Копрокултура (с антибиограма според случая) - Synevo
Информиранii общи
Диарейният синдром по честота е третият синдром, срещан в медицинската практика.
Въпреки че повечето пациенти имат самоограничаваща се инфекция, има и тежки форми, характеризиращи се с чести изпражнения (3-40/ден), ниска консистенция (понякога воднисти), с голяма загуба на течности, което може да доведе до хидроелектролитичен дисбаланс, придружен от тежки хемодинамични нарушения ( сърдечно-съдов колапс), причиняващ смърт.
Giardia lamblia, Cryptosporidium parvum, Entamoeba histolytica 1; 3
- Патогенни ентеробактерии: Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli ентеропатоген, ентеротоксиген, ентерохеморагичен, ентероинвазивен, ентероадерентен, ентероагрегативен, Yersinia enterocolitica 1; 3
- Патогенни условни ентеробактерии: Klebsiella spp. (Синдром на диария на новороденото), Serratia marcescens („синдром на червената пелена“ - чрез необичайна колонизация с тази бактерия при новородени)
- Vibrio cholerae, Vibrio parahaemoliticus
- Високо грам-отрицателни бацили: Aeromonas, Alcaligenes, Plesiomonas
- Грам-положителни коки: Staphylococcus aureus 1; 3
Анаеробна бактериална
Bacillus cereus, Clostridium difficile (псевдомембранозен ентероколит след антибиотична терапия), Clostridium perfringens, Clostridium botulinum 1; 3
микроаерофил
3. вирус Norwalk, ротавирус, аденовирус 1; 3
Събиране и транспортиране на проби
Вземането на проби трябва да се извършва възможно най-близо до началото на заболяването и преди да се започне антимикробно лечение.
• Оттегляне от спонтанно отделени изпражнения - за предпочитане е и е показано при всички форми на остра диария, когато фекалните емисии са чести.
• За бактериални и паразитни изследвания, вземането на проби се извършва с „чаената лъжичка“ на комбайна, като се насочват течните порции и особено лигавиците и/или кървавите, ако има такива. Обемът на реколтата трябва да бъде най-малко 5 ml или 3-5 cm 3, ако изпражненията се образуват 3 .
• За изолиране или вирусологични изследвания се вземат 5-10 cm 3 фекалии или поне 5 ml, ако изпражненията не се образуват 3 .
• Ректално вземане на проби - препоръчва се при:
- хронична шигелоза, при която остъргването на ректалната лигавица със сондата или тампона предлага по-големи шансове за изолиране;
- разследване на носители на шигела и салмонела, с изключение на носители на S. Typhi.
За този тип вземане на проби се използват сонди Nelaton (№ 14-16) или подходящи тампони, както следва: с тампона, навлажнен в изотоничен физиологичен разтвор (не използвайте смазващи гелове), проникнете в аналния сфинктер чрез бавно въртене, въвеждайки интраректално около 15 cm. Същото ще се направи и със сондата Nelaton, към която е приспособена спринцовка (10 ml), с която се правят 1-2 аспирации. След вземане на проби сондите и тампоните се поставят в стерилни контейнери, съдържащи консерванти, етикетират се съответно и се изпращат в лабораторията. .
Транспорт пробите и обработката им се извършва за максимум 1 h, ако са събрани в контейнери без транспортна среда (с транспорт при стайна температура) или могат да се съхраняват до 24 h при стайна температура, ако са събрани в контейнери, съдържащи Транспортна среда Cary-Blair, която осигурява добра жизнеспособност на бактериалните чревни патогени. Изключения от тези правила са проби, събрани при съмнение за инфекция с Shigella spp, много чувствителна бактерия, която изисква инокулация върху хранителни среди непосредствено след вземане на проби 3; 4 .
За вирусна етиология пробите, които не се обработват незабавно, трябва да се съхраняват при - 70 ° C 3 .
Изолиране на аеробни бактерии
• Засяйте пробата върху две културни среди, една слабо селективна (Mac Conkey) и една умерено селективна (Hektoen) и инкубирайте в продължение на 24 часа при 35-37 ° C, следвайки културите на 24 и 48 часа за появата на характерни колонии. За рода Vibrio препоръчителната селективна среда е BSA (агар от жлъчна сол), а за дрождите - средата на Sabouraud с хлорамфеникол.
• За да се увеличат шансовете за изолиране, пробата се субкултивира върху обогатителна среда, която благоприятства размножаването на патогени (напр. Бульон от селенит на натриева киселина за Salmonella spp., Алкална пептонова вода или бульон с тауроколат и пептон при pH = 8,0-9, 0 за Vibrio, откъдето след инкубация могат да се извършват цитонамазки и култури от горната част на средата). Инкубирайте в продължение на 24 часа при 35-37 ° C, след това преминете през културална среда.
• Колониите, характерни за всеки род, ще бъдат трансплантирани за идентификация на видове и аглутинация със специфични серуми.
Изолация от дрожди
• върху намазани с Грам намазки се наблюдава наличието на дрожди в голямо и преобладаващо количество в сравнение с намалената фекална бактериална флора 2 .
• е от решаващо значение за отглеждането на фекалии с цел изолиране и количествено определяне на дрождите.
Култивиране върху среда Sabouraud с хлорамфеникол, с проследяване на 48–72 h 3 .
За да се установи гъбичната етиология на диарейния синдром, ще се извърши количественото изследване на дрождите, съответно определянето на броя единици, образуващи гъбични колонии на g или ml фекалии, като значително количествено е число> 10 9 CFU/g или ml фекалии 3 .
Комуникация и интерпретация на резултатите
В случай на заявка за услуга за съвместна култура в лабораторията се анализират основните бактерии, участващи в диарийно заболяване: Shigella spp., Salmonella spp. И при деца на възраст 0-3 години и диарийния патотип на ентеропатоген на Escherichia coli - EPEC 5 .
Заявление за Escherichia coli за деца на възраст над 3 години и възрастни, EHEC (Escherichia coli enterohemorrhagic) и EIEC (Escherichia coli enteroinvasive) ще се подава само с препоръка от лекаря, в която е отбелязано клиничното съмнение.
В случаите, когато се желае изследване на фекалиите за видове Candida, исканата услуга трябва да бъде „Култура и идентификация на фекални гъби“.
Също така споменаваме, че в нашите лаборатории не се извършват вирусни култури 2 .
Библиография
1. Бети А. Форбс, Даниел Ф. Сам, Алис С. Вайсфелд. Инфекции на стомашно-чревния тракт. В Диагностичната микробиология на Бейли и Скот. Мосби, САЩ, 11-то изд. 2002; 62, 965-969.
2. Лаборатория Синево. Специфични справки за използваната технология на работа 2010 г. Реф. Тип каталог.
3. Мариан Негут. Лабораторна диагностика при синдром на инфекциозна диария. В Трактат по клинична микробиология. Думитру Буюк, Мариан Негуц, Румънско медицинско издателство, 1-во изд. 1999, 349-386.
4. Ричард Б. Томсън Дж., Дж. Майкъл Милър. Вземане, транспортиране и обработка на проби: Бактериология. В Наръчник по клинична микробиология. Patrick R. Murray et al, ASM PRESS, САЩ, 8-мо изд. 2003; 20, 312-313.
5. Нанси А. Strockbine и др. всичко. Ешерихия, шигела и салмонела. В ръководството по клинична микробиология. ASM PRESS, САЩ, 11-то издание 2015; 37: 685-713.