NMP 22 (туморен маркер на пикочния мехур) - количествен тест - Synevo
Главна информация
Ракът на пикочния мехур се нарежда на 4-то място при мъжете и на 8-о място при жените сред всички видове рак. С изключение на хематурия, няма други ранни симптоми при пациенти с тумори на пикочния мехур. За да се изключи или диагностицира рак на пикочния мехур, цистоскопското изследване е задължително. Доскоро цитологията на урината беше единственият често използван неинвазивен метод. Чувствителността и специфичността на уринарната цитология обаче зависят от стадия на тумора и морфологията на пролифериращите клетки.
За откриване и наблюдение на напреднал рак на пикочния мехур, пикочната цитология е безопасно средство; обаче ракът на пикочния мехур в ранен стадий може да бъде открит само в около 30% от случаите 2. Направени са няколко опита за потвърждаване на различни неинвазивни тестове, специфични за рак на пикочния мехур, един от които е NMP22 1; 7 .
Ядрените матрични протеини (NMP) изграждат вътрешната структурна рамка на клетъчното ядро. Тази матрица служи като „котва“ за ензимния апарат, участващ в процесите на репликация на ДНК, синтез на РНК и свързване на хормони. NMP протеините също играят роля в регулирането и координирането на генната експресия. Работата на Fey и Penman показва, че експресията на NMP варира в зависимост от вида на клетката на произход. Въз основа на това наблюдение е показано, че в серума на неопластични пациенти има разтворими NMP протеини в много по-високи концентрации, отколкото при здрави индивиди. Партин и колеги са показали, че моделът на експресия на NMP е различен в нормалната простатна тъкан в сравнение с доброкачествената простатна хиперплазия и рак на простатата. Предишна работа идентифицира специфични NMP протеини за остеосарком, рак на дебелото черво и рак на гърдата. Тези наблюдения показват, че определянето на NMP може да бъде полезно при наблюдение на пациенти с различни тумори.
Различните NMP протеини имат органна специфичност. NMP22 или ядрен митотичен протеин (NuMA) се намира в човешките епителни клетки, където осигурява правилното разделяне на генетичния материал по време на митоза. Концентрацията на NMP22 в злокачествени уротелиални клетки е до 80 пъти по-висока, отколкото в нормалните тъкани 10. Протеинът NMP22 се освобождава в урината в резултат на клетъчна апоптоза 9. За разлика от уринарната цитология, откриването на антиген NMP22 не зависи от възстановяването на непокътнати клетки 3 .
Има два типа тестове за NMP22, разработени от Matritech: количествени и качествени 9 .
Количественото определяне на NMP22 се извършва чрез ензимно-свързан имуносорбентен анализ, като се използват антитела, които разпознават основните протеинови последователности на ядрен митотичен протеин (NuMA). Необходима е стабилизирана спонтанна проба от урина.
Полезност на определянето на NMP22
- за диагностични цели при пациенти със симптоми или рискови фактори за преходно-клетъчен карцином на пикочния мехур (граничната стойност е 7,5 U/ml) в комбинация с (и не вместо това) стандартни диагностични процедури;
- с цел наблюдение на пациенти с тумори на пикочния мехур след хирургично лечение с цел откриване на окултни или бързо рецидивиращи тумори (граничната стойност е 10 U/ml) 10 .
Тестът е одобрен от FDA през 1996 г. за използване при установяване на прогнозата и мониторинг на рецидивиращи тумори на пикочния мехур (след операция). През 2000 г. тестът получи одобрение от FDA за диагностика на тумори на пикочния мехур.
Целта на проучванията е да се определи чувствителността и специфичността на теста в сравнение с уринарната цитология. Въпреки че цитологията има висока специфичност за рак на пикочния мехур, основният й недостатък е ниската чувствителност за идентифициране на неинвазивни тумори 9 .
В 3 отделни проучвания, включващи приблизително 400 пациенти, Soloway, Miyanaga и Landman демонстрират, че количественият анализ на NMP22 има обща чувствителност от 70-81% за откриване на рецидивиращи уротелиални тумори. За цитологията е съобщена чувствителност от 10-40%. Важна констатация беше, че NMP22 има висока чувствителност към неинвазивни тумори. По този начин Miyanaga и колегите му демонстрират, че чувствителността на теста за повърхностни тумори е 70%.
В сравнение с цитологията NMP22 има по-ниска специфичност. Carpinito, Soloway и Landman съобщават за специфичност от 70-79% за NMP22, докато цитологията на урината достига специфичност от 90-94%. На практика това предполага, че NMP22 генерира много повече фалшиво положителни резултати от цитологията 9; 12; 13 .
По отношение на фалшиво положителните резултати за NMP22 Ponsky и Sharma показаха, че използването на критерии за клинично изключване увеличава специфичността на теста с до 95% и имплицитно намалява броя на фалшиво положителните случаи. Трябва също да се отбележи, че цистоскопията има общоприета чувствителност от 80-85% и е възможно някои от положителните резултати за NMP22, класифицирани като фалшиво положителни, всъщност са положителни случаи, които не са били открити при цистоскопия.
Критериите за клинично изключване са както следва:
Soloway и Miyanaga също показаха, че тестът NMP22 има много добра отрицателна прогнозна стойност (86-94,9%); това означава, че получаването на отрицателен резултат показва с много голяма вероятност отсъствието на уротелиален тумор 9 .
Ефективността на теста за диференциална диагноза на хематурия е демонстрирана от 3 проучвания, включващи над 700 пациенти. Akaza, Miyanaga и Carpinito показаха, че тестът NMP22 има чувствителност от 85,7-90,9% за диагностика на уротелиални тумори при пациенти с хематурия, докато уринарната цитология има чувствителност от 50-54,5%.
По отношение на мониторинга на тумори на пикочния мехур, Stampfer и сътрудници показаха, че NMP22 има чувствителност 67%, по-добра от цитологията на урината (40%). В допълнение, чувствителността на теста беше стратифицирана според стадия на тумора: 59% за неинвазивни тумори и 90% за агресивни 9 .
Обучение на пациента - не се препоръчва използването на теста след пълна цистектомия, както и през първите 5 дни след инвазивна процедура (цистоскопия, катетеризация); събирането на реколтата трябва да се извършва между 0 и 12 часа в случай на наблюдение на пациентите след хирургично лечение 10 .
Събран образец - спонтанна проба от урина 10 .
Контейнер за прибиране на реколтата - жътвен комплект NMP22 (контейнер със стабилизатор) 10 .
Количество прибрано - 10 мл урина; стабилизираният образец е син/зелен 10 .
Причини за отхвърляне на доказателствата - нестабилизиране на пробата; използване на неподходящ стабилизатор 10 .
Необходима е обработка след прибиране на реколтата - урината трябва да се стабилизира веднага след събирането 10 .
Стабилност на пробата - 2 седмици при 2-8 ° C. Пробата не замръзва.
Метод - ОВОС (имуноензимен) 10 .
Граница на откриване: 2,1 U/mL 10 .
Граници и смущения