Платформа за трансплантация на костен мозък за изследване на ролята на дендритните клетки през
Обобщение
Болестта присадка срещу гостоприемник е основно усложнение след алогенна трансплантация на костен мозък. Дендритните клетки играят критична роля в патогенезата на заболяването присадка срещу гостоприемник. Настоящата статия описва нова платформа за трансплантация на костен мозък, за да се изследва ролята на дендритните клетки в развитието на заболяването присадка срещу гостоприемник и ефекта присадка срещу левкемия.
Резюме
Въведение
Алогенната трансплантация на хематопоетични стволови клетки (BMT) е ефективна терапия за лечение на хематологични злокачествени заболявания 1,2 чрез ефекта на присадка срещу левкемия (GVL) 3. Въпреки това, донорните лимфоцити все още извършват нежелани имунологични атаки срещу реципиентни тъкани, процес, наречен присадка срещу гостоприемник (GVHD) 4 .
Активирането на донорни Т лимфоцити от гостоприемни антиген представящи клетки (PCAs) е от съществено значение за развитието на DGV. Сред APC, дендритните клетки (DC) са най-мощните. По своята същност те са способни да индуцират GVHD поради превъзходното им поемане на антиген, експресията на Т-клетъчно-стимулиращи молекули и производството на провъзпалителни цитокини, които поляризират Т-клетките в патогенни подгрупи. Получателите на DC са от съществено значение за улесняване на прайминга на Т клетките и индуцирането на GVHD след трансплантация 11, 12. В резултат на това CDC се превърнаха в интересни цели при лечението на GVHD 12 .
TBI е необходим за подобряване на присаждането на донорни клетки. Поради TBI ефекта, получателите на DC се активират и оцеляват за кратко време след трансплантацията 12. Въпреки значителния напредък в използването на биолуминесценция или флуоресценция, създаването на ефективен модел за изследване на ролята на реципиентните DC в GVHD все още е трудно.
Тъй като донорните Т-клетки са движещата сила на активността на GVL, терапевтичните стратегии, използващи имуносупресивни лекарства като стероиди за потискане на алореактивността на Т-клетките, често причиняват рецидив на тумора или инфекция. Следователно насочването на CD към получатели може да осигури алтернативен подход за лечение на GVHD, като същевременно се запази ефектът на GVL и се избегне инфекция.
Накратко, настоящото проучване предоставя платформа, за да се разбере как различните видове сигнализиране в CD реципиенти регулират развитието на GVHD и ефекта GVL след BMT.
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Протокол
Експерименталните процедури са одобрени от Институционалния комитет за грижи и употреба на животните към Университета на Централна Флорида.
1. GVHD индукция
ЗАБЕЛЕЖКА: Трансплантацията на алогенни клетки от костен мозък (BM) (стъпка 1.2) се извършва в рамките на 24 часа след облъчването. Всички описани по-долу процедури се извършват в стерилна среда. Извършете процедурата в качулка за тъканна култура и използвайте филтрирани реактиви.
2. Модел на котрансплантация
3. BMT GVHD/GVL модели
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Представителни резултати
Несъответстващият основен модел B6 на MHC (H2k b) -BALB/C (H2k d) напълно съответства на развитието на GVHD след трансплантация (Фигура 2). Шестте клинични признака на GVHD, установени преди това от Cooke et al. 16 са настъпили при реципиенти, трансплантирани с WT-B6 Т клетки, но не и при реципиенти, трансплантирани само с BM (стъпка 1.5), които представляват GVHD-отрицателната група. В този модел има две фази в развитието на GVHD. Първо, пикът на тежест е около 11 дни след трансплантацията, последван от намаляване на клиничните резултати и възстановяване на телесното тегло до 16 дни. В тази фаза няколко механизма като възпаление и синдром на присаждане, причинени от радиация, задвижват патогена на заболяването и GVHD. Получателите равномерно се поддават на GVHD приблизително 30 до 40 дни след трансплантацията.