Затова пригответе солен разтвор, буфериран с фосфат
PBS, или фосфатно буфериран физиологичен разтвор, е буферен разтвор, който е особено ценен, тъй като имитира концентрацията на йони, осмоларността и рН на човешките телесни течности. С други думи, той е изотоничен за човешките разтвори, така че е по-малко вероятно да причини увреждане на клетките, токсичност или нежелани валежи при биологични, медицински или биохимични изследвания.
Химичен състав на PBS
Има няколко рецепти за приготвяне на PBS разтвор. Основният разтвор съдържа вода, натриев хидроген фосфат и натриев хлорид. Някои препарати съдържат калиев хлорид и калиев дихидроген фосфат. EDTA може също да се добави в клетъчната подготовка, за да се предотврати натрупването.
Буферираният с фосфат физиологичен разтвор не е идеален за използване в разтвори, които съдържат двувалентни катиони (Fe 2+, Zn 2+), тъй като могат да се появят валежи. Някои PBS разтвори обаче съдържат калций или магнезий. Имайте предвид също, че фосфатът може да инхибира ензимните реакции. Бъдете особено внимателни към този потенциален недостатък, когато работите с ДНК. Докато PBS е отличен за физиологичните науки, имайте предвид, че фосфатът в буферирана с PBS проба може да се утаи, ако пробата се смеси с етанол.
Типичен химичен състав на 1Х PBS има крайна концентрация от 10 mM PO 4 3-, 137 mM NaCl и 2.7 mM KCl. Ето крайната концентрация на реагентите в разтвора:
| NaCl | 137 | 8.0 |
| KCl | 2.7 | 0.2 |
| Na 2 HPO 4 | 10 | 1.42 |
| KH 2 PO 4 | 1.8 | 0,24 |
Протокол за получаване на буфериран с фосфат физиологичен разтвор
В зависимост от вашата цел можете да направите 1X, 5X или 10X PBS. Много хора просто купуват PBS буферни таблетки, разтварят ги в дестилирана вода и коригират рН със солна киселина или натриев хидроксид, ако е необходимо. Въпреки това е лесно да се направи решението от нулата. Ето рецепти за 1X и 10X буфериран с фосфат физиологичен разтвор: