Институт f; r Експериментална биомедицина - функция I на тромбоцитите на стол I
След наранявания тромбоцитите играят съществена роля за спиране на кървенето. В момента обаче има широкообхватно знание, че тромбоцитите играят съществена роля и при сериозни заболявания, които не са свързани предимно с кървене. Изследваме ролята на функцията на тромбоцитите при съответни заболявания, като сепсис.
Разгледахме различни аспекти на образуването и функцията на човешките тромбоцити.
I) Стандартизирана диагностика на функцията на тромбоцитите
Тромбоцитите при хората са много чувствителни. Предварителните аналитични стандарти за качество трябва да се спазват от момента на вземане и обработка на кръвта до необходимите изследвания. Добре установен метод за анализ на функцията на тромбоцитите е агрегометрията. Тази техника обаче изисква относително голямо количество кръв и следователно не е подходяща за хора с много нисък брой тромбоцити или за малки деца. Проточната цитометрия предлага алтернатива, която изисква минимални количества кръв и позволява много аспекти на функцията на тромбоцитите да бъдат изследвани едновременно. Това включва оборудването и плътността на повърхностните рецептори, освобождаването на вътрешни (алфа и плътни) гранули и способността да се активират интегриновите рецептори. Разработихме практически подход за диагностика на функцията на тромбоцитите и предложим алгоритъм за идентифициране на основните генетични промени в наследствените тенденции на кървене.
II) Функция на тромбоцитите при сепсис
Сепсисът е много сложно заболяване със системна дисрегулация на много компоненти, което често може да бъде предизвикано от бактерии или гъбички. В началната фаза на заболяването броят на тромбоцитите в кръвта първоначално се увеличава (реактивна тромбоцитоза), но спада значително с продължителността на сепсиса. Тежката тромбоцитопения (много нисък брой тромбоцити в кръвта) е свързана с лоша прогноза. В сътрудничество с интензивното отделение на Медицинска клиника I на университетската болница ние изследваме реактивността на тромбоцитите при пациенти със сепсис по време на заболяването и се надяваме да характеризираме по-добре основните промени в тромбоцитите и по този начин също така да разработим прогностични и диагностични маркери.
III) Биогенеза на тромбоцитите и генна терапия
Тромбоцитите в кръвта възникват от предшественици (хематопоетични стволови клетки) в костния мозък. Те реагират на специфични растежни фактори, като тромбопоетин, след което се диференцират в (мегакариоцитни) предшественици и в крайна сметка в зрели кръвни клетки, като мегакариоцити. Те се намират главно в съдовете в костния мозък, където те освобождават тромбоцитите в кръвта. Тъй като тромбоцитите нямат ядро, не можете сами да ги модифицирате генетично. Разработихме протокол, в който позволяваме на хематопоетичните стволови клетки в костния мозък (така наречените CD34-положителни клетки) да се диференцират в мегакариоцити в клетъчната култура, които след това се отрязват като зрели клетки „пропластици“, от които произлизат тромбоцитите. Освен това можем да използваме „индуцирани плурипотентни стволови клетки“ (iPS клетки), които могат да бъдат изолирани и диференцирани от донор, вероятно с патологичен фон. Тези клетки могат да бъдат модифицирани с вектори за генна терапия, така че да можем да изследваме ефекта върху образуването на тромбоцити в случай на дефицит или излишък на отделни протеини. Крайната цел е да се даде възможност за безопасна корекция на собствените кръвотворни стволови клетки, за да се извърши автоложна трансплантация на стволови клетки и по този начин да се излекуват редки вродени заболявания на тромбоцитите и кървенето.