Генетична диагноза - PDF безплатно изтегляне
Инструментите за генетична диагностика и апликациите Pascale Richard UF Cardigenetics and Mygenetics
Предшестващо състояние на млечната диагноза Инструментите Клиничният стадий Определете фенотип Внимателно проучете историята на пациента Разпит на неговите предшественици Параклинични изследвания Електриграма (EMG) Мускулна образна диагностика (ЯМР) Кардиреспираторна обработка Билгични изследвания Мускулна бипсия Билгични константи Молекулен анализ
ДНК аномалии на зародишни клетъчни генетични мутатини: chrmsmal аномалии мутамини на chrmsm: chrmsmic пренареждане На едни и същи Chrms генетични мутатини: мутатин на една или няколко основи Между различни chrms Менекуларна генетика Каритип Цитгенетика
Генетични заболявания Доминираща болест Рецесивна болест GENE MUTE Болест 1 Болест 2 Болест 3 Генетична болест Мултигенна болест 1 мутирал ген u Gen A Gen C Gen E Gen B Gen D генетично хетерогенен Няколко мутирали гена и Gen K Gen L Gen M Gen J Gen P
Генът и неговите промени Диагностичната полезност се извлича от мутатин тип Мутатини от заместващ тип EXONIC False sense Nn sense INTRONICS Без ефект: plymrphisms Ефект върху сплайсинг Mutatins от типа Insertins/deletins Малък размер Преместване на рамката за четене Без преместване без рамка за четене Големи D един или множество exns Цял ген описани 100 000 мутатини
Различни подходи Целеви изследвания на мутатин 1. Повтарящи се мутатини (SMA, r повтарящи се експанзини; Mytnic dystrphy, OPMD) За специфични заболявания Cmplet секвениране на гена (ите) 1. Exn by exn 2. От cdna Lng et cher Анализи специализирани 1. Делетини/дубликати на exns 2. FISH чисти големи делетини 3. ДНК свързване и боядисване Напр. FSHD Чисто специфични гени Идентифициране на мутатин (и) Анализ на връзката: SNP чипове Зависи от фамилната структура и свързаната диагностика Позволява гените да бъдат изключени Позволява да се намерят нови гени
Билгичен материал ДНК Кръвна проба, орални клетки (ecuvilln) Амнитни клетки * Стандартно секвениране на един или няколко гена * Suthern Blt иРНК: Мускулно бипкане, fie. кожа (фибробласти) * Последователност на cdna на един или няколко гена * Анализ на сплайсинг последователности Диагностична процедура 1. Екстрактин на нуклеинови киселини (ДНК/РНК) 2. Усилване на генните последователности, които представляват интерес Целеви региони Увеличете количеството ДНК от тях регини 3. Детектин на аномалия 4. Идентификат на аномалията
ДНК анализ Детектин на аномалии: HRMA Водещи заболявания: Heterzygous аномалии Позволява анализ на много пациенти едновременно Анализ на фрагменти/фрагменти Добре подходящ за откриване на частни мутатини при известни заболявания Варианти nn pathgens Интерферират Не идентифицират слабия мутатин Нарежете бързо
ДНК анализ Идентифициране на аномалии: секвениране Подходящо както за видни, така и за рецесивни заболявания Веднага се различава от анализа на мутатини спрямо плимфизми Фрагмент по фрагмент и ген чрез анализ на гена COL6A3 Нормална последователност c.6220g> t Пациент Не открива рембининаси, засягащи един или повече exns генът пренася целия ген p.gly2074cys
Ct стойности Търсене на големи промени Някои патологии се дължат на специфични мутатини, които не се откриват чрез секвениране след амплификация: Загуба на съотношението на един от двата алела на гена (recmbinaisn) Загуба на 1 или повече exns на частичен Дупликатин алел на алел Количествената PCR разчита на експлитатина на кинетиката на PCR, който включва експенциална, mdelizable фаза A плато фаза QMPSF и MLPA Едновременно усилване на няколко целеви последователности в количествен cnditin Ct s 0 1 2 3 4 5 6 7 Lg cpy номер