Плазмен (активен) грелин

Обща информация и препоръки за определяне на градушката

Грелинът е хормон с пептидна структура (28 аминокиселини), произвеждан от ендокринни клетки в стомашно-чревната лигавица (главно P/D1 клетки в стомаха), както и от епсилон клетки в панкреаса, отговорни за стимулиране на глада.

Той е изолиран през 1999 г. от стомаха на плъхове и е описан като ендогенен лиганд за рецептора на секретагога на растежния хормон (GHS-R) в хипофизната жлеза. Грелинът стимулира освобождаването на растежен хормон по различен начин от GHRH (освобождаващ хормон на растежния хормон).

Химически грелинът има уникална структура, дължаща се на ацилиране на серинови остатъци в позиция 3 на аминокиселинната верига с октанова киселина - процес на мастна киселина, катализиран от наскоро идентифицирания ензим GOAT (грелин О-ацил трансфераза). Октаноилацията е от съществено значение за биологичната активност на хормона.

Грелинът се секретира като предшественик - препрогрелин; След посттранслационните промени се генерират както ацилираната форма - ацил-грелин, така и не-ацилираната-дес-ацил-грелин форма. И двата вида грелин присъстват в циркулацията, но дес-ацил-грелинът преобладава, форма, лишена от ендокринна активност, но която има някои клетъчни ефекти, според последните изследвания.

Орексигенният ефект на грелина се дължи на действията, упражнявани върху дъгообразните и паравентрикуларните хипоталамусни ядра, за които е известно, че участват в регулирането на апетита. По този начин грелинът активира неврони, съдържащи орексигенови пептиди (NPY - невропептид Y и AgRP - свързани с агути пептиди) и инхибира тези, съдържащи анорексигенни пептиди (CART - кокаин и свързана с амфетамин транскрипт и POMC - про-опиомеланокортин). Лептинът оказва противоположни ефекти върху едни и същи неврони, което предполага, че двата хормона са допълващи компоненти на регулаторна система, която информира централната нервна система за остри и хронични енергийни дисбаланси. На свой ред невроните в дъгообразното ядро предават импулси на неврони, съдържащи орексин в страничната хипоталамусна област, като по този начин стимулират апетита.

Грелинът напоследък е замесен както в регулирането на инсулина, така и в хомеостазата на глюкозата. По този начин повечето проучвания показват обратна връзка между системните нива на грелин и инсулин. Инсулинът понижава нивата на грелин и грелинът инхибира секрецията на инсулин. Хипергликемичният ефект на грелин се дължи от една страна на неговите ендокринни действия, а от друга на директния ефект върху хепатоцита за стимулиране на глюконеогенезата. Що се отнася до ролята му при диабета, ниските нива на грелин са свързани с инсулинова резистентност, хипертония и разпространението на диабет тип II. Нещо повече, ниски нива на грелин са показани и при пациенти с диабет тип I (изглежда, че хормонът играе роля в регенерирането на бета-панкреатични клетки) 1 .

Обучение на пациента - прибирането на реколтата ще се извършва сутрин на гладно (на гладно) 4 .

Събран образец - венозна кръв; вакутейнерът се разклаща много внимателно чрез обръщане и веднага се поставя върху лед; транспортирани до лабораторията възможно най-скоро 4 .

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан с EDTA K3 + апротинин (розов капак), съхраняван в хладилника до прибиране на реколтата; апротининът се използва за предотвратяване на разграждането на протеаза на ацилиран грелин 2 .

Количество прибрано - стига вакуумът да позволява 4 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - в рамките на максимум 30 минути от събирането на плазмата се отделя чрез центрофугиране (за предпочитане в центрофуга, охладена до 2-8 ° C) в продължение на 10 минути при 3500 об/мин; за отделяне на плазмата се използва пластмасова пипета; отделената плазма ще бъде незабавно подкиселена до рН 3-4 (добавят се 100 μL 1N HCI за всеки 1 ml плазма) и след това отново се центрофугира за 5 минути при 3500 rpm; супернатантата се прехвърля във вторична епруветка; пробата се работи незабавно; ако това не е възможно, плазмата се съхранява при -20 ° C в пластмасов съд (полипропилен или полистирол); пробите, събрани извън лабораторните помещения, се транспортират до контейнера за замразени проби 2; .

Стабилност на пробата - плазмата е стабилна за дълго време при -20 ° C или при -70 ° C; не размразявайте/замразявайте 2; 4 .

Метод - ИФА; тестът, извършен в нашата лаборатория, открива ацилираната форма - активен грелин.

Референтни стойности -.

Граница на откриване - 4 pg/mL 4 .

Тълкуване на резултатите

Плазмените нива се повишават непосредствено преди всяко хранене и се намаляват до минимум в рамките на 1 час от приема на храна. Размерът и продължителността на редукцията след хранене зависи от броя на калориите и съдържанието на мазнини в поетата храна. Потискането след хранене е по-ниско при пациенти със затлъстяване, грелинът вероятно допринася за патогенезата на затлъстяването.

Циркулиращите нива на грелин са обратно корелирани с индекса на телесна маса (ИТМ). По този начин нивата се увеличават при анорексия и кахексия, намаляват затлъстяването и се нормализират след получаване на идеалното тегло. Изключение от връзката с ИТМ е синдромът на Prader-Willi, при който затлъстяването е свързано с високи нива на грелин.

Нивата на грелин се променят при други клинични състояния:

Намалява: след стомашен байпас и гастректомия, хроничен гастрит, свързан с инфекция с H. pylori, хипертиреоидизъм (обяснява загубата на тегло, което обикновено се среща при тези състояния), синдром на късото черво (вероятно поради загуба на тъкани, произвеждащи грелин), мъжки хипогонадизъм, синдром на поликистозните яйчници, синдром на Кушинг.

Ниските нива на грелин са независимо свързани с диабет тип I и II.

По-ниски нива на грелин са съобщени при възрастни хора.

Растеж: булимия нерва, хронично ограничаване на храната, стомашни или панкреатични грелиноми 1 .

Граници и смущения

Плазмените нива на грелин се влияят от редица хормони, лекарства и други вещества:

Намалява: инсулин, перорална или интравенозна глюкоза, соматостатин и неговия естествен аналог кортикостатин, анорексигенни пептиди (YY пептид, оксинтомодулин, урокотин-1), хормони на щитовидната жлеза, глюкокортикоиди.

Увеличава: ацетилхолиновите агонисти, комбинирано приложение на GHRH и аргинин, тестостерон (при пациенти с хипогонадизъм), естроген и инсулин-растежен фактор-1 (IGF-1 при пациенти с анорексия нервна) 1 .

Библиография:

Adelino F. Leite-Moreira и João-Bruno Soares. Физиологични, патологични и потенциални терапевтични роли на грелин. В Drug Discovery Today, том 12, бр. 7/8, април 2007 г.
Хироши Хосода и сътр. Оптимални условия за събиране и съхранение за измерване на грелин: Модификацията на октаноил на грелин бързо се хидролизира до дезацил грелин в кръвни проби. В Клинична химия, 2004, том 50, № 6, 1077-1080.
Korner J et al. Ефекти на стомашна байпас операция Roux-en-Y върху концентрациите на плазмен грелин, YY пептид и инсулин на гладно и след хранене. В J- Clin. Ендокринол. Metab. 90, 359 + 365, 2005.
Лаборатория Синево. Специфични препратки към използваната технология на работа. 2012. Ref Ref: Каталог.
М. Коджима, К. Кангава. Грелин: Структура и функция. В Physiol Rev 85: 495–522, 2005.