Клинична лабораторна диагностика Разграждане на органен блок, метаболизъм - PDF Безплатно изтегляне
Клинична лабораторна диагностика Храносмилане на органен блок, метаболизъм M. Stirn, R. Hofmann-Lehmann Vetsuisse Faculty, University of Zurich http://www.epi4dogs.com/ Куче Клер
Съдържание Малдигестия, малабсорбция (панкреас и чревна функция) изследване на изпражнения Абсорбционни тестове (тест за ксилоза кон) Трипсин-подобна имунореактивност (TLI) Витамин В12, фолиева киселина Панкреатит Функция на черния дроб Страница 2
Казус Джак Ръсел Териер Круна жена, на 2 години, 6 кг телесно тегло Анамнеза Масивна загуба на тегло (3,5 кг) Много екскременти, често, кашави, светлокафяви, миризливи, хронична диария Полифагия Слаба, не обича ходенето Клиничен преглед Общо състояние умерено Апатичен корем напрегнат Символичен Джак Ръсел Страница 3
Клинична химия Cruna F2 Материал хемолитичен; Маркираното измерване може да бъде нарушено. страница 5
Клинична химия Cruna ff F3 материал хемолитичен; Маркираното измерване може да бъде нарушено. страница 6
Тълкуване на лабораторни стойности на пациента, преаналитика Ненормална ли е стойността на пациента или лабораторната стойност? Видове, възраст, раса, предварително лечение, остър стрес? Хемолиза, липемия и т.н.? Комбинирайте лабораторните стойности в значими групи. Промени, специфични за органите? Поставено в клиничен контекст Има ли обяснение за промените? Разработване на диагностичен план Въз основа на Лесли С Шарки, Университет в Минесота: Оптимизиране на използването на диагностична клинична биохимия, 13-та конференция на ESVCP/ECVCP, 2011 Тринити Колидж, Дъблин, Ирландия Страница 7
Тълкуване на лабораторни стойности (не е изчерпателно) Левкоцитоза, лимфоцитоза, лека моноцитоза Възбуда? Лека нормоцитна, нормохромна анемия хипопролиферативна? хронични събития (възпаление, инфекция), бъбреци (еритропоетин), хипометаболитни (щитовидна жлеза, дефицит на протеини) ALT и AST повишената хемолиза нарушава черния дроб? (Чернодробна лекция) алкална фосфатаза умерено повишена - (чернодробна лекция; жлъчен канал, черва, бъбреци, остеобласти; куче: свързано с кортикостероиди, след това силно повишено, често плюс лимфопения) амилаза намалена (панкреас, бъбреци, черен дроб, следваща лекция, панкреатит. Увеличава се важно; Понижаването обикновено не е при кучета) серумните протеини намаляват, албуминът долна граница увеличава загубата (стомашно-чревния тракт, бъбреците), намалява производството (черен дроб, малабсорбция)? Холестеролът рядко намалява, нарушено храносмилане, малабсорбция Cruna страница 8
Възможни причини за бактериална инфекция за отслабване? Вирусна инфекция? Паразитоза? Нарушаване на абсорбцията в тънките черва? Храносмилателно разстройство? Дисфункция в панкреаса? (екзокринна панкреатична недостатъчност, EPI) възпаление на панкреаса? Нарушение на дренажа на жлъчката? Малдигестие, малабсорбция Ако Cruna подозира проблем с панкреаса или хронично заболяване на червата, допълнителни тестове. За целта въведете кучето отново на гладно на следващия ден страница 9
Maldigestion Екзокринна панкреатична недостатъчност Недостатъчна секреция на панкреатични ензими 14 май 2013 г. храносмилателен тракт, 2-ра JK, Regina Hofmann-Lehmann страница 10
Храносмилателни ензими от панкреаса Панкреатичните ензими играят важна роля в храносмилането: а-амилазни въглехидрати (полизахариди) липазни мазнини (в глицерол и мастни киселини; има нужда от емулгиране чрез жлъчни киселини) трипсинов протеин (ендопептидаза, аргинин, лизин) химотрипсида А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеин карбоксипсипта А протеини карбоксипсипта А протеин храносмилане Екзопептидаза, карбоксилен край) еластаза еластин DNase, RNase DNA, RNA à освобождаване като неактивни форми (зимогени), разцепване в червата за избягване на авторазграждане страница 11
Малдигестия Екзокринна панкреатична недостатъчност Недостатъчна секреция на панкреатични ензими при кучета и котки! Не при коне и говеда Форми: - Непълнолетни поради ацинарна атрофия (немска овчарка) - Хроничен панкреатит - унищожаване на екзокринния и евентуално ендокринния панкреас - запушване на панкреатичните канали 14.05.2013 храносмилателен тракт, 2-ра ЖК, Регина Хофман-Леман, страница 12
