Ефекти на акарицидите върху медоносната пчела Apis mellifera intermissa и анализ на активността
ДЕМОКРАТИЧНА И НАРОДНА РЕПУБЛИКА АЛЖИР Министерството на висшето образование и на научните изследвания BADJI- Мохтар-Анаба УНИВЕРСИТЕТ ФАКУЛТЕТ НА НАУКИТЕ КАТЕДРА ЛАБОРАТОРИЯ ЛАБОРАТОРИЯ НА ЖИВОТНИТЕ БИОЛОГИЯ ПРИЛОЖНА ОКОЛНАТА СРЕДА БИОЛОГИЯ тезата за PHOXICIDE ON PHARSIOLOGY 3-ти CYOTOSY на постиженията на биологията PHARSIOLOGY ПО PHARSIOLOGY ПРИЛОЖНА ОКОЛНАТА СРЕДА 3 тезата ФАРСИОЛОГИЯ В 3-та АЦИЦИДНА БИОЛОГИЯ ФАРСИОЛОГИЯ ОПСИЦИД 3 медоносна пчела Apis mellifera intermissa и анализ на антимикробната активност на прополиса и меда. Представено от: Mme Neila NEDJI Пред журито в състав: Председател: M. Noureddine SOLTANI Директор на дипломната работа: Mme Wahida AYAD-LOUCIF Изпитващ: Mme Fouzia TINE-DJEBAR Изпитващ: M. Kamel LOUADI Изпитващ: M. Mohamed ACHOU Изпитващ: Mme Selima BERCHI Pr., Унив. Annaba MCA, Унив. Annaba MCA, Унив. Tébessa Pr., Унив. Константин Пр., Унив. Annaba Pr., E.N.S.B. Константин УНИВЕРСИТЕТНА ГОДИНА 2014/2015
Бихме искали да благодарим много на проф. Д. КИРАНЕ, който ми позволи да направя всички микробиологични анализи на ниво Лаборатория по микробиология, Университет в Анаба. Също така благодарим на д-р И. БИТАМ от Института Пастьор в Алжир за безценната помощ, като ни предостави референтни микробни щамове. Голямо благодаря на г-н F. BOUSSOUAK, пчелар, както и на неговите сътрудници за тяхната ценна и щедра помощ за пчелина. Също така искам да изкажа сърдечните си благодарности на всички хора, които са допринесли пряко или косвено за изпълнението на моята работа. Изразявам сърдечните си благодарности на учителите от биологичния отдел за тяхната помощ и насоки по време на нашето обучение. На всички, които са участвали пряко или косвено в реализацията на тази работа.
Посвещения Посвещавам тази работа на родителите си; че намират тук цялата ми благодарност за подкрепата през цялото ми обучение. На моя скъп съпруг Камел, който ме подкрепя толкова много. На скъпите ми роднини. На децата ми Nourhene, Faten и Youness. На моите сестри и братя. На племенниците и племенниците ми. До моите приятели. На всеки, който е допринесъл пряко или косвено за развитието на тази теза.
4.2. Общо съдържание на флавоноиди в прополиса. 33 5. Анализ на антимикробната активност на прополиса. 34 5.1. Диаметри на зоните на инхибиране на растежа на микробни щамове. 34 5.2. Минимална инхибиторна концентрация на прополис. 6. Ефект на оксаловата киселина чрез локално приложение върху специфичната активност на глутатион S-трансфераза при работници от A.mellifera intermissa. 38 7. Ефект на оксаловата киселина върху хистопатологията на средното черво на работниците на A. mellifera intermissa. 39 II. ДИСКУСИЯ.40 ГЛАВА II: Антимикробна активност на меда и прополиса срещу патогенни бