Работа номер 3
ОБОСНОВКА ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ НА РАБОТАТА. Определянето на активността на амилазата в урината и кръвния серум се използва за диагностициране на заболявания на панкреаса.
Метод принцип. Методът се основава на колориметрично определяне на концентрацията на нишестения субстрат преди и след неговата ензимна хидролиза. 0,01 N се използва като работен разтвор. йоден разтвор.
Дължина на вълната 630-690 nm (червен филтър), кювета с дебелина на слоя 1 cm.
В 2 епруветки (експериментална и контролна) анализът се извършва съгласно таблицата:
Разтвор на устойчив нишестен субстрат
загрейте за 5 минути във воден термостат при 37С
Нехемолизиран кръвен серум
загрейте за 5 минути във воден термостат при 37С
Нехемолизиран кръвен серум
и разтворите са фотометрични спрямо водата
ИЗЧИСЛЕНИЯ. Изчисляването на активността на α-амилазата в g разцепено нишесте на 1 литър серум за 1 час инкубация при 37 ° C се извършва по формулата:
X = 240
Ek е изчезването на контролната проба;
Eop - изчезване на пробна проба.
Активността на α-амилазата в кръвния серум е нормална = 16-30 g/hl, в урината - 28-160 g/hl.