Молекулярно-генетични и клинични изследвания на непоносимост към лактоза (хиполактазия) - PDF безплатно

От Института по клинична химия и лабораторна медицина на Медицинския факултет на Университета в Росток Директор: проф. Д-р. мед. Peter Schuff-Werner Молекулярно-генетични и клинични изследвания на непоносимост към лактоза (хиполактазия) Встъпителна дисертация за придобиване на академична степен на доктор по медицина на Медицинския факултет на Университета в Росток, представена от Йоханес Фут, роден на 20 февруари 1981 г. в Потсдам Росток 2008 urn: nbn: de: gbv: 28-дис2010-0009-9

клинични

Декан: проф. Д-р мед. Емил Райзингер 1-ви рецензент: проф. Д-р мед. Стефан Либе (Клиника по вътрешни болести/Катедра по гастроентерология/Университет в Росток) 2-ри рецензент: проф. Д-р мед. Hartmut Hans-Jürgen Schmidt (Експериментална трансплантационна хепатология/Westfälische Wilhelmsuniversität Münster) 3-ти рецензент: Priv.-Doz. Д-р мед. Майкъл Щайнер (Институт за клинична химия и лабораторна медицина/Университет в Росток) Местоположение на дисертацията: Ден на обществената защита в Росток: 27 май 2009 г.

Съдържание Списък на фигурите Списък на таблиците Списък на съкращенията 1. Въведение.1 1.1 Исторически конспект. 1 1.2 Класификация на лактазната недостатъчност. 2 1.3 Физиология и патофизиология на лактозната малабсорбция.3 1.4 Клиника по лактозна малабсорбция. 6 1.5 Диагностика на малабсорбция на лактоза. 8 1.6 Терапия на лактозна малабсорбция ... 9 1.7 Първичен дефицит на лактаза при възрастни. 11 1.7.1 Епидемиология. 13 1.7.2 Молекулярна генетика 14 2. Цел. 17 3. Материал и методи 18 3.1 Тестване на хора и пациенти 18 3.2 Изолация на ДНК. 18 3.3 Генотипизиране. 19 3.3.1 PCR-RFLP. 19 3.3.2 PCR в реално време (LightCycler). 23 3.4 Лактозен H2 дихателен тест. 27 4. Резултати. 33 4.1 Епидемиологично проучване. 33 4.1.1 Субекти. 33

4.1.2 Генотипизиране на полиморфизма LCT-13910 в кохорта от кръводарители на Rostock. 33 4.1.3 Генотипизиране на полиморфизма LCT-13910 в южнокорейска кохорта. 34 4.1.4 Генотипизиране на полиморфизма LCT-13910 с помощта на PCR в реално време (LightCycler). 34 4.2 Клинично проучване. 34 4.2.1 Пациенти. 34 4.2.2 Разпространение на H2 непроизводители. 36 4.2.3 Производители на H2: Резултати от теста за дишане на H2 и генотипиране. 36 4.2.4 H2 непроизводители: клинични находки и генотипиране. 38 5. Дискусия. 40 5.1 Епидемиологично проучване. 40 5.2 Клинично проучване. 47 6. Резюме. 59 7. Библиография. 61 тези Декларация за независимост CV Благодарности

Списък на фигури 1.1 Физиология на абсорбцията на лактоза. 5 1.2 Патофизиология на лабтозната малабсорбция. 6 3.3 Откриване на трите генотипа на полиморфизма LCT-13910. 23 3.4 Принцип на флуоресцентен резонансен трансфер на енергия (FRET). 26 3.5 Илюстрация на специфичните за алела криви на топене на единичния нуклеотиден полиморфизъм LCT-13910. 27 3.6 Схема на оценката, базирана на H2 дихателния тест. 29 3.7 Схема за събиране на констатации с настоящия статут на H2, който не е производител 30 3.8 Въпросник за записване на анамнестични данни 31 3.9 Журнал на събитията за записване на оплаквания по време на извършване на лактозен H2 дихателен тест. 32 5.10 Разпространение на първичен дефицит на лактаза при възрастни в Европа. 42

5.18 Потенциални причини за фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати от теста за дишане H2. 51

Списък на съкращенията AC ДНК дНТФ аденин цитозин дезоксирибонуклеинова киселина деоксинуклеозид трифосфат EDTA етилендиаминтетраоцетна киселина F напред (преден праймер) FLU флуоресцентно багрило FRET флуоресцентен резонансен енергиен трансфер G гуанин GLUT глюкозен транспортер Lactosetransporter Laktoset-Laktolerase Laktoset-Laktolerase Laktoset-Laktolerase Laktosaktin-Laktor-Laktolerase Laktosaktin-Laktor-Laktorase Lactoshlactor-Lactoscot-Lactor-Lactolase Lactoscot-Lactor-Lactolase Lactoscentrase Lactoscot-Lactolactase Lactoshromase Lactoshromase Lactoshrolase Lactosity-Lactor-Lactorase Lactoshromase дефицит на поддръжка Na натриев отрицателен (контрол) ppm части на милион PCR полимеразна верижна реакция R обратен (обратен праймер) RFLP рестрикционен фрагмент дължина полиморфизъм rpm Обиколки в минута SGLT Натриев зависим глюкозен транспортер T Тимин WT див тип

Тънкочревна лактаза Тънкочревен епител Чревен транзит Лактоза Глюкоза + галактоза SGLT1 Дебело черво Дебелочревен епител Кръв Лактоза H 2 O H 2 O Бактериална ферментация Кратковерижни мастни киселини Бактериални токсини H 2 CO 2 Flatus Фигура 1.2: Патофизиология на лактозната малабсорбция. 1.4 Клиника за малабсорбция на лактоза Симптомите, които се проявяват след поглъщане на храни, съдържащи лактоза, са неспецифични и включват болки в корема, боробории, метеоризъм и диария, а понякога и запеци. Освен това са докладвани редица системни оплаквания, чиято причина се смята за токсични метаболити, които възникват в хода на бактериалния метаболизъм на лактозата (Таблица 1.1). 6-то

Лактозата трябва да бъде посочена в списъка на съставките. Средното съдържание на лактоза в някои избрани храни е обобщено в таблица 1.2. Таблица 1.2: Съдържание на лактоза в млякото и млечните продукти (на базата на Renner и Renz-Schauen 1994). Мляко или млечен продукт Съдържание на лактоза (g на 100 g) Потребителско мляко (прясно мляко, UHT мляко) 4.8-5.0 Кондензирано мляко (4-10% мазнини) 9.3-12.5 Суроватка, суроватъчни напитки 2.0-5, 2 мляко на прах 38,0-51,5 масло 0,6-0,7 кварка (10-70% мазнини в сухо вещество) 2,0 8,0 нискомаслено кварка 4,1 кисело мляко 3,7-5,6 твърдо, Полутвърдо, меко сирене