Имунна регулация чрез лигавични регулаторни Foxp3 положителни Т клетки при деца и юноши

Имунна регулация чрез лигавични регулаторни Foxp3 положителни Т клетки при деца и юноши с целиакия Дисертация за академична степен Dr. мед. в Медицинския факултет на Университета в Лайпциг, подаден от: Michael Bauch, роден на 24 април 1986 г. в Karl-Marx-Stadt, направен в Клиниката и поликлиниката за деца и юноши на Университета в Лайпциг Ръководител: PD Dr. мед. хабил. Резолюция на Holm H. Uhlig относно присъждането на докторска степен от: 18 септември 2012 г.

регулация

Съдържание Съдържание Библиографско описание. 2 Съдържание. 3 Списък на съкращенията. 5 1. Въведение. 6 1.1 Целиакия. 6 1.1.1 Епидемиология. 6 1.1.2 Етиопатогенеза. 6 1.1.3 Диагностика. 10 1.1.4 Терапия. 11 1.1.4.1 Безглутенова диета. 11 1.1.4.2 Стратегии за експериментална терапия. 11 1.2 Регулаторни Т клетки. 12 1.2.1 Видове регулаторни Т клетки. 13 1.2.2 Механизми за потискане на CD4 + CD25 + Foxp3 + регулаторни Т клетки. 14 1.3 Цел на дипломната работа. 17 2. Материал и методи. 19 2.1 Етичен вот. 19 2.2 Курс на изследването. 19 2.3 Набиране на изследваната популация. 20 2.3.1 Група пациенти с целиакия. 22 2.3.2 Контролна група. 22 2.4 Телефонно интервю Събиране на анамнестични данни. 23 2.5 Антропометрични данни. 23 2.6 Клинична химия. 24 2.7 Целиакия - специфични антитела. 24 2.8 Оцветяване на хистологичните секции. 25 2.8.1 Подготовка на тъканните проби. 2.8.2 Оцветяване с хематоксилин-еозин (HE). 2.8.3 Имунохистохимично оцветяване. 2.8.4 Оцветяване с имунофлуоресценция. 27 2.8.5 Микроскопия и фотография. 28 2.9 Морфометрично измерване на хистологичните разрези. 28 2.9.1 Измерване на вили и крипта. 28 3

Списък на съкращенията Списък на съкращенията BMI Индекс на телесна маса CD Клъстер на диференциация CTLA-4 Антиген, свързан с цитотоксични Т лимфоцити 4 Cy5 Цианин 5 DAB 3,3-Диаминобензидин DAPI 4,6-Диамидино-2-фенилиндол Дихидрохлорид FITC Флуоресцеин 3 Флоресцеин 3 Тиоцианад Фоникс 3 3 Сливен пептид HA хипоалерген HE хематоксилин и еозин HLA човешки левкоцитен антиген HRP Хрян пероксидаза Хрян пероксидаза IDO Индоламин-2,3-диоксигеназа IEL Интраепителиални лимфоцити IgA/IgG имуноглобулин A или имуноглобулин полиглобин, мегаплут, полиглобин, мегапин ентеропатия Х-свързан синдром LAG-3 лимфоцитен антиген 3 MCV среден корпускуларен обем (среден обем на еритроцитите) MHC Основен комплекс за хистосъвместимост MICA MHC клас I свързана с полипептид последователност A MMP матрица металопротеинази NKG2D рецептор на естествени клетки-убийци PBST фосфат буфериран физиологичен разтвор Референтни единици SDS Standard Dev иационен резултат TBS Буфериран с Tris физиологичен разтвор TGF-β Трансформиращ растежен фактор бета Th T помощна клетка (CD4 + CD3 + Т клетки) TNFα тумор некрозис фактор алфа 5

1. Въведение Настоящата работа има за цел да разгледа следните теми: 1. Група деца и юноши с целиакия трябва да се характеризира клинично, параклинично, анамнестично и хистологично. По-специално, клетъчните и хуморалните имунни маркери се сравняват между групата пациенти с целиакия и група пациенти без целиакия. 2. Един фокус е върху откриването и количественото определяне на Foxp3 + регулаторните Т-клетки в лигавицата на тънките черва на деца и юноши с цьолиакия и контроли без вилозна атрофия. 3. Целта е да се изследва дали броят на лигавичните Foxp3 + регулаторни Т клетки на мястото на възпалението корелира с анамнестични, антропометрични, серологични, хематологични и хистологични маркери при пациенти с цьолиакия. По-специално трябва да се изследват възрастовата зависимост и възможните различия между половете в регулаторните Т-клетки. 18-ти

2. Материал и методи За да се съберат анамнестични данни, беше проведено кратко интервю с родителите при първи контакт. Веднага след получаване на писмено съгласие, от Института по патология бяха поискани архивирани проби от тънки черва. В същото време ретроспективно са записани антропометрични, клинични, параклинични и серологични данни на всеки пациент по време на ендоскопията. След предаването на тъканните проби те бяха изрязани, хистологично оцветени и оценени. Всички записани параметри бяха въведени в база данни на Excel (Фигура 2.1). Фигура 2.1 Преглед на практическия курс на изследването. 2.3 Набиране на изследваната популация Първоначално беше осъществен контакт с родителите на 195 деца и юноши. Целиакия е диагностицирана при 63 от тези пациенти. Целиакия е изключена чрез биопсия при 132 пациенти. Само 17 родители (8,7%) отказаха да участват в проучването след първия контакт. За окончателно участие писменото съгласие на 20-ти