Откриване на хероин и продукти за разграждане на хероин в текстила - PDF безплатно изтегляне

Доказателство за хероин и продукти за разграждане на хероин в текстила Заключителна дипломна работа следдипломно обучение по токсикология в Университета в Лайпциг Manja Krammer Берлин, 13.07.2008

откриване

1. Въведение 1.1 Изследователски въпрос 1.2 Описание на случая 1.3 История на хероин 1.4 Фармакокинетика 1.5 Остри ефекти 1.6 Хронични ефекти 1.7 Интоксикация 1.8 Терапия 1.9 Разграждане на хероина в човешкото тяло 2. Експериментално 2.1 Предварителни тестове 2.1.1 Пробен материал 2.1.2 Стандарти за тънкослойна хроматография 2.1.3 Метод на екстракция за тънкослойна хроматография 2.2 Високоефективен метод на течна хроматография (HPLC) 2.2.1 Програма за градиент 2.2.2 Стандарти и разтвори, използвани за HPLC анализ 2.2.3 Проверка на програмата за градиент 2.3 Подготовка на проби за HPLC 3. Резултати 4. Дискусия 5 Приложение 6. Литература 7. Благодарности 2

Фигура 1: Курс на концентрация на хероин моноацетилморфин и морфин в пълна кръв след еднократно интрамускулно приложение на 6 mg хероин НС1. Средно 6 субекта. [2] Фигура 2: Илюстрация на изключително бързото разграждане на хероин в цяла кръв. След еднократно интравенозно приложение на средно 4,5 mg хероин HCl, нивото на хероина в кръвта намалява с около 90% между втората и десетата минути. Средни стойности от 4 тествани лица. [2] 5

От друга страна, това е еритроцитна ацетилхолинестераза (AChE), която според кинетиката от първи ред бързо хидролизира хероина до 6-моноацетилморфин, а във втори етап на хидролиза 6-MAM да хидролизира до морфин. Втората стъпка е по-бавна от първата. [5] Въз основа на факта, че собствените кръвни холинестерази на организма хидролизират хероин in vitro на два етапа на хидролиза чрез 6-МАМ, за да образуват морфин, в експеримента човешката кръв се смесва с хероин, който преди това се прилага върху парче текстил. Целта беше да се провери дали прясната човешка кръв извън тялото (екстракорпорална) е в състояние да хидролизира хероина. Активни ли са кръвните холинестерази извън тялото и ако да, за колко време? Фигура 3 [6] 8

Докато коефициентът на морфин/кофеин се увеличава много бавно, но непрекъснато от около 10 минути. Фигура 4 Фигура 5 След оценка на предварителните тестове, времето за инкубация беше определено на 90 минути, тъй като химическата реакция очевидно все още не е приключила след 60 минути. 12

2.3 Подготовка на пробите за HPLC Четирима служители на института се представиха като тестови субекти. Субектите бяха три жени и един мъж. Възрастта на участниците е между 30 и 60 години. От всеки от тях са взети около 10 ml венозна кръв, която е използвана незабавно за експеримента. Изследвано е влиянието на времето върху химичното преобразуване. Още по-добре, колко дълго холинестеразите в кръвта извън тялото са в състояние да превърнат хероина в моноацетилморфин. Направени са 4 тестови серии, по 1 тестова серия на предмет. Тази серия от тестове се състоеше от 7 партиди, тя беше съставена от 1 празна стойност и 6 различни пъти. Химичната реакция се прекъсва след 5 минути, след 10 минути, след 20 минути, след 40 минути, след 60 минути и след 90 минути чрез добавяне на метанол. Подготовка на пробите Фигура 6 13

