Медулограма или цитологично изследване на костния мозък Medlife

Цитологичното изследване на медуларния аспират заедно с медуларната биопсия е основното изследване при хематологичната диагноза. може да подкрепи диагнозата.

Микроскопското изследване първоначално се извършва с величина 10x/20x за:

-оценка на качеството на цитонамазката (наличие на мрънкане, качество на оцветяване, наличие на артефакти),

-оценка на клетъчността (съотношение на мастните клетки)

- наличието на мегакариоцити, миеломатозни клетки, мастоцити

-наличие на остеобласти/остеокласти, туморни клетъчни групи (клъстери)

-наличието на клетки на Гоше, Niemann-Pick, хистиоцити с включвания "сини като море", грануломи.

-са идентифицирани зоните на смачкване на медуларните рохкания (областите „централен”), Области междинен с богата клетъчност, при която медуларните клетки изглеждат изолирани или групирани в хемопоетични острови (запазвайки до известна степен архитектурната структура на костния мозък) и зоните периферни, с по-малко клетки (чрез разреждане). В педиатричните случаи костният мозък изглежда като еднаква дисперсия на клетките.

Последващо изследване на цитонамазката с цел 100x с потапяне се извършва на около 300-500 непокътнати клетки, от междинните зони [1]

Цитологичното изследване на медуларния аспират включва:

Оценка на клетъчността: оценка на обема на медуларните клетки в сравнение с други съставни клетки на костния мозък (например мастни клетки). Златният стандарт за оценка на клетъчността е биопсията на костния мозък. В медуларния аспират, медуларната клетъчност се разрежда от периферната кръв, аспирирана едновременно с медуларния сок, като винаги е по-ниска в сравнение с клетъчността, посочена от биопсията при същия пациент.
G/E съотношение: съотношението между миелоидни (G) и еритроидни (E) клетки; се изчислява, за да се оцени относителната клетъчност на двете основни клетъчни линии.Като основно правило, нормалното съотношение е между 2: 1 и 4: 1. Ниското съотношение G/E може да означава хипоплазия на гранулоцитни серии или хиперплазия на еритроцитни серии.
Оценка на хемопоетични серии от морфологична и зряла гледна точка, за да се отчете полуколичественият резултат;
Идентифициране на анормални клетки (левкемични или туморни клетки)
Открояване на анормални макрофаги при липидоза: клетка на Гоше, клетка на Ниман-Пик, хистиоцити с включвания "синьо като море"

От медуларния аспират могат да се извършват допълнителни изследвания, които заедно с цитологичното изследване повишават точността на хематологичната диагноза [4]:

имунофенотипиране
Генетичен анализ на хромозомите
FISH тест (Флуоресценция in-situ хибридизация)
Други тестове за генетична и молекулярна биология (мутация JAK2, BCR-ABL и др.)

Оценката на хемопоетичните серии от морфологична и зряла гледна точка, за да се докладва полуколичествено, е най-последователната част от морфологичното изследване:

Оценка на еритропоезата (серия еритроцити)

Предшествениците на еритроцитите са: проеритробласт (пронормобласт), базофилен еритробласт (нормобласт), полихроматофилен еритробласт (нормобласт) и оксифилен еритробласт (нормобласт).
Намалено грануло-еритробластично съотношение (G/E), което обикновено е 2/1 - 4/1, се установява при еритроидна хиперплазия (увеличен брой на медуларните еритроидни предшественици), която придружава различни видове анемия (желязодефицитна анемия, мегалобластна анемия, сидеробластична анемия, таласемия). Съотношението може да бъде отбелязано като ниско и дори обърнато при регенеративни анемии (постхеморагични/хемолитични). Повишеното съотношение G/E показва или хиперплазия на гранулоцитни серии, или еритробластопения.
Преобладаване на полихроматофилни форми (

50%) и оксифилис (> 30%) показват нормално съзряване на червената серия. Увеличението на процента базофилни еритробласти (> 5-20%) показва дефицит на хемоглобинизация (от желязодефицитна анемия, тежки мегалобластни анемии).

Проеритробластът е голяма кръгла клетка с диаметър 15-20 µm. Ядрото заема почти цялата клетка.Хроматинът е подреден във фин ретикуларен модел, но е по-интензивно оцветен от миелобластния хроматин. Ядрата присъстват, но са трудни за наблюдение. Цитоплазмата е базофилна, по-интензивна от цитоплазмата на миелобласта.
Базофилният еритробласт е по-малък от проеритробласта, с ядро, което заема по-малко цитоплазма, хроматиновият модел започва да се организира на блокове, цитоплазмата е тъмно синя.
Полихроматофилният еритробласт е по-малък от предишния, с ядро, организирано в очевидни хроматинови блокове и цитоплазмата става сива или сиво-розова поради съдържанието на синтезиран хемоглобин.
Оксифилният еритробласт е малко по-голям от зрелия еритроцит. Ядрото е малко, пикнотично. Цитоплазмата е червеникава, точно като зрелия еритроцит.

