Преаналитици. Инструкции за работа с пробен материал във ветеринарната практика
Инструкции за анализ преди работа с пробен материал във ветеринарната практика
Клинична химия серумни епруветки бели с гранули (Sarstedt), жълти с гел (BD) хематология EDTA епруветки червени (Sarstedt) или лилави (BD) хепаринови епруветки оранжев (Sarstedt) или зелен (BD) анализ на коагулацията цитратни епруветки зелен (Sarstedt) или син (BD) Специални епруветки EDTA апротининови епруветки розови (определяне на ACTH) Глюкоза и лактат Натриеви флуоридни епруветки жълти (Sarstedt) или сиви (BD) Стикери с баркод здраво натискат, за да залепнат добре и да не се отделят по време на транспорт или машинна обработка. 7-ми
Вземането на кръвна проба при кучета и котки Вземането на кръвна проба при кучета и котки се извършва при съвместни животни в vena cephalica antebrachii dexter (за десничари), която е разположена над и донякъде медиално на повърхността на предмишницата. Десният преден крайник е фиксиран и опънат отзад от асистент, така че вената да бъде затегната. Това улеснява намирането и предотвратява оттичането на вената. При неспокойни животни кръв може да се вземе и от страничната вена на сафена (куче) или медиална вена (котка) над глезена на задния крайник. За стягане на вената крайникът се изпъва и вената се задръства в хралупата на коляното (куче) или в средната височина от вътрешната страна на бедрото (котка). Вземане на кръв от главната вена 10
Вратната вена, вратната вена, също е подходяща за вземане на кръв. Главата или муцуната се задържат нагоре и се фиксират от асистент, докато човекът, който взема кръвта, задръства с лявата си ръка яремната вена на нивото на гръдния вход. В случай на гъсто коси или неспокойни животни, мястото на пункцията трябва да се обръсне и внимателно да се дезинфекцира, преди да се постави постоянен катетър. Вземане на кръв от вратната вена Вземане на кръв от главичната вена с пеперуда и конус на моновета 11
КРЪВ Антикоагулант Вземане на кръв от малки домашни любимци Скоростта на притока на кръв е от решаващо значение за получаване на достатъчно количество кръв. Поради това е препоръчително да се използват канюли с голям лумен (20 G) и подходящи съдове за събиране. При зайци и порове, както при кучета и котки, кръвта може да се събира с нормални EDTA и серумни епруветки; при морски свинчета и чинчили се препоръчва използването на малки съдове за проби с винтови капаци или съдове за еднократна употреба с капилярно действие (напр. Multivette, Microvette, Sarstedt) . Микроканюли В случай на малки вени, новите видове микроканюли (микроканюла, Sarstedt) са особено подходящи за подпомагане на достатъчното изтегляне на кръвта. Тъй като канюлите нямат конус, кръвта може да изтече оптимално, дори ако кръвното налягане е ниско. Набраздената дръжка гарантира, че канюлата е безопасно водена. Препоръчваме да използвате микроканюла с голям лумен 21 G (зелена). 12
Избраният метод за вземане на кръв от зайци, морски свинчета, чинчили и порове на практика е от страничната сафенозна вена, но са възможни и други места на пункция. Места за пробиване при дребни бозайници Видове места за пробиване Заек V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, A./V. auricularis lateralis 1 (само малко количество), ухо 2 морско свинче V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, подложки 2 Chinchilla V. jugularis, V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, V. caudali, V. sublingualis 2, подложка 2, ухо 2, пор, скон югуларна вена, странична сафенозна вена 1, антебрахиална вена 1, топче 2, ухо 2 Дегу югуларна вена, странична сафенозна вена 1, сублингвална вена, главна вена antebrachii, топка хамстер V. sublingualis 2, вена saphena lateralis, вена cephalica, топка 2 мишка, плъх V. лице 2, V. sublingualis, V. saphena lateralis, V. cephalica antebrachii, V. caudalis, топка 2 1 са подходящи за венозни катетри 2 капещи малки количества директно от мястото на пункцията 13
За диференциална кръвна картина се препоръчва да се подготвят и изпратят две цитонамазки веднага след вземането. Достатъчен размер на пробата често е трудно да се получи от птици и влечуги. Количествата, посочени в спецификацията на услугите, представляват минимални количества за съответните изпити, но се отнасят само до изследване на отделни параметри. Допустими проби Проби от кръв от птици и влечуги Проби от кръв от птици и влечуги са много податливи на хемолиза и дезинтеграция на клетките. EDTA има хемолитичен ефект върху кръвта на влечугите. Следователно литиевият хепарин е най-подходящ като антикоагулант (литиева хепаринова кръв за кръвна картина и определяне на съдържанието на олово, литиева хепаринова плазма за клинично-химични параметри и серологични тестове). Птица до 1% телесно тегло Папагал (40 g телесно тегло) максимум 0,4 ml cockatiel (100 g телесно тегло) максимум 1,0 ml голям папагал (400 g телесно тегло) максимум 4,0 ml влечуго до 0,5% телесно тегло, т.е. максимум 0,5 ml на 100 g телесно тегло. 16.
