Протокол Микробиология No16
Протокол-доклад No 16 от 28 май 2008г., +++
Предмет: Микробиологична диагностика на менингококови и гонококови инфекции
Откриване на предполагаемия патоген чрез морфо-тинкториални свойства. Потвърждение на предполагаемата диагноза
Извършва селекция и идентификация на изследваната култура от съдържанието на флегмоната на лицево-челюстната област, за да се установи етиологията на заболяването
CSF изследване на пациент с клинична диагноза менингит
Приемането на CSF е медицинска манипулация, извършена в съответствие с правилата на асептиката. Преди изследване, чистият CSF се центрофугира при 3500 оборота в минута за 5 минути и от утайката се приготвят цитонамазки. Тампоните се приготвят от мътна CSF без центрофугиране. Мазките се оцветяват с метиленово синьо и Gram. Откриването на грам-отрицателни диплококи с форма на боб, обърнати вдлъбната страна една към друга и разположени в левкоцити, показва менингококова етиология на менингит.
Латекс аглутинация за откриване на специфични полизахаридни антигени н. meningitidis A, Б., ° С, Y./W в CSF. За да се настрои реакцията на латекс аглутинация, CSF се загрява в продължение на 3 минути при 100 ° С и се центрофугира в продължение на 5 минути. Капка супернатант и реагент, съдържащ латексови частици с моноклонални антитела срещу менингококи, се нанасят върху чаша и се смесват с помощта на специална пръчка. В същото време се задава реакция с положителен контрол и реакция с изследваните CSF и латексови частици с IgG на неимунизиран заек.
Отчитане на резултатите то се извършва след 10 минути от явлението аглутинация, очевидно с просто око. Положителната реакция е ясна аглутинация, в случай на аглутинация с известна положителна контрола и липсата на реакция на аглутинация с латекс с IgG от неимунизиран заек, показва наличието на специфични антигени н. meningitidis в ликвора и посочва етиологичната му роля за развитието на менингит. Реакцията не се интерпретира, ако аглутинацията е преминала с латекс за отрицателна контрола. В този случай трябва да повторите теста с друга порция CSF.