Адоптивна имунотерапия за туморен плеврит
Ефективността на традиционните методи на плевродеза за туморен плеврит е 60-80% [1, 2, 12-14, 16], но интраплевралното приложение на някои цитостатици и (или) склерозиращи агенти при 28-60% от пациентите е придружено от странични ефекти, от които най-чести са болка и треска [12, 16]. През 90-те се появява информация за употребата на цитокини; главно интерлевкин-2 (IL-2) [18], интерферон [5] и фактор на туморна некроза [15]. Най-ефективната (до 94,8%) е комбинацията от IL-2 или други имуномодулатори с лимфокин-активирани клетки-убийци (LAK) [4, 6, 9-11]. LAK са клетки убийци, генерирани in vitro от лимфоцити на плеврален ексудат в присъствието на IL-2 и след това върнати („приети“) в тялото. Предимствата на приемната IL-2/LAK имунотерапия при туморен плеврит с различна етиология се обясняват с антитуморния ефект на клетките-убийци, способността им да лизират туморните клетки [3, 4, 9]. Методът се характеризира с отсъствие на странични ефекти, с изключение на краткосрочно повишаване на температурата [9, 10 |.
Трябва да се отбележи, че методът на IL-2/LAK-имунотерапия е свързан с използването на специална технология за разделяне на ексудата на плазмени и клетъчни части, изолиране на лимфоидни и туморни клетки. Това дава възможност да се реализира нереализирана преди това възможност за подобряване на качеството на живот на пациент чрез реинфузия на плазмената част, надеждно пречистена от туморни клетки.
Първият опит с IL-2/LAK-имунотерапия, описан в чуждестранни публикации [4, 6, 9-11, 20], все още не е намерил приложение в Русия. Въпреки това, перспективите за развитието на този метод са очевидни, необходимостта да се обоснове с резултатите от лабораторни и клинични изследвания.
За имунотерапия с IL-2/LAK плевралната кухина се дренира с катетър за 2-4 седмици. Ексудатът се евакуира в стерилни контейнери с хепарин (20 U/ml) и се разделя на клетъчни и плазмени части чрез центрофугиране (1000 rpm, 20 min). Плазмената част, в случаите, когато е била реинфузирана, е била допълнително центрофугирана при 6000 rpm в продължение на 30 минути и след цитологичен контрол на елиминирането на клетъчната фракция, бактериологични и биохимични изследвания, е била върната интравенозно. Мононуклеарни клетки (MNC) и туморни клетки бяха изолирани от клетъчната фракция. LAK се генерира от MNCs, туморните клетки се използват за оценка на цитотоксичната активност на MNCs и LAKs. Всички пациенти са получили 1-3 курса на IL-2/LAC имунотерапия. Всеки курс се състоеше от 5-20 интраплеврални инжекции на IL-21 в доза от 0,5-1,0 милиона IU и 2-8 инжекции от LAK, по 50-100 милиона клетки всяка. Курсът на лечение продължи от 1 до 4 седмици.
Ефективността на лечението се оценява по времето на натрупване на ексудат и промени в неговия клетъчен състав (намаляване на броя на туморните клетки и увеличаване на броя на лимфоидните клетки). За пълния ефект, както е дефиниран от MB Bychkov [1], се приема липсата на плеврален излив за 1 месец. Частичният ефект съответства на незначително натрупване на течност в разграничените кухини, което не изисква нейното отстраняване.
MNC са получени от плеврален ексудат, използвайки техниката за разделяне на Ficoll-Hypague (Sigma) [3]. MNC се суспендират в среда RPMI-1640, допълнена с гентамицин, глутамин и IL-2 в концентрация от 1000 IU/ml. MNC се инкубират за 3-5 дни в CO2 инкубатор (при 37 ° С, в атмосфера от 5% CO2). През този период концентрацията на MNC се увеличава от 2 милиона на 3-4 милиона на ml. След това клетките се измиват от средата, разреждат се в изотоничен разтвор на натриев хлорид и се инжектират интраплеврално.