Вземане на кръв при птици При птиците се взема кръв или от вената на крилото, или от дясната яремна вена. Техника за вземане на кръв от вената на крилото Помощникът фиксира птицата в легнало положение и проверяващият издърпва едното крило на една страна с една ръка. След овлажняване на лакътната област, лакътната вена, която тече под прав ъгъл към сухожилията, става видима и може да бъде блокирана с палеца на ръката, която държи крилото. Вената се пробива с другата ръка. Кръвта се взема чрез аспирация с прикрепената спринцовка. След отстраняване на канюлата, мястото на пробиване леко се компресира с тампон, напоен с железен хлорид. Вземане на кръв от крилната вена на амазонка По правило пациентът се поставя обратно в клетката с прикрепен тампон. Тампонът, залепен за кожата поради съсирването на кръвта, по-късно пада. 17-ти
Вземане на кръв от коне При еднокопитни венозната кръв обикновено се взема от една от двете шийни вени (външна югуларна вена). Венепункцията се извършва при прехода от средната към горната трета на шията, тъй като омохиоидният мускул е разположен защитно между повърхностната югуларна вена и по-дълбоката обща каротидна артерия, което намалява риска от артериална пункция. Вените се изследват за задръствания, оттичане на кръв, увеличена обиколка или доказателства за възпаление или предишни увреждания. Като правило е достатъчна повърхностната дезинфекция на косата и кожата. В случай на много дълга и плътна козина (напр. Шетландски понита, исландци), може да е полезно да стрижете косата, за да визуализирате по-добре вената и да дезинфекцирате мястото на пункцията. Като алтернатива, кръвта може да се вземе и от главичната вена, сафенозната вена (особено при жребчета) или повърхностната епигастрална вена. Вземане на кръв от яремната вена 20
Вземане на кръв от камили Кръвта се взема и от шийната вена на камилите. За разлика от повечето домашни животни, югуларната вена и каротидната артерия в камилите на Новия свят преминават заедно през най-дългата част на шията и са разделени само на три до четири сантиметра пред ъгъла на долната челюст от мускула omohyoideus. Следователно случайната пункция на артерията може да доведе до обширно образуване на хематом. Тъй като камилите могат активно да изтласкват подвижните мускули на шията пред вената, са възможни много високи стойности на СК (> 10 000 U/l) поради проникването на мускулите. Поради ценното качество на козината, бръсненето на мястото за вземане на кръв е противопоказано при камили. Тъй като вените се срутват много бързо, обикновено не е възможно да се вземе кръв с вакуумна система. За да не се замърси козината с кръв, се препоръчва събиране на кръв чрез аспирация (напр. S-Monovette, Sarstedt). Вземане на кръв от алпака 21
КРЪВ Антикоагулант Вземане на кръв от говеда, овце и кози Външната яремна вена обикновено се използва за вземане на кръв от говеда, овце и кози. Той е лесно достъпен и се показва ясно, когато е забит. При говедата кръв може да бъде взета и от средната опашна вена от долната страна на опашката. Отнемане на кръв от опашната вена Отнемане на кръв от яремната вена 22
КРЪВ Антикоагулант Приготвяне на кръвна мазка След избърсване на първата капка кръв от добре смесената епруветка, използвайте капиляр или пипета, за да я пуснете върху края на предметното стъкло. След това поставете втория предметно стъкло пред мястото на приложение и го върнете малко. Кръвта се разпределя равномерно по ръба на слайда в 45 - Задръжте ъгъла и водете бързо и равномерно към противоположната тясна страна. Кръвта се изтегля зад ръба, а не се изтласква! Идеално е намазка, която е приблизително 2/3 от дължината на повърхността на слайда, оставя ръб свободен от двете страни и завършва с прозрачен флаг. Оставете намазката да изсъхне легнала плоска Маркирайте плъзгача по ръба на постелката с молив или баркод етикет (залепете на тясната страна на точката на закрепване; не върху флага) Изпратете в плъзгащата втулка 26
правилно грешен номер на баркод номер на баркод номер номер на баркод номер на баркод номер номер на баркод номер на баркод номер баркод идеален твърде кратък твърде дълъг не флаг OT получер твърде тесен твърде широк неравен
