ТЕХНИКА НА ЗАСИВАНЕ, МЕТОДИ ЗА ИЗОЛИРАНЕ НА ЧИСТИ КУЛТУРИ И КУЛТУРНИ СВОЙСТВА НА МИКРООРГАНИЗМИТЕ
Цел на урока. Овладейте техниката на засяване на микроорганизми върху твърди и течни хранителни среди и методи за изолиранеи бактериални култури. Да запознае студентите с основните културни характеристики на микроорганизмите и методите за определяне броя на бактериите.
Оборудване и материали. Култури от бульон и агар B. cereus, E. coli и S. aureus в епруветки и в чашки на Петри, смесенибульонна култура Е. coli и S. aureus, стерилни MPA и MPB в епруветки, чаши на Петри, физиологичен разтвор на MPA (8% натриев хлорид) в чаши на Петри, стъклени шпатули, стерилни пиПастьорски бримки, бактериологични бримки.
Културата на микроорганизмите е популация (пило) лепилоток върху хранителна среда. Засяване и презасяване на култури от микроорганизмиизследвания върху хранителни среди е най-честата методологична техника, използвана за първично изолиране на микроорганизъм от който и да е обект, както и да поддържа култури в жизнеспособно състояние в лабораторни условия.
Чистата култура е популация от бактерии от един вид или биологичен вариант (биовар), отглеждани на хранителна среда.
Щамове - чисти култури от микроорганизми от един и същи вид, изолирани от различни обекти или от един и същ обект, но по различно време.
Колония - макроскопски видим клъстер от микрофонни клеткироорганизъм на повърхността или вътре в гъста хранителна среда, образувана в резултат на възпроизводството на един животспособна клетка. Поради тази причина обикновено се разглежда колониятакато чиста култура на микроорганизми.
Техника на засяване на микроорганизми. Култури от роден матРиалът често се извършва с пастьорска пипета от микрокултуриорганизми - бактериологична верига в зоната на стерилния въздух над пламъка на горелката. На съдове за култура (околоетикети, чаши на Петри, колби и др.) напишете номера на изследване, под който е регистриран материалът, датата на сеитба.
Сеитба върху течна хранителна среда. Епруветката с тестовия материал и епруветката с хранителната среда се държат в лявата ръка, в дясната ръка се взема бактериологичен контур или пипетачаши от епруветки (фиг. 37). Над пламъка на горелкаръбовете на епруветките са изкормени, бактериологичният контур (пипета) се въвежда в епруветката с материала, материалът се прехвърля в епруветката ссъс силна хранителна среда и се изтръсква от контура в средата, без да се намокря държачът на цикъла. Краищата на тръбите отново саогън над пламъка на горелката, затворете тръбите със запушалки, стеОсвобождаване на цикъла и поставяне в статив. Използваната пипета се спуска до края в буркан с дезинфектант.
Сеитба върху твърда хранителна среда. Изпълнявайте по различни начини.
Когато се инокулира в епруветка: 1) епруветки с инокулиран микрофонлабораторна култура и хранителна среда (MPA) се взема в лявата ръка, епруветката с MPA се държи със скосената повърхност на средата нагоре. Стерилизирана бактерия се инжектира в епруветка с микробна култура (или друг материал), отворен близо до пламък.логически цикъл, леко докосване на цикъла до повърхността наdy (материал), вземете материала, прехвърлете го в епруветка с aздравословна хранителна среда. Цикълът се спуска до дъното на епруветката, потапя се в кондензна течност и се извършва в зигзагообразно движение отдолу нагоре по повърхността на средата (засяване с "удар") (фиг. 38). Тръбите са затворени със запушалки, контурът е изгорен. Инокулираните епруветки се поставят в термостат; 2) в насеитба с убождане в колона от среда, епруветка с плътна (не скосена) среда се взема в лявата ръка, корк се отстранява от епруветката над пламъка на горелката, вертикала се пробива с примка с материалано в центъра на епруветката хранителната среда, контурът се отстранява, изгаря, тръбата с инокулираната среда се затваря със запушалка (фиг. 39).
При инокулиране върху чаша на Петри: чинията се взема в лявата ръка, капакът се повдига леко с палеца на лявата ръка,изгорете краищата на чашата в зоната на слота върху пламъка на горелката, добаветезасяване на материал върху повърхността на хранителната среда, след това расиразтрийте го със стъклена шпатула или бактериолозиконтур (фиг. 40).
Сеитба върху полутечна хранителна среда. Извършва се чрез инжектиране в колона с хранителна среда.
Изолиране на чисти култури от микроорганизми. С бактериолоПри химично изследване желаният микроорганизъм се намира в материала, като правило, в смес с бактерии от други видове. Възможно е да се идентифицират чрез класически методи на бактериологияхранят микроорганизма само ако е под формата на чиста култура.
Методи, базирани на механична клетъчна дисоциация. Тези методи се използват най-често за изолиране на чисти култури.обиколка на микроорганизми.
Метод на Пастьор (метод на разреждане): серия от последователни, често десетократни разреждания се приготвят от тестовия материал в стерилна течна хранителна среда в епруветкаkakh или колби (10 -1 ... 10 -10). Предполага се, че броят на микрофонаПри всяко следващо разреждане ще има по-малко роботизирани клетки, отколкото в предишното, а в някои от епруветките ще остане само една микробна клетка, която ще даде/стартира чиста култура на Микроорганизма. За успешното прилагане на този метод обачеда, необходимо е желаният микроорганизъм в материаланадделя над придружаващите видове.