Методи за изследване на микологията - Енциклопедия на Altmeyers - Катедра по дерматология

Автор: Професор доктор. мед. Питър Алтмайер

изследване

Последна актуализация на: 24.10.2017

Синоним (и)

Главна информация

Извличане на материал (варира според Mayser)

Процедурата за извличане на материал зависи от засегнатите структури (вж. A. Микози).

Почистване: Замества се със 70 процента етилов алкохол или изопропилов алкохол. Премахване на подходната флора и възможните придружаващи микроби. Няма налични в търговската мрежа дезинфекционни спрейове, тъй като това влияе върху растежа на гъбите! Вземането на пробата в областта на ръба на кожата се променя (тук най-силното лющене с най-голяма гъбична концентрация). Забележка: Използването на стерилни инструменти (скалпел, остра лъжица, ножици) е задължително условие!

Отстраняване от областта на ръба с тъпата страна на скалпел. Повърхностните и груби люспи се изхвърлят (често само мъртви гъбички и много примеси). Изследват се долни фини люспи. Фините люспи се събират в пластмасов съд или на лист хартия за изследване.

Кожен материал между пръстите на краката може лесно да се отстрани с пинсета за прегледите и след това да се обработи допълнително микологично Разпръсквач на пръстите може да се използва за улесняване на нещата (вижте по-долу). Tinea pedum).

Ако количеството материал е недостатъчно енергично намазване на повърхността със стилен тампон, навлажнен с трапезна сол. Това се разпространява директно върху културната плоча.

екзекуция

Приложение към слайда: Няколко частици от тестовия материал се поставят върху предметно стъкло. Добавете 1-2 капки 20-30% разтвор на калиев хидроксид (КОН; калиев хидроксид). Калиевата луга мацерира частиците на кожата, косата и ноктите, правейки ги прозрачни. Затворените гъбни елементи са микроскопски видими поради по-силното си пречупване на светлината. Плъзгачът е покрит с капак. Избягвайте въздушните мехурчета! Приготвените проби се съхраняват във влажна камера (например в затворена чаша на Петри с влажна целулоза), докато могат да бъдат разгледани. Времето, необходимо за частиците на кожата да постигнат желаната прозрачност, варира средно около 20 минути. Материалът за нокти отнема около 1 час. Косата трябва да се микроскопизира бързо след добавяне на разтвор на калиев хидроксид (косата се разпада много бързо; след това вече не е възможно да се присвои патогенът във форма на растеж - ектотрична/ендотрична).

Съкращаване на времето за мацерация: Може да се постигне чрез внимателно загряване на препарата. Да не се загрява до кипене, образуване на КОН кристали! Кристалите на луга от калий могат да доведат до фалшиво положителни резултати. Ако вместо калиев хидроксид се използва TEAH (тетраетиламониев хидроксид - Merck), материалът може незабавно да се изследва под микроскоп.

Микроскопия: За микроскопското изследване тестовият материал се разстила на много тънък слой чрез равномерно натискане върху покривния лист. Оценката се извършва с помощта на светлинен микроскоп. Спуснете кондензатора на микроскопа. Това води до по-остро изображение. Алтернативно: фазово контрастно изследване. Алтернативно: оцветяване (конго червено, Метиленово синьо, Chlorazole Black) на гъбичните клетки.

Местни препарати за питириазис версиколор (виж отдолу. Pityriasis versicolor)

Микроскопско изследване за идентификация на видово ниво: Изскубените препарати са подходящи за това (поставете 1 капка лактофенол върху предметното стъкло, изтръгнете гъбични елементи от културата, поставете върху предметното стъкло и разгледайте под микроскоп), препаратът за откъсване на лепящата лента (поставете 1 капка лактофенол върху предметното стъкло, отстранете гъбичните елементи от културата с помощта на лепящи ленти - леко натиснете), Залепете лепящи ленти върху предметното стъкло и ги изследвайте с микроскоп) или покривната стъклена култура (изрежете кубче агар от 1,0x1,0x0,5 cm от чаша на Петри, поставете го върху предметното стъкло, инокулирайте страничните ръбове, поставете върху покривното стъкло, инкубирайте за няколко дни, след това използвайте микроскопа).

Флуоресцентно изследване: Оцветяване на пробите с акридин оранжево или Calcofluor White. Багрилата се прикрепят към определени полизахариди или към хитина на гъбите (човешкият кератин е само леко оцветен). Гъбичните елементи светят в зелено във флуоресцентния микроскоп. Пещера: целулозата (памучни влакна) също флуоресцира.

Съвети)

Диференциацията на дрождите се осъществява посредством култура Оризов агар.

Кожен материал между пръстите на краката могат лесно да бъдат отстранени с чифт пинсети за изследванията и след това допълнително обработени микологично. За да улесните нещата, може да се използва разпръсквач на пръстите (вижте по-долу). Tinea pedum).

Хистологично изследване: По-големи парчета нокти също могат да се използват за хистологична диагностика, ако е необходимо. Хистологичното откриване на патогена се извършва с помощта на PAS отговор.