Недостатъчното завъртане на EDTA тръбата след отстраняване и по този начин недостатъчно смесване на кръвта с EDTA, добавена като антикоагулант, също води до образуване на съсиреци (вж. Също последователността на вземане на кръв, стр. 9). настъпва (повишен вискозитет на кръвта). За да се направи разлика между спонтанна аглутинация и образуване на ролки, е полезно кръвта да се измие 3 пъти със същото количество физиологичен разтвор. Ако аглутинацията продължава, имунната хемолитична анемия се счита за доказана. Аглутинация на еритроцитите Спонтанната аглутинация на еритроцитите трябва да се разграничава от преаналитичната коагулация на кръвта. Това може да е индикация за имунна хемолитична анемия, при която наличието на автоагглутини (IgG и IgM) може да доведе до макроскопски видимо натрупване на еритроцити. Съществува възможност за объркване с така нареченото образуване на ролки, което е шанс да се открие особено при коне и котки или в контекста на остро възпаление, спонтанна аглутинация при имунохемолитична анемия (куче) 33
Изследвания на урина Пробите на урината не трябва да са замърсени отвън, така че облачността или промените в цвета да могат да бъдат оценени без артефакти. С изключение на микробиологичните изследвания, всички изследвания се извършват с помощта на естествена урина. Вероятно. За значим резултат пробата трябва да се раздели и да се изпрати както стабилизирана, така и естествена урина. За транспортиране са необходими винтови съдове. Цистоцентеза Цистоцентезата е най-подходящият метод за събиране на урина при кучета и котки. Ако се направи правилно, това е безопасна и лесна процедура. В зависимост от личния опит и техническото оборудване на практиката, цистоцентезата може да се извърши с помощта на ултразвук или сляпо. За пункцията са необходими канюла (22 G, черна) и спринцовка (10 ml). В зависимост от състоянието на козината, мястото на пробиване се обръсва и кожата се дезинфекцира или козината се разделя след прилагане на алкохол. Не е необходима асептична подготовка на мястото на пункцията. 34
Ако е възможно, пикочният мехур се пробива под сонографски контрол. Ако пикочният мехур е достатъчно напълнен и осезаем, цистоцентезата може също да се извърши безопасно без ултразвуково устройство и се извършва върху кучето в изправено положение или в легнало или странично положение. При котките пункцията е най-лесна в странично положение. Пикочният мехур се фиксира с едната ръка, а другата ръка въвежда канюлата с прикрепена спринцовка във вентралната към вентралатералната област на пикочния мехур и го аспирира. Катетеризация При коне и говеда се използва пикочен катетър, ако не може да се събере спонтанно изхвърлена урина. В случай на малки животни, пикочният катетър трябва да се използва предимно за проверка на проходимостта на уретрата, в противен случай преобладават недостатъците на този метод за отстраняване (травма на лигавицата, риск от въвеждане на микроби). Ултразвуково насочване цистоцентеза 35
Получаване на предимства и недостатъци Лабораторни изследвания спонтанно директно събиране - нестерилен ген на статус на урина 1 (напр. Със замърсяване с утайка на урината 1 уретра с черпак, препуциум, клинично-химически или съдови) изследвания на вагината и околната среда (напр. UP/C) 1, 2 от неподходящата за имунологични изследвания микробиологична кутия за отпадъци (напр. UCC) 1,2 (катетър, прегледи от перлени отпадъци) катетър пикочен мехур - ниско замърсяване - състояние на урината1 катетър опасност урина утайка1 пикочни пътища/клинично-химични и увреждане на пикочния мехур имунологични изследвания 1,2 кръв) микробиологично изследване 2 микроба се вкарват в пикочния мехур отвън цисто-транскутанно чист пикочен мехур микробиологично изследване 2 централна пункция на всяко замърсяване с всички други изследвания (виж по-горе) кръв на пикочния мехур 1 = естествена урина (стерилна, непокрита тръба ) 2 = стабилизирана урина (специална епруветка с борна киселина) В зависимост от желаните изследвания Ако е необходимо, разделете урината и изпратете както естествена, така и стабилизирана урина. 37
