Определяне съдържанието на яйца в сухи тестени изделия чрез ELISA - PDF Безплатно изтегляне

Научен студентски кръг VARGA VIKTÓRIA EVELIN Определяне на съдържанието на яйца в сухи теста от ELISA Ръководител: Zsuzsanna Eke, PhD Катедра по аналитична химия Технология за разделяне на лаборатории Изследователска и преподавателска лаборатория Eötvös Loránd University Факултет по наука Будапеща, 2011-1 -

определяне

Съдържание 1. Въведение. 3 2. Преглед на литературата. 4 2.1 Състав на яйцето. 4 2.1.1 Яйчен белтък. 2.1.1 Яйчен жълтък. 4 2.2 Определяне съдържанието на яйца в сухи тестени изделия. 5 2.2.1 Определяне на съдържанието на холестерол. 5 2.2.2 Определяне на яйчен белтък. 6 2.2.3 Методи на смесване. 7 2.3 ИФА. 7 3. Цел. 11 4. Експериментална част. 12 4.1 Материали и инструменти. 12 4.1.1 Комплект ELISA. 12 4.1.2 Други използвани инструменти. 12 4.1.3 Проби. 13 4.1.3 Приготвяне на тестото. 14 4.2 Подготовка на пробата. 15 4.3 Процедура за изпитване. 17 4.4 Оценка на резултатите. 17 5. Собствени резултати. 19 5.1 Домашна паста. 19 5.2 Пазарувайте сладкиши. 20 5.3 Теста, приготвени с различни яйца. 22 5.5 Проблеми със сухи тестени изделия с високо съдържание на яйца. 26 Благодарности. 30 Референции. 31-2 -

1. Въведение Съгласно правилата на Унгарската книга за храните (MÉK), сухи тестени изделия могат да бъдат направени от смлян Triticum aestivum (обикновена пшеница) или Triticum durum (твърда пшеница), със или без яйца, с добавяне на вода и евентуално други добавки за забавление или хранителни добавки [1]. Качеството, физическите и приятни свойства на тестените изделия, направени с помощта на яйца, зависят главно от съдържанието на яйца, а яйцата съдържат и много минерали, важни за човешкото тяло. Поради това е много важно купувачите да знаят, че всъщност купуват суха паста за макарони с качество, както е посочено на опаковката. Следователно от гледна точка на контрола на качеството е важно да можете да определите точно съдържанието на яйца в тези продукти, използвайки подходящи аналитични методи. Пастата, приготвена с помощта на яйца съгласно Унгарската книга за храните [1], предвижда, че поне толкова яйца на яйце в този случай означават 45 g яйца без черупка - те трябва да съдържат на kg суха паста, колкото е броят на яйцата на опаковката посочено. Разработването на достатъчно точен аналитичен метод за проверка на това е предизвикателство и до днес. - 3 -

2. Преглед на литературата 2.1 Състав на яйцата Яйцата, с изключение на витамин С, съдържат всички хранителни вещества, необходими на човешкото тяло. Основно се състои от три части: черупка от яйца (

60%) и яйчен жълтък (

Фигура 1: Тава за държач за клетки с 16x8 седалки. Картината показва 17 подвижни клетки. По време на сандвич ELISA (Фигура 2) антитела, специфични за антигена, т.е. аналита в пробата, се фиксират към повърхността на твърдата фаза във всяка ямка в същото количество. След добавяне на пробата, антигените, които трябва да бъдат открити, са специфично свързани с антителата. След това останалите несвързани излишни компоненти на пробата обикновено се отстраняват чрез измиване. Това е последвано от добавянето на второ ензимно свързано антитяло, което специфично се свързва с друг епитоп на антигена (мястото на свързване на антитялото на антигенната молекула). По този начин нашият антиген ще бъде притиснат между двете антитела. Накрая се добавя хромогенен субстрат за ензима, прикрепен към второто антитяло, чието ензимно превръщане е придружено от промяна на цвета. В края реакцията се спира със слаба киселина, последвано от фотометрично измерване. Колкото повече антиген съдържа нашата проба, толкова по-силен е полученият цвят, така че измереният сигнал ще бъде пропорционален на концентрацията на измереното вещество в пробата. Количественото определяне се извършва на базата на стандартна крива, получена от серията разреждания на разтвор с известна концентрация на целевата молекула. - 8 -