Подготовка и проучване на цитонамазки - ЧЕТИЛНА
Упражнение 1. Цитологичен анализ на гноен ексудат.
Оборудване: диапозитиви, микроскопи; стерилни памучни тампони; термостат; ректифициран алкохол (65 ml); абсолютен метилов алкохол (65 ml); Боя Романовски-Гиемза (120 мл); потапящо масло (6 ml); опитни животни с гнойна рана.
Настройка на опит. Цитологичната картина на възпалителния ексудат се изследва при получаване на отпечатъци от рани според М. П. Покровская и М. С. Макаров. В хирургична клиника предварително се избира болно животно с ранена повърхност, покрита с гноен ексудат.
Слайдовете се приготвят по обичайния начин, както и за хематологични изследвания. По време на лабораторни изследвания добре измитите и обезмаслени стъклени стъкла се потапят в алкохол (96%), след това се отстраняват, остатъците от алкохол се запалват. След охлаждане стъклото е готово за употреба за приготвяне на отпечатъци от рани. Ако има много гной, покриваща раната, тя се отстранява със стерилни, влажни памучни тампони. След това стъклената повърхност, отстъпвайки на 1 см от тесния ръб, се нанася върху възпалената тъкан. Премествайки стъклото, последователно се нанасят няколко намазки. На стъклото остават тъканни клетки, ексудатни клетки и микроорганизми. При получаване на намазки стъклото не трябва да се пренася по повърхността на раната и по този начин да се предотврати възможността за увреждане на клетъчните елементи на ексудата. За да не се изкриви картината на взаимодействието на фагоцитите и микроорганизмите, понякога разположени в гнезда, трябва леко да докоснете стъклото до избраната област на раната и незабавно да го отнесете в положение, строго перпендикулярно на повърхността на раната . За да завършите характеристиките на процеса на рана, е по-добре да направите отпечатъци от различни части на лезията, например от центъра към периферията.
Получените отпечатъци от рани се изсушават, след това се фиксират за 5 минути с метилов алкохол (етилов алкохол в еднаква смес с етилов етер за 15 минути). Препаратите, фиксирани и изсушени в термостат или на въздух, се оцветяват по метода на Романовски-Гиемза.
Когато микроскопичните оцветени цитонамазки отпечатъци обръщат внимание на наличието на неутрофили с различна степен на зрялост, микро - и макрофаги, фагоцитни патогени на възпалителния процес. Установете активността на фагоцитите в различни части на раната.
Чрез цитограми на отпечатъци от рани е възможно да се определи активността на защитните и регенеративни реакции на тялото, степента на бактериално замърсяване и патогенността на микроорганизмите, инфектиращи раната. Тези фактори определят динамиката на зарастване на рани. Откриването на полиморфноядрени неутрофилни левкоцити, активно фагоцитни патогени на инфекциозния процес, показва висока активност на фагоцитната реакция. В по-късния период на зарастване на рани добър знак е откриването на голям брой макрофаги - моноцитни клетки.
Регистрация на експерименталния протокол. Записва се процедурата за изготвяне на пръстови отпечатъци. Те отбелязват резултатите от цитологичния анализ на тествания ексудат, обсъждат ги и правят заключения.
Въпроси за контрол на знанията:
1. Възпаление. Определение на понятието. 2. Етиологични фактори, причиняващи възпаление. 3. Външни признаци на възпаление и техните характеристики. 4. Нарушения на кръвообращението и микроциркулацията в областта на възпалението. 5. Характеристики на метаболитните нарушения във фокуса на възпалението. 6. Ролята на биологично активните вещества в патогенезата на възпалението. 7. Класификация на възпалението. 8. Видове ексудат. 9. Видове гнойни възпаления. 10. Емиграция на левкоцити по време на възпаление, основните теории, обясняващи това явление. 11. Учението за фагоцитозата. Завършена и непълна фагоцитоза. 12. Свойства на ексудата. 13. Класификация на възпалението според преобладаването на промяна, ексудация и пролиферация. 14. Възпаление като реакция на целия организъм към увреждане. 15. Патогенеза на възпалението. Характеристика на етапите на промяна, ексудация и разпространение. 16. Резултати от възпаление. 17. Биологичната роля на възпалението. 18. Особености на протичането на възпалението при основните видове селскостопански животни (коне, говеда, свине и птици).