Предварителен експеримент с тънкослойна хроматография Фигура 7 3.2 Резултати от HPLC Уличният хероин съдържа кофеин, поради което кофеинът е избран за вътрешен стандарт, тъй като той не се променя при добавяне на цяла кръв. Кръвните холинестерази нямат влияние върху количеството кофеин, което означава, че във всички проби трябва да се съдържа същото количество кофеин. Количествата хероин, MAM и морфин са измерени в ng/ml кръв. За по-добра оценка резултатите бяха показани като коефициенти. Стойностите на съотношението са избрани, тъй като е известно, че уличният хероин присъства в различни концентрации. Чрез избора на коефициент е възможно представяне и интерпретация, независимо от концентрацията. Хероин/кофеин (Q 1) MAM/кофеин (Q 2) Морфин/кофеин (Q 3) Субектите са номерирани 1-4 (напр. Q 1/1, Q 1/2, Q 1/3, Q1/4) 15-то

Таблично представяне на резултатите Време Хероин/Кофеин MAM/Кофеин Морфин/Кофеин мин. Q 1/1 Q 1/2 Q 1/3 Q 1/4 Q 2/1 Q 2/2 Q 2/3 Q 2/4 Q 3/1 Q 3/2 Q 3/3 Q 3/4 5 3.1 2.86 2.98 3.0 0.14 0.19 0.15 0.17 0 0 0 0 10 3.0 2.89 2 .90 3.0 0.19 0.20 0.19 0.19 0 0 0 0 20 2.66 2.75 2.58 2.74 0.29 0.31 0.40 0.34 0 0 0, 04 0 40 1,40 1,79 2,27 2,23 0,91 0,82 0,58 0,61 0,15 0,14 0,05 0,11 60 1,30 1,34 2,07 1, 59 0,98 1,07 0,70 0,87 0,13 0,19 0,05 0,17 90 1,18 1,45 1,66 1,21 1,09 1,02 0,77 1, 08 0,18 0,14 0,17 0,25 Тема 1, Тема 2, Тема 3 и Тема 4 16

Графично представяне на резултатите 17

Защо евентуалният полиморфизъм в цитохром P450-2D6 не трябва да има влияние върху разграждането на хероина до MAM и по-нататък до морфина? Което може да обясни защо тестовият субект 4 разгражда хероина по-бързо от другите тестови субекти. 5. Приложение програма за градиент за HPLC 20

6. Литература [1] Hans Marquard и Sigfried Schäfer (2004) Учебник по токсикология, страница 952f Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbh Stuttgart [2] PXIten (1994) Шофиране под въздействието на лекарства или лекарства: Съдебна интерпретация и оценка/Институт по съдебна медицина IRM, Съдебна медицина Токсикология на Университета в Цюрих, издателство Цюрих IRM 1994, страници 188-191 [3] Волфганг Декант и Спирос Вамвакас, (2005) Токсикология, Въведение за химици, биолози и фармацевти, страница 242, Академично издателство „Спектър“ [4] Франц-Ксавер Райхл (2002) Taschenatlas der Toxikologie, стр. 76, Thieme Verlag [5] Asher Y Salomon, Zafir Goren, Yaniv Avissar и Hermona Soreq, човешки еритроцити, но не мозъчни ацетилхолинестеразни хидролизират хероин до морфин, клинична и експериментална фармакология и физиология96 (1999) 600 [6] Ян Г. Хенгстлер (2004) Лекарства в съдебната токсикология, PGS Toxikologie der Universität Leipzig, 9. Съкращения на зрелостта AChE BuChE Erythrocyte- Ацетилхолинестераза Серумна бутирилхолинестераза 6 -MAM 6-Моноацетилморфин GC-MS DC HPLC Газова хроматография-Масова спектрометрия Тънкослойна хроматография Високоефективна течна хроматография 23

7. Благодаря Благодаря, отивам на Dr. Риселман и екипът му от Държавния институт по съдебна и социална медицина в Берлин. Без тях тази работа не би била възможна за мен. Вие ми дадохте възможност да направя работа с практически опит. Дадоха ми възможност да разгледам по-отблизо аналитичните процедури и да работя самостоятелно с тях. Бих искал да благодаря на съдебните лекари, че все още намират време по време на работата си, за да ми вземат кръв, за да мога да провеждам експериментите си. Бих искал да благодаря на г-жа Kastner, г-жа Köhler, г-жа Roscher, г-жа Vejmelka и г-жа Wangering, които винаги бяха до мен със съвети и действия. 24