Диагностика и инокулация на Mycorrhizae - jardins de France
Мари-Лайн Хаймет
Микоризи: Ползи от диагнозата
Известни главно с ползите, които носят за растенията (подобряване на минералното и водното хранене, стимулиране на естествените защитни сили и др.), Микоризните гъби също играят важна роля в качеството на почвата, като допринасят за увеличаването на тяхното структуриране и тяхната стабилност. Установяването на функционална микоризна симбиоза също е придружено от увеличаване на ризосферната микрофлора, стимулирана от качеството и количеството на синтезираните ексудати на корените. Тези наблюдения правят микоризните гъби добър показател за качеството и биологичното здраве на почвите. Диагнозата на популацията от микоризни гъби, извършена от специализирана лаборатория, е подходящ инструмент за по-добро управление и ориентиране на културните практики, благоприятни за подземния микробен живот.
Основни методи за контрол
Какви аналитични методи да се използват за откриване, количествено определяне и идентифициране на микоризната флора ?
Оценка на нивото на колонизация на корените
Анализът е свързан с наблюдението на представителна проба от корени, които в зависимост от вида на изследваните микоризи (екто или ендомикоризи) ще бъдат предварително измити (Garbaye, 1990), изтънени, оцветени (Phillips and Haymann, 1970), след което наблюдавани под бинокулярна лупа или микроскоп. Ектомикоризните корени са разклонени, заобиколени от гъбична мантия и липсват коренни власинки, докато за ендомикоризните гъби VA, микоризните корени имат типични вътрешни структури (арбускули, везикули, гъбичен мицел).
Честотата на микоризиране е най-често използваната крайна точка. Позволява бързо да се оцени процентът на микоризните корени, присъстващи в проба, но не се взема предвид интензивността на микоризиране на корените. Скоростта на микоризиране изчислява процента на дължините на ендомикоризните корени. Колонизирането на корените от гъбата може да бъде оценено по метода на пресичане на линии, разработен от Джованети и Мосе. С помощта на преброителна мрежа ще бъдат идентифицирани около 100 точки за наблюдение и ще се отбележи наличието или отсъствието на гъбични структури в корените. Тази диагноза се отнася за проби от корени от полски култури или безпочвени култури върху субстрат, инокулиран с микоризни гъби. Този анализ показва наличието на инфекциозни пропагули на микоризни гъби в хранителната среда. Той също така дава възможност да се оцени дали условията на отглеждане (състав на подпората, практики на отглеждане и др.) Са благоприятни за правилното развитие на симбиозата.
Изброяване на спори
За ендомикоризни гъби може да се извърши преброяване на спорите върху проби от почви, инокулирани културни среди, микробни инокулати или други продукти, обогатени със спори (тор, изменение).
Извършва се мокра екстракция, последвана от пресяване. Отказите на ситото между 40 и 250 микрона се наблюдават под бинокулярна лупа и спорите се броят. Идентифицирането на гъбични родове въз основа на морфологични критерии може да завърши изброяването. Жизнеспособността на изолираните спори, както и способността им да покълват, също могат да бъдат проверени.
MPN тест (най-вероятният номер)
Този тест обикновено се използва за количествено определяне на микробни популации (бактерии, сапрофитни гъби). Той е адаптиран към ендомикоризни гъби (Gianinazzi-Pearson et al, 1985) и дава възможност за количествено определяне на броя на инфекциозните пропагули в проба. Тя се основава на последователни разреждания на пробата, която трябва да бъде изброена, и след това на отглеждането, при контролирани условия, на растения гостоприемници, инокулирани с всяко направено разреждане. В края на културата, наблюдението на микоризацията на растенията дава възможност да се оцени броят на жизнеспособните и инфекциозни микоризни пропагули, присъстващи в първоначалната проба. Този тест може да се извърши върху почвена проба, инокулирана хранителна среда или микоризен инокулум. Тестът MPN и скоростта или честотата на микоризиране са допълващи анализи, които да насочат фермера към културните практики, които да възприеме, за да насърчи увеличаването на микоризния потенциал на своя парцел и развитието на добре установена микоризна симбиоза.