Генериране и характеризиране на J клетъчни линии от експериментални тумори, индуцирани от химически канцерогени -

ДИСЕРТАЦИЯ НА УНИВЕРСИТЕТНИЯ Д-Р ДИСЕРТАЦИЯ György Trencsényi Създаване и характеризиране на нови клетъчни линии от експериментални тумори, индуцирани от химически канцерогени.

експериментални

Съдържание 1. Въведение 7 2. Преглед на литературата 10 2.1. Химически канцерогени 10 2.1.1. Механизъм на действие на химичните канцерогени 11 2.1.2. N-нитрозодиметиламин (DMNA) 13 2.1.3. 7,12 - Диметилбенз (а) антрацен (DMBA) 17 2.2. Трансплантация на експериментални тумори 19 2.3. Модели на метастази 20 3. Материали и методи 24 3.1. Използвани химикали и разтвори 24 3.2 Експериментални животни 25 3.3 Експериментални тумори 25 3.4. Хирургична процедура 26 3.5. Установяване на туморна клетъчна линия 27 3.6. Изолиране на фибробластни клетки от плъхове Fischer 344 28 3.7. Изолиране на хепатоцитни клетки от черен дроб на плъх Fischer 344 28 3.8. Изследване на регенериращи чернодробни клетки 29 3.9. 18 Измервания на натрупване на FDG 29 3.10. Имуноцитохимия 31 3.11. Имунохистохимия 31 3.12. Western blot анализ 32 3.13. Проточни цитометрични измервания 32 3.14. Изолиране на хроматинови структури 33 3.15. Обработка на данни 34 4. Резултати 35 4.1. Хепатоцелуларен карцином (He/De) 35 4.1.1. Той/Демаркираните хепатоцелуларни клетки от карцином започват да растат под формата на солиден тумор, когато се имплантират под бъбречната капсула на плъхове F344 35 2

Списък на съкращенията: 18 FDG: 2- [18 F] флуоро-2-дезокси-D-глюкоза 18 FDG-6-P: 2- [18 F] флуоро-2-дезокси-D-глюкоза-6-фосфат ATCC: Американска колекция от типови култури DAPI: 2,6-диамино-2-фенилиндол DMBA: 7,12-диметилбенз (а) антрацен DMNA: N-нитрозодиметиламин, диметилнитрозамин DSMZ: Deutsche Sammlung von Microorganisms und Zellkulturen GmbH (Германска колекция от микроорганизми и клетъчни култури ) FBS: фетален телешки серум FITC: флуоресцеин изотиоцианат GLUT: глюкозен транспортер H&E: оцветяване с хематоксилин-еозин He/De: хепатоцелуларен карцином на плъх ip: интраперитонеален ID%: инкубационна доза% радиоактивност до 10 клетки iv: интравенозно My1/De: миело на плъх левкемия Ne/De: мезобластична нефрома на плъх PET: Позитронна емисионна томография ROI: Област на интерес sc: субктан (подкожно) SDS: натриев додецил сулфат SGLT: натрий/глюкоза котранспортер SPECT: (Еднофотонна излъчена компютърна томография) е фотонна емисия томография СЗО: Световна здравна организация 6