TSH ELISA

.D D S. ДИАГНОСТИКА ул. Ватра Луминоаса, бр. 45, раздел. 2, Букурещ телефон: 0213440771, факс: 0214104009, e-mail: [email protected] Ръководство на потребителя TSH ELISA Директно имуноензимно определяне на тиротропин (TSH) в човешки серум Вариант 2.2 96 ЛОТ тестове TSH018 var. 2.2 1

elisa

СЪДЪРЖАНИЕ Цел 3 1 Клинично значение 3 2 Принцип 4 3 Компоненти на комплекта 4 4 Необходими материали, които не са включени в комплекта 4 5 Приготвяне на реагент 5 6 Условия на съхранение 5 7 Биологичен тест 5 8 Предпазни мерки 5 9 Работна процедура 6 10 Контрол на качеството 8 11 Изчисляване на резултатите 8 12 Пример за стандартна крива 8 13 Очаквани стойности 9 14 Работа и характеристики 9 15 Управление на отпадъците 10 16 Библиография 11 17 Схема за анализ 12 2

Препоръчва се всяка лаборатория да установи свой собствен диапазон от нормални стойности, в зависимост от популацията. 14. ЕФЕКТИВНОСТ И ХАРАКТЕРИСТИКИ а. Точност Вътресерийна вариация Определя се чрез измерване на концентрацията на TSH в реплика (20x) с помощта на 2 контролни серума на различни нива в един анализ. Контрола n Средна концентрация (miu/ml) CV (%) 1 20 1,96 5,46 2 20 10,59 6,8 Междусерийна вариация Определя се чрез измерване на концентрацията на TSH в реплика (10x) с помощта на 2 контролни серума и три различни партиди реактиви, тествани веднъж дневно в продължение на 20 дни. Контрол n Средна концентрация (ml/ml) CV% 1 40 2,21 4,97 2 40 10,02 5,18 б. Чувствителност. Чувствителността се определя с помощта на нулевия (S0) стандарт в реплика (20X) в същия анализ. Минималната открита концентрация на TSH е 0,01 μl/ml. в. Специфичност на антителата (кръстосана реактивност). Кръстосаната реактивност на тиротропиновите антитела е показана в следната таблица: 10

Вещество Кръстосана реактивност,% TSH 100% hcg 0% hgh 0% LH 0,021% FSH 0,014% d. Корелация с други методи Комплектът е сравнен с Roche Cobas TSH, като се използват проби от 121 пациенти. Корелацията се извършва по метода на линейна регресия: y = 0,094 + 1,0138x с коефициент на корелация 0,991. 15. УПРАВЛЕНИЕ НА ОТПАДЪЦИТЕ Реагентите и отпадъците трябва да се използват и изхвърлят в лабораторната верига съгласно действащите законодателни норми. 16. БИБЛИОГРАФИЯ 1. Dinu V., Trutia E., Cristea-Popa E., Popescu A., Medical Biochemistry Small journal, Ed. Medicala, 1996. 2. Лабораторни анализи и други диагностични изследвания, Ed. MedicArt, 2007. 3. Cucuianu, M., Crisnic I., Plesca-Manea L., Clinical Biochemistry, Ed. Dacia, 1998. 11

СХЕМА ЗА АНАЛИЗ НА TSH Подготовка на теста Подготовка на реагенти и проби съгласно описаната процедура. Избиране на броя на кладенците и поставянето им в специално проектираната опора. Работна процедура Стандартна контролна проба 0-5 Стандартна 50 - l - - 0-5 Контролна - 50 µl - Проба - - 50 µl Конюгиран разтвор 50 µl 50 µl 50 µl Внимателно разклатете плаката за 30 секунди, за да се смеси. Покрийте кладенците с фолио. Инкубирайте 60 минути. при 37 0 C. Измийте 5 пъти с 350 µl промивен разтвор, приготвен както в 5.2. Стандартна контролна проба 0-5 Субстрат 100 100l 100 µl 100 µl TMB Покрийте ямките. Инкубирайте 20 минути при стайна температура 22-28 0 С на тъмно. Стандартна контролна проба 0-5 Разтвор за спиране 50 50l 50 µl 50 µl Внимателно разклатете плочата за 30 секунди, за да се смесят напълно разтворите. Отчетете абсорбцията на разтвора в ямките при 450 nm с референтни 620-630 nm, за максимум 15 минути след спиране на реакцията, с микропланшетен спектрофотометър. 12