Първо идентифициране на диуретик (хидрохлоротиазид) в приложението за коса върху калъф

Идентифицирайте и количествено определете хидрохлоротиазид, диуретик, в косата на спортист с ненормален резултат в урината му и определете дали намерената концентрация съответства на еднократна или многократна експозиция.

идентифициране

Въведение

Търгуван самостоятелно (Esidrex ®) или в комбинация с други молекули, хидрохлоротиазид е диуретик от семейството на бензотиадиазин, използван за лечение на високо кръвно налягане. Той инхибира реабсорбцията на натрий и увеличава отделянето с урината. Благодарение на диуретичната си сила, хидрохлоротиазид може да се използва от някои спортисти за отслабване (спорт в тегловна категория) или за по-бързо елиминиране на анаболни или стимулиращи агенти. Класифицирано е като забранено вещество от Световната антидопингова агенция (клас S5. Диуретици и маскиращи агенти).

Казус

Съобщаваме за случая на елитен плувец с ненормален резултат за хидрохлоротиазид в урината му (от порядъка на pg/ml). Спортистът оспорва резултата и отрича доброволното използване на лекарството. Той признава обаче, че е възможно неволно използване, тъй като негов приятел е на хидрохлоротиазид. На лабораторията е възложено да изследва косата, за да установи профил на потребление.

Методи

Към днешна дата не е публикуван метод за идентифициране на диуретици в косата и следователно няма налична библиографска справка. За да могат да се интерпретират резултатите и да се получи информация за откриваемостта на хидрохлоротиазид в косата, на четири здрави мъже доброволци бяха приложени перорално таблетка от 25 mg Esidrex ® и косата беше събрана 1 месец по-късно. Освен това в това проучване бяха включени десет доброволци, подложени на терапевтично лечение (дози от 6,5–12,5 и 25 mg на ден). Специфичен количествен метод е разработен чрез течна хроматография, свързана с тандемен мас спектрометър (LC-MS/MS). След инкубация (50 ° С, 15 часа) при рН 7,0 и добавяне на хидрофлуметиазид, използван като вътрешен стандарт, пробата се екстрахира с 5 ml етилацетат, след това се изпарява и се поема в 50 μL подвижна фаза (95/5, v/v, вода + 1 тМ амониев ацетат/МеОН + 1 тМ амониев ацетат). Преходите, използвани за хидрохлоротиазид са m/z 296,1> 268,9 (количествено определяне) и 296,1> 204,9 (потвърждение) и за хидрофлуметиазид m/z 329,8> 302,9.