Събирането трябва да се направи преди започване на антибиотична терапия. Ако не е възможно да се изпратят пробите директно в лабораторията, пробите могат да се съхраняват в хладилника за 1 до 2 дни за културно бактериологични изследвания. Това се отнася и за проби от мляко и урина в епруветки с добавен стабилизатор. Микробиологичен материал за изпитване Правилният подбор на материала за пробата е от съществено значение за резултата от бактериологичен тест. За да се постигне високо ниво на информативна стойност, материалът трябва да бъде получен и транспортиран по такъв начин, че първоначално присъстващите патогени да останат способни за размножаване или откриваеми по време на транспортирането. Анаероби и особено чувствителни бактерии, като Б. β-хемолитични стрептококи или Haemophilus spp., Не трябва да се съхраняват, но незабавно да се носят в лабораторията. Предимно стерилен материал за проба (кръвна култура, синовия и др.) Също трябва да бъде изследван възможно най-бързо, тъй като в случай на инфекция най-малката промяна в броя на микробите или в зародишния спектър може да доведе до фалшифициран резултат. 38
За микробиологичната обработка и оценка на материал за изследване, в допълнение към осигуряването на самоличността е абсолютно необходима следната информация: Важна предварителна информация Време на отстраняване/дата Произход на материала за изследване (напр. Тампон на шийката на матката, плеврална пункция) Ред за изследване и въпрос (напр. Откриване на патогенни микроби и/или специални Микроби) тампони Когато отстранявате тампона, уверете се, че той не влиза в контакт с нестерилни предмети или бактериално колонизирани лигавици и др. Мазки от области, които са физиологично колонизирани от бактерии (кожа/устна кухина/нос) са посочени само за конкретни въпроси. В случай на назални тампони трябва да се осигури възможно най-дълбокото отстраняване след почистване на носното огледало. За най-добри възможни резултати от изследването тампонът трябва да бъде прехвърлен в транспортна среда веднага след изваждането. Предварителна диагноза/клинична информация (напр. Поява на заболяване, клинични симптоми, престой в чужбина) Предварително лечение с антибиотици Подробности за предварителните прегледи, напр. Б. MRSA вече е открит на. Дебел тампон тънък тампон 39
Вагинална цитология Цитологичната картина на вагинална цитонамазка в кучката позволява да се определи състоянието на цикъла и предоставя информация за патологичните процеси. За тази цел, ако е възможно под контрол на спекулума, се получава намазка от черепния, гръбния или страничния вагинален свод, разточва се на предметно стъкло и след това образецът се изсушава на въздух. Поради крехкостта на клетките, тампони, които не са набраздени, не могат да бъдат оценени. Техника на разгръщане за вагинално намазване 45
ДОСТАВКА Доставка/транспортиране на проби След етикетиране на епруветките и попълване на формуляра за изпитване, пробите се опаковат за транспорт. SYNLAB.vet предоставя необходимите материали най-вече безплатно. Опаковката трябва да има достатъчен защитен ефект срещу неизбежните транспортни товари, които възникват по време на транспортирането (по-специално, не трябва да се разкъсва или спуква) и да не причинява смущения в процеса на обработка. Следователно в случай на транспорт по пощата и национални куриерски служби винаги трябва да се използват многокомпонентни опаковки, които се състоят от действителния контейнер за проби, защитна или транспортна втулка и външната опаковка. Ако се изпрати течен материал, трябва да се постави абсорбиращ слой (абсорбираща подложка) между първичния и вторичния съд. Транспортната опаковка се състои от 3 компонента: 1.) самата проба за проби (първичен съд) 2.) вторичен съд, непропускащ течове Вместо картонена кутия може да се използва и PE плик за доставка. Етикетът за освободен пробен материал (виж по-долу) гласи освободена ветеринарномедицинска проба. Веществата от категория В трябва да бъдат етикетирани с етикета на ООН 3373 за опасни стоки. 3.) външната опаковка 48