Модификация на метод MEKC - PDF безплатно изтегляне

Департамент по земеделска икономика и хранителни науки Степен по технология на биопродукти Модификация на метод MEKC за определяне на микотоксин патулин в ябълков сок Бакалавърска дисертация, представена от: Anne Weber За получаване на академична степен Бакалавър на науките (бакалавър) Първи рецензент: Втори рецензент: Проф. Д-р обратно нат. Кристин Витман д-р обратно нат. Бетина Албрехт Период на обработка: 18 януари 2010 г. 2 март 2010 г. URN: urn: nbn: de: gbv: 519-thesis2010-0114-9 Нойбранденбург, 2 март 2010 г.

модификация

Съдържание II Съдържание Списък на съкращенията. IV Списък на единиците. VI 1 Въведение. 1 1.1 Патулин. 2 1.1.1 Структура и поява. 2 1.1.2 Биосинтез. 3 1.1.3 Токсикологична оценка. 5 1.2 Правно основание. 7 1.2.1 Наредба за максимално количество микотоксини. 7 1.2.2 Регламент (ЕО) № 1425/2003. 7 1.2.3 Директива 2003/598/ЕО. 8 1.3 Процедура за проверка. 9 1.3.1 Висококачествена течна хроматография. 9 1.3.2 Газова хроматография. 10 1.3.3 Тънкослойна хроматография. 10 1.3.4 Имунохимични методи. 1.3.5 Определяне на патулин с помощта на MEKC-DAD. 11 1.4 Цел. 17 2 Материал и методи. 18 2.1 Материал. 18 2.1.1 Химикали и агенти. 18 2.1.2 Необходими основни и буферни решения. 19 2.1.3 Устройства. 2.1.4 Разгледана проба. 23 2.2 Методи. 24 2.2.1 Фотометрично определяне на концентрацията на PAT/5-HMF. 24 2.2.2 Оптимизиране на ефекта на разделяне. 26 2.2.3 Подготовка на пробата. 26 2.2.4 Увеличение на пробата от ябълков сок. 29 2.2.5 Измерване. 31

Съдържание III 3 Резултати. 32 3.1 Стабилност на стоковите разтвори. 32 3.2 Оптимизиране на ефекта на разделяне. 33 3.2.1 Изследвания на електролитния състав. 33 3.2.2 Подготовка на пробата. 35 4 Дискусия. 39 5 Резюме. 48 Речник. VII Библиография. XI Списък на фигурите. XVI Списък на таблиците. XVII клетвена декларация. XVIII приложение. XIX

Списък на съкращенията IV Списък на съкращенията Цифрови 5-HMF 6-MSA 5- (хидроксиметил) -фурфурол 6-метилсалицилова киселина; 6-метилсалицилова киселина B BSTFA N, O-бис-триметилсилил-трифлуороацетамид C CE CMC капилярна електрофореза; Капилярна електрофореза критична мицеларна концентрация; критична мицеларна концентрация D DAD DC DIN диодно откриване на решетка; Тънкослойна хроматография за откриване на диодни решетки Немски институт за стандартизация E ECD EI EOF детектор за улавяне на електрони; Електронен детектор за улавяне на електрони йонизация; Електронно въздействие Йонизация Електроосмотичен поток F FAO Хранителна и земеделска организация G GC газова хроматография; Газова хроматография H HFBI HPCE HPLC хептафлуоробутирилимидазол високоефективна капилярна електрофореза; Високоефективна Течна хроматография; Високоефективна Течна хроматография

Списък на съкращенията V L LFGB LMBG Закон за храните, стоките и фуражите Закон за храните и стоките M MEKC MG MS Мицеларна електрокинетична капилярна хроматография Молекулно тегло Масов спектрометър N NCI отрицателна химическа йонизация; отрицателна химическа йонизация P p.a. PAT PMDI pro анализ Патулин временен максимален дневен прием R RT време на задържане S SDS SPE натриев додецил сулфат; Натриев додецил сулфат/натриев лаурил сулфат екстракция в твърда фаза; Екстракция в твърда фаза W WHO Световна здравна организация

Списък на единици VI Списък на единици налягане mbar милибар площ интегрална mau. s мили абсорбционни единици. секунди маса μg, mg микрограм, милиграм моларност mol/l mol на литър молекулярно тегло g/mol gram на мол интензитет на сигнала mau мили абсорбционни единици напрежение kv киловолт температура C градуса Целзий обем μl, ml, l микролитър, милилитър, литър дължина на вълната nm нанометър време s, min, h секунда, минута, час

1 Въведение 2 1.1 Патулин 1.1.1 Структура и разпространение Патулин (4-хидрокси-4Н-фуро [3,2-с] пиран-2 (6Н) -он, виж фигура 1) е ненаситен хетероцикличен поликетид лактон, който се произвежда от различни видове могат да бъдат синтезирани чрез плесени от родовете Penicillium, Aspergillus и Byssochlamys в селскостопански продукти (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003; WEIDENBÖRNER, 1998). Най-важните представители са обобщени в таблица 1, в която Penicillium expansum е от най-голямо значение (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003). Самият синтез на микотоксини се благоприятства от определени условия в околната среда и варира при различните видове. Оптималният диапазон на образуване на микотоксини на P. expansum е при температура между 20 C и 25 C, диапазон на pH Фиг. 1: Химикали от pH 3 до pH 6,5 (KRÄMER, 2007) и W стойност 0,99 Структура на патулина (WEIDENBÖRNER, 1998). Някои образуващи патулин дори са в състояние да премахнат микотоксина при температури