Афинитетна хроматография
АФИНАЛНА ХРОМАТОГРАФИЯ (от лат. Affinis - съседен, съпричастен) (биоспецифична хроматография), метод за анализ, разделяне, пречистване и изолиране на биологично активни вещества (нуклеинови киселини, ензими, антитела, рецепторни протеини, хормони и др.), Което е въз основа на тяхното биоспецифично взаимодействие със стационарен лиганд, имобилизиран върху хроматографски сорбент; една от опциите за течна колонна хроматография. Най-широко използваната афинитетна хроматография е за изолиране и пречистване на ензими, където ензимни инхибитори, коензими и субстратни аналози се използват като стационарни лиганди. Афинитетната хроматография се появява като техника в края на 60-те години. Разцветът на афинитетната хроматография е свързан с бързото развитие на биотехнологиите и молекулярната биология през 70-те години. Внедрени са индустриални схеми за изолиране на редица протеини чрез афинитетна хроматография - инсулин, интерферон, растежен хормон, както и много ензими - протеази, рибонуклеази, липази, ацилази и др.
При афинитетна хроматография за имобилизиране на неподвижен лиганд (поради ковалентно взаимодействие, по-рядко - физическа адсорбция) се използват различни сорбенти - сефароза, целулоза, полиакриламид, поресто стъкло, силикагел и др. Основните изисквания към сорбента: инертност (т.е. висока ефективност на разделяне се осигурява изключително поради биоспецифично взаимодействие със стационарен лиганд), стабилност при работни условия, възможност за контролирано свързване на стационарен лиганд. Разделянето се извършва в хроматографски колони. Целевият компонент се десорбира чрез промяна на йонната сила, рН или състава на елуента.