Оценка на гранулопоезата (миелоидна или гранулоцитна серия)

Гранулоцитните предшественици са: миелобласт, промиелоцит, неутрофил/еозинофил/базофилен миелоцит и метамиелоцит, заедно със зрели несегментирани и сегментирани неутрофилни/еозинофилни/базофилни форми. Миелоидните клетки са преобладаващият елемент в костния мозък, като зрелите клетки са най-многобройни.

Оценка на мегакариопоезата (мегакариоцитни серии)

Предшествениците на мегакариоцитите са: мегакариобласт, промегакариоцит (10% - 15% от общия брой), нетромбоцитогенни мегакариоцити (60-70%) и тромбоцитогенни мегакариоцити (10-20%). Мегакариоцитите са много големи клетки (30-150 µm), полиплоидни (8N, 16N, 32N и др.). Промегакариоцитите имат интензивно базофилна цитоплазма (увеличен брой на рибозомите) и ядрото е ненабулено, с млад външен вид. Нетромбоцитогенните мегакариоцити имат рубиненочервена цитоплазма поради гранулиране, а ядрото е неправилно, с променлив брой лобове. Тромбоцитогенните мегакариоцити имат цитоплазма с квазигрупирани гранули в бъдещите тромбоцити, имат тромбоцити в непосредствена близост до периферията им, а ядрото е по-малко и по-плътно. Мегакариоцитите обикновено са най-слабо разпространеният тип клетки в костния мозък

Други клетъчни елементи нормално установено при аспирация на гръбначния мозък:

моноцити са морфологично идентични с тези в периферната кръв. Промоноцитите имат по-деликатен хроматин, видими ядра и няколко гранули в базофилната цитоплазма.

Макрофаги (хистиоцити) произлиза от моноцити, но са с по-голям диаметър 20 - 30 µm. Ядрото е овално с деликатен хроматинов модел и с едно или две малки ядра. Цитоплазмата е синьо-сива или безцветна и често съдържа фагоцитни клетки, клетъчен детрит и вакуоли.

лимфоцити са подобни на тези в периферията, вариращи по брой, в зависимост от степента на замърсяване на материала, изследван с периферна кръв.

плазмоцити те имат променлив размер, обикновено с диаметър между 12 - 16 µm, кръгли или овални, с малко, кръгло ядро, поставено ексцентрично. Хроматинът се кондензира и подрежда на блокове. Цитоплазмата е тъмносиня с ясна парануклеарна област, подобна на аура .

мачта са лесно разпознаваеми по съдържанието на тъмносини гранули, които заемат цялата цитоплазма, покриваща ядрото. Когато е видимо, ядрото има везикуларна хроматинова структура.

Остеокласти и остеобласти са клетъчни елементи, които рядко се появяват в медуларния аспират. Те са по-чести при деца или хора с хиперпаратиреоидизъм или определени тумори (остеобластична реакция).

Остеокластите са големи клетки с диаметър над 100 µm. Те могат да бъдат объркани с мегакариоцити, но са многоядрени, с фин хроматинов модел и видими ядрени клетки.

Цитоплазмата варира от леко базофилна до интензивно ацидофилна поради съдържанието на ацидофилни гранули.

Остеобластите са овални клетки с диаметър около 30 µm. Те се срещат често на групи. Ядрото често е ексцентрично, с равномерно разпределен хроматин и 1-3 ядра. Цитоплазмата е бледосиня с ясно изразена центрозомна чиста зона, различна от ядрото (различна от прозрачната парануклеарна област на плазмената клетка).

Медулограмата може да се препоръча при:

Изследване на цитопения (левкопения, тромбоцитопения, бицитопения или панцитопения) за потвърждаване/опровержение на левкемия, миелодиспластичен синдром, аплазия на хипо/гръбначния мозък, агранулоцитоза
Нехемолитичната анемия, която не е диагностицирана като желязодефицитна анемия поради дефицит на витамин В12 или фолиева киселина или таласемия, изисква изследване на медуларната клетъчност.

Идентифициране, постановка и мониторинг на остра левкемия
Диагностика и наблюдение на миелодиспластични синдроми
Диагноза на натрупване: болест на Гоше, болест на Niemann-Pick, хистиоцитен синдром на "синьо море"
Изследване на моноклонална гамопатия за диагностика на мултиплен миелом или болест на Waldenström.
Диагностика и стадий на злокачествени заболявания, метастазирани в костния мозък.
Оценка на железните резерви в костния мозък (хемосидерин)

Таблицата по-долу съдържа конкретните препоръки за цитологично изследване на аспират на гръбначния мозък и хистологично изследване на биопсия на гръбначния мозък [3]

+ задължителен преглед

(+) незадължителен изпит

Ø не е посочен преглед

Промени в параметрите на хемолевкограмата/диагностични предположения

Напр. Цитологично от аспирация на гръбначния мозък

Хистологично изследване на биопсия на гръбначния мозък