Основните етапи на ДНК диагностиката

Основните етапи на ДНК диагностиката - раздел Биология, генетика, наследственост, вариабилност 1. Получаването на ДНК проби (или РНК) се осъществява в два варианта: А).

1. Получаването на проби от ДНК (или РНК) се извършва по два начина:

а) изолиране на цялата ДНК (обща или геномна) от клетки:

б) натрупване на определени фрагменти с помощта на PCR.

Всички ядрени клетки са източник на геномна ДНК. Вън­ДНК, получена от клетки, е целият геном на организма, поради което такива проби се наричат ​​геномна ДНК. Материалът за изследване е пери­железна кръв (левкоцити), хорион, околоплодни клетки, култура на фибробласти. епител на устната лигавица, космените фоликули и др.­заболяване или хетерозиготно състояние, достатъчно е да се изследва само малък фрагмент от генома. следователно е необходимо да се получи достатъчно­точния брой на такива фрагменти, т.е. усилват (умножете) ги. Натрупване­отстраняването на желаните ДНК фрагменти се решава с помощта на PCR.

Полимеразна верижна реакция (PCR) - ДНК метод за амплификация t uygo. В рамките на няколко часа определена ДНК последователност може да се умножи в количество, надвишаващо първоначалното с милион или повече пъти. Предпоставка за PCR е познаването на нуклеотидната последователност­тези амашифицирани фрагменти. Според нуклеотидната последователност­В краищата на изследваната област се синтезират два олигонуклеотидни праймера (праймери). Дължината на грундовете е 20-30 базови двойки. Процесът на усилване протича в няколко повтарящи се цикъла. Всеки­Този цикъл включва три етапа: температурна денатурация на ДНК. свързване на праймери към комплементарни последователности на едноверижни молекули (отгряване), синтез на полинуклеотидни вериги върху едноверижни молекули в лицето­броят на прикрепените праймери, използващи полимераза.

2. Ограничаване на ДНК на фрагменти. Този процес се осъществява от рестрикционни ензими (те се отнасят до бактериални ендонуклеази). Те разбиват двуверижна ДНК в рамките на строго определените за всеки фрагмент от последователността­нуклеотидни дължини от 4-6 двойки основи.