Контрол на хомеостазата на чревната епителна бариера чрез протеин киназа, активирана от
Северин Оливие
Вторник, 26 ноември в 14:00
Институт Кочин
22 rue Méchain Париж 14-ти
Ръководител: Беноа Виолет
Резюме на тезата:
Чревната епителна бариера има двойна функция в тялото, позволява усвояването на хранителни вещества, но също така осигурява защита срещу патогени и токсини. Монослоят от епителни клетки, покриващи червата, представлява истинска физическа бариера благодарение на мрежата от свързващи протеини, свързващи тези клетки помежду си. Сред тези протеини те са по-специално тези, които участват в образуването на плътни връзки, които регулират парацелуларната пропускливост. Дисфункции на чревната бариера се наблюдават при определени патологии като хронично възпалително чревно заболяване или затлъстяване. АМР-активираната протеин киназа (AMPK) е известна главно със своята функция като сензор за клетъчна енергия, но се смята, че тази киназа също контролира плътно свързване, както е показано в бъбречните епителни клетки. Функциите на AMPK в червата са малко проучени и в този контекст се интересуваме от неговата роля в хомеостазата на чревната бариера.
За да отговорим на нашия проблем, работихме върху модели in vivo и инвитро с промени в чревната епителна бариера. Използвани са два патологични модела in vivo: единият е модел на затлъстяване, индуцирано от диета с високо съдържание на мазнини, а другият е модел на колит, имитиращ хронично възпалително чревно заболяване чрез лечение с DSS (Dextran Sulfate Sodium). На тези модели ние изучихме по-специално: 1) последиците от отсъствието на AMPK, използвайки модел на мишка, представящ делеция на AMPK специално на нивото на чревния епител (Vil-AMPK KO), и 2) въздействието на фармакологичното активиране на AMPK за чревната пропускливост по време на индукция на колит. И накрая, генерирахме чревни клетки Caco-2, обезсилени за AMPK (KO) чрез технологията CRISPR/Cas9, за да се характеризират по-добре инвитро ролята на AMPK в процеса на повторно сглобяване на плътни връзки в отговор на предизвикателство с калций (превключване на калций).