от хората с латентна туберкулоза ще преминат в активна форма през живота си. Причините, свързани с реактивиране на латентна инфекция, включват HIV инфекция и лечение с TNFα антагонисти. Поради тази причина диагностицирането на латентна туберкулоза е важна стъпка за предотвратяване на повторното активиране на инфекцията, особено при хора с висок риск. Лечението на латентна туберкулоза може значително да намали риска от прогресия към активните форми.
QuantiFERON TB, разработен от Cellestis Limited (Австралия), беше одобрен от FDA през май 2005 г. като тест in vitro, полезен при диагностициране на инфекция с Mycobacterium tuberculosis както за латентна, така и за активна форма. В Европейската общност тестът е сертифициран за употреба в същите ситуации, в които е показан туберкулиновият тест.
Доскоро туберкулиновият IDR беше единственият метод за диагностициране на туберкулозна инфекция. Макар и широко използван, туберкулиновият тест има редица ограничения. В случая на QuantiFERON, който е лабораторен тест, извършен от кръвта, стимулирането на лимфоцитите с туберкулозни антигени се извършва във флеботомичната тръба, а не интрадермално. Поради тази причина е изключен „бустер“ ефектът, който може да възникне в случай на туберкулиновия тест (извършването на кожен тест на човек, който не е бил изложен на туберкулозна инфекция, стимулира имунната система и я кара да реагира на туберкулин в един етап. последващо, когато кожният тест се повтаря).
За разлика от туберкулиновия IDR, резултатите от теста не се влияят от BCG ваксинацията; предишни инфекции с нетуберкулозни микобактерии също имат по-малко влияние. Нежеланите реакции на свръхчувствителност, които могат да възникнат при кожния тест, също се елиминират. Също така резултатите от теста QuantiFERON TB са много по-обективни, без грешки при четене и тълкуване.
Показания за изпитване:
1. Може да се използва във всички ситуации, когато туберкулиновият тест се използва често:
-клинично и рентгенологично съмнение за активна туберкулоза;
-контакти на пациенти с заразни форми на туберкулоза;
-скрининг на хора с висок риск: персонал от здравни звена и институции за грижи, хора от среди с лоша хигиена и др.
Проучване от 2008 г. показва, че тестът може да се приложи при деца над 2-годишна възраст за диагностициране на латентна туберкулоза, със същите характеристики на работа като възрастните.
Забележка: QuantiFERON TB замества туберкулиновия тест; и двата теста не трябва да се използват едновременно.
2. Може да бъде инструмент за наблюдение на пациенти с активна туберкулоза. Има някои проучвания, които показват потенциалната полезност на теста за оценка на ефективността на туберкулостатичното лечение чрез проследяване на количеството освободен интерферон гама, което се променя с течение на времето.
Според едно проучване, оценката от QuantiFERON 2 месеца след започване на терапията може да има значителна прогнозна стойност с вероятността в края на фазата на интензивно лечение храчките да останат положителни.
3. Може да се използва преди имуносупресивна терапия (напр. С антитела срещу TNFα) или преди трансплантация на органи, за да се изключи латентна инфекция с М. tuberculosis.
прибиране на реколтата
Обучение на пациента - имуносупресивната терапия (цитостатици) трябва да бъде прекратена поне 14 дни преди прибиране на реколтата.
Събран образец - ще дойде кръв.
Контейнер за прибиране на реколтата - вакутейнер с литиев хепаринат.
Обем на теста - поне 10 ml хепаринизирана кръв.
Тествайте стабилността - кръвта трябва да пристигне за 12 часа (макс. 16 часа) в лабораторията, където се извършва изследването и през този период тя се съхранява на стайна температура. Охлаждането на пробата е противопоказано.
Причини за отхвърляне на доказателствата - образци, които са надвишили обхвата на стабилност, хладилни или замразени проби.
Метод и интерпретация на резултатите
Хепаринизираната кръв на пациента се инкубира в продължение на 24 часа заедно със смес от синтетични пептиди, която симулира трите специфични протеина за М. tuberculosis: ESAT-6, CFP-10 и TB 7.7 (p4). Тези протеини се произвеждат от всички щамове на Mycobacterium tuberculosis и патогенни щамове на Mycobacterium bovis, но не и от щамове, включени във ваксината BCG. По този начин QuantiFERON е по-специфичен от туберкулиновия тест при откриване на инфекция с M. tuberculosis. Ако в кръвната проба има лимфоцити с памет с памет за тези протеини (което се случва в случай на инфекция преди много години), тези клетки ще произвеждат γ-интерферон в контакт със специфичния антиген. Количественото определяне на освобождаващия плазма γ-интерферон се извършва чрез високо чувствителен ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA). Трябва да се използват положителни и отрицателни контроли, за да се гарантира валидността на теста. Положителната контрола е представена от фитохемаглутинин (митогенно вещество), а отрицателната контрола от физиологичен разтвор (използван като празна проба за измерване на основното ниво на γ-интерферон). Количеството освободен γ-интерферон се изразява в IU/mL.
Тълкуване на резултатите
Резултат отрицателен (количество освободен γ-интерферон
При тези условия може да се изключи инфекция с Mycobacterium tuberculosis. Въпреки това, при пациенти с хронична HIV инфекция или други причини за тежка имунна недостатъчност (имуносупресивна терапия, някои хематологични състояния: левкемии, лимфоми, някои солидни тумори: белодробна или главно-шийна област, диабет, силикоза, хронична бъбречна недостатъчност) обмисляне на текущия имунен статус и използване на други методи за диагностициране на инфекцията.
Неотдавнашно проучване в Япония показва, че QuantiFERON TB тестът е по-полезен при диагностицирането на туберкулозна инфекция при имунокомпрометирани пациенти, отколкото туберкулиновия тест. Като се има предвид обаче, че при пациенти с лимфопения, получаващи имуносупресивна терапия, е получена повишена честота на неубедителни резултати, резултатите трябва да се тълкуват с повишено внимание при тази категория пациенти.
В случай на отрицателен резултат при хора, които наскоро са влезли в контакт с пациенти с диагноза форми на заразна туберкулоза, това ще бъде потвърдено от нов тест, проведен на 6-8 седмици от края на периода на експозиция (както в случая на туберкулиновия тест ).
Резултат положителен (количество освободен γ-интерферон ≥ 0,35 IU/ml)
Положителен резултат показва инфекция с М. tuberculosis. В повечето случаи диференциацията между латентна и активна инфекция не е възможна с този тест.
В случай на клинично подозрение за активна туберкулоза, всички методи на микробиологична диагностика (микроскопия, култура) и молекулярна биология остават валидни.
Резултат неубедително
Възниква в ситуацията, когато не са получени критериите за валидиране или митогенната положителна контрола (неадекватен отговор
Граници и смущения
Прогнозната стойност на теста зависи от разпространението на инфекция с M. tuberculosis в тестваната популация. Всеки резултат трябва да се интерпретира в клиничния и епидемиологичния контекст на пациента.