P184 Хранителен преход, микробиота и разграждане на здравето на хранителните протеини от
Клинично хранене и метаболизъм
Добавете към Мендели
Въведение и цел на изследването
Чревната микробиота играе важна роля за здравето и нейната структура зависи по-специално от диетата. Хранителният преход през последните десетилетия в развитите страни се състоеше в увеличаване на консумацията на продукти, богати на протеини и липиди, по-точно от животински произход. Смята се, че 12 до 18 g протеин пристигат всеки ден в дебелото черво, където микробиотата е най-плътна. Все по-ясно е, че част от погълнатия протеин достига до дебелото черво неразграден. Способността на микробиотата обаче да катаболизира протеини от животински или растителен произход не е известна. Тази работа се интересува от разграждането на протеини от храна или медицински интерес от щамове на човешката чревна микробиота.
материали и методи
Избрани са 8 бактериални щама, представителни за филогенетичното разнообразие на микробиотата и числено доминиращи при здрави индивиди. Разработена е нова анаеробна хранителна среда с ограничено съдържание на глюкоза (5 g/L) и пептиди. Суроватъчните, соевите или глутеновите протеини се добавят стерилни (20 g/L). Културите се инкубират при 37 ° С, под атмосфера N2/CO2, в епруветки Hungate, което позволява директно измерване на бактериалния растеж при 600 nm. Разграждането на соевите и суроватъчните протеини се определя количествено чрез анализ на спектрите на абсорбция с Nanodrop. Концентрацията на глюкоза и глутен се измерва чрез ензимен комплект и ELISA (Libios и Biodemal, съответно). Микробната колонизация на протеинови субстрати се наблюдава макроскопски и чрез светлинна микроскопия.
Резултати и статистически анализ
Разработената среда се оказа генерична, позволява измерване на растежа на бактериалните видове в присъствието на протеини, когато те ги използват като източник на енергия. Демонстрирахме кинетиката на растеж и разграждане на протеините, които зависят от вида.
Blautia coccoides и Ruminococcus lactaris от Phylum Firmicutes разграждат соята след 96 часа култивиране, докато членовете на Phylum Bacteroidetes (B. vulgatus и B. caccae) метаболизират този субстрат по-малко.
От 60 часа култивиране глутенът се разтваря напълно от Bifidobacterium longum, но също така и от видове от група IV на Clostridium, Clostridium leptum и противовъзпалителните видове Faecalibacterium prausnitzii.
И накрая, при нашите културни условия, чревните микробиотни щамове показват пълна консумация на глюкоза само когато те също разграждат глутена или соята. Това би представлявало нов миксотрофен капацитет, едновременното използване на захар и протеини за генериране на енергия.
Заключение
Успяхме да демонстрираме способността на доминиращите щамове на микробиотата да метаболизират естествени хранителни протеини. In vitro потенциалите се различават в зависимост от щамовете, което предполага, че естеството и количеството на протеините, достигащи дебелото черво, могат да модулират in vivo микробните баланси, да разрешат или да създадат дисбиоза.