Чревна малабсорбция Локална или дифузна малабсорбция на различни хранителни вещества (напр. Въглехидрати, мазнини, протеини) или специфични хранителни вещества (напр. Кобаламин) Причини: - Възпалителни - неопластични - Lymphangieectasia 14 май 2013 г. Храносмилателен тракт, 2-ра JK, Regina Hofmann-Lehmann страница 14
Фекално изследване Макроскопско фекално изследване Цвят Глинен цвят Индикация за нарушение на изтичането на жлъчката Индикация за кости, антибиотици, екзокринна панкреатична недостатъчност Черно Индикация за кървене Проксимален храносмилателен тракт Кръвна примес Индикация за кръв от дистални отдели на червата Мирис Консистенция Паразитологично фекално изследване Вижте паразитологията Няколко пъти на страница 15
Фекално изследване Микроскопско фекално изследване (намаляващо значение) Полуколичествени изследвания за откриване на мазнини, нишесте, мускулни влакна стр. 16
Мастни капчици във фекалиите, Судански цвят (червен) Мастни бучки, Судански цвят (червен) Нишестени зърна, изпражнения, Луголов цвят (синьо-черен) страница 17
Фекално изследване Микроскопско фекално изследване (намаляваща значимост) Полуколичествени изследвания за откриване на мазнини, нишесте, мускулни влакна »Исторически методи» Детекция на трипсин с помощта на рентгенов филм за смилане Тест на желатин не се усвоява Желатин се усвоява (ензим присъства) страница 18
Фекално изследване Микроскопско фекално изследване (намаляващо значение) Полуколичествени изследвания за откриване на мазнини, нишесте, мускулни влакна »Исторически методи» Детекция на трипсин с помощта на рентгеново филмово усвояване Тест на трипсин с помощта на тест за желатин Детектиране на липаза с тест на царевично масло Хемотрипсин с помощта на тест PABA
Фекален преглед: окултна кръв, пресни изпражнения. Не хранете месо предварително 3 дни (месото съдържа хемоглобин и миоглобин -> фалшиво положителен резултат) Тестово писмо, напр. Hemo-FEC тест (Roche), Haemoccult (Beckmann Coulter). Човек: Скрининг за рак на дебелото черво Принцип: Пероксидазоподобен ефект на хемоглобин Хромоген + H 2 O 2 + пероксидаза -> обезцветяване страница 25
Малдигестиране, малабсорбция - лабораторна диагностика Диференцирането на екзокринната панкреатична недостатъчност (EPI) и първичните чревни заболявания, често трудни за диференциране на EPI, може да доведе до промени в храносмилането в проксималното тънко черво, като бактериален свръхрастеж. днес с кучета и котки особено биохимичен панел: трипсиноподобна имунореактивност (TLI), фолиева киселина, витамин B12 (кобаламин) TLI намален: Силни доказателства за EPI Фолиевата киселина се увеличава и/или витамин B12 намалява с TLI в референтния диапазон: променена проксимална тънка черва? Тестове за абсорбция: в миналото и при малки животни; все още с коня днес стр. 26
Трипсин-подобна имунореактивност (TLI) Функциониращият панкреас освобождава малки количества трипсиноген, трипсин и фрагменти от тях в кръвта. Те (включително трипсин, свързан с протеазни инхибитори) могат да бъдат открити като трипсин-подобна имунореактивност в кръвта. Ако панкреасът е недостатъчно активен (EPI), TLI в кръвта е нисък. Страница 30
Физиологични процеси, които влияят на TLI (и PLI) TLI = трипсиноподобна имунореактивност PLI = панкреатична липаза имунореактивност (вж. Следващия урок) TAP = трипсиноген активационен пептид Stockham и Scott, 2008: Ветеринарна клинична патология стр. 31
Методи за откриване на TLI имунологичен анализ, трипсинът е имунологично не много консервиран, поради което специфични за вида тестове Преди това RIA (чувствителни и специфични), сега също ELISA, за кучета също имунохроматография (бърз тест) EPI куче: TLI 2,5 µg/l 2,5 5,0 µg/l = сива зона EPI cat: TLI 8,0 µg/l 8,0 12,0 µg/l = сива зона Материал: Предпочитан серум. TLI е стабилен при стайна температура (2 седмици). Разрушаващи фактори: липемия, животното трябва да е трезво! Страница 32
Фолиева киселина и витамин В12 Фолиева киселина Някои чревни бактерии могат да синтезират и секретират витамини, които се абсорбират в червата (проксимална йеюнум). Пример: фолиева киселина. В случай на свръхрастеж на бактерии, повишено производство на фолиева киселина и по този начин повишени нива на фолиева киселина в кръвта. Витамин В12 (кобаламин) Някои бактерии консумират витамин В12. В случай на свръхрастеж на бактерии, консумацията на витамин В12 в червата се увеличава и/или абсорбцията на витамин В12 се нарушава, като по този начин се намалява витамин В12 в кръвта. Витамин В12 се абсорбира само в дисталната част на йеюнума и илеума. Страница 33
Обяснение фолиева киселина, витамин В12 Cbl = кобаламин, витамин В12 фолат = фолиева киселина IF = вътрешен фактор, произведен в панкреаса (куче и котка) и стомаха (куче) R-протеин = кобалофилин/хаптокорин, произведен в стомаха Транс = транскобаламин 2, транспорт протеинови бактерии нуждаят се от кобаламин бактерии произвеждат фолиева киселина Много бактерии (бактериален свръхрастеж): консумира се повече кобаламин, произвежда се повече фолиева киселина Недостиг на кобаламин: кобаламинът е необходим за катализиране на фолиевата киселина в нейната биологично активна форма. Дефицитът на кобаламин може да доведе до функционален дефицит на фолиева киселина Stockham and Scott, 2008 Ветеринарна клинична патология
Връзка между витамин B12 и фолиева киселина Stockham and Scott, 2008 Ветеринарна клинична патология Витамин B12 (кобаламин) е кофактор за синтеза на метионин и служи като реципиент на метиловата група на N5-метилтетрахидрофолат. В случай на дефицит на витамин B12, метиловата група не се пренася и се появява в Клетъчният дефицит на тетрахидрофолат 5-метилтетрахидрофолат също се измерва като фолиева киселина, следователно функционален дефицит на фолиева киселина, а не абсолютен
Измерване на витамин В12 Конкурентни тестове за свързване на протеини Анализите на хората не винаги са надеждни за други видове; Например поради свързващите кобаламин протеини в кучешки и котешки серуми. Материал: серум, не е стабилен при стайна температура! на 4 1 ден; на -20 6-8 седмици изпратете с изключване на светлина Увеличение: обикновено идва не преди. С изключение на добавките. Или с некроза на чернодробните клетки. Чернодробните клетки съхраняват витамин В12. Унижение: Само когато паметта на тялото се изразходва. Случаят е по-бърз с животните, отколкото с хората. Страница 36
Измерване на фолиева киселина Измерване на обща фолиева киселина (включително N5-метилтетрахидрофолат). Фолиевата киселина не е задължително намалена при измерване, въпреки че функционален дефицит (на тетрахидрофолат), причинен от дефицит на витамин В12 Конкурентен анализ на свързване с протеини (β-лактоглобулин) Материал: Серум, не е стабилен при стайна температура! на 4 1 ден; при -20 6-8 седмици подаването с изключване на лека хемолиза нарушава! Фолиевата киселина изтича от еритроцитите. Страница 37
Тълкуване TLI, витамин B12, фолиева киселина TLI фолиева киселина витамин B12 ò ò (котка, частично куче) Екзокринна панкреатична недостатъчност (EPI) ò (проксимален GI) ò (дистален GI) синдром на малабсорбция - +/- ò бактериално свръхрастеж на тънките черва страница 38
Тест за абсорбция: Тест за ксилоза кон Функционални ентероцити транспортират ксилоза през лигавицата (дванадесетопръстника, йеюнума) в кръвта (активен транспорт). Екскреция през бъбреците Субнормалните стойности подкрепят диагнозата малабсорбция. Процедура: Конно бързо в продължение на 15 часа, информирайте лабораторията, теглото на коня (ксилоза: 0,5 g/kg телесно тегло; 0,1 g/ml в хладка вода) вземете кръв във флуоридни епруветки, преди приложението на ксилоза чрез NSS и на всеки 30 минути след това за 4 часа страница 39
Ксилозен тестов кон Здрав кон: Най-високи стойности след 1-2 часа 15 mg/dl над базалната стойност mg/dl крива звънчеобразни минути Стойностите донякъде зависят от диетата на коня. По-високи върхове, богати на дървесен чип, отколкото високоенергийно хранене Плоска крива поради намалена абсорбция в случай на заболявания на тънките черва, непълен транспорт до червата (повръщане, нарушено изпразване на стомаха) или бърз чревен транзит (диария) Влияние на GFR върху скоростта на екскреция (забавено елиминиране) стр. 40
Фолиева киселина, Vit B12, TLA Cruna (кръвна проба ден 2, на гладно) 7.7-24.2 ð ð Съвместим с екзокринна панкреатична недостатъчност (EPI) (TLI 2.5 µg/l) Дефицит на витамин B12, вторичен за EPI страница 43
Терапия Cruna Панкреатичен ензимен прах върху фуража. Замяна на липсващите ензими. Инжектиране на витамин В12 (Vitarubin). Елиминиране на дефицита. Метронидазол (антибиотик) срещу потенциално възпаление и бактериален свръхрастеж в червата. Cruna увеличава многократните инжекции с витамин В12, редовен контрол на терапията с EPI през целия живот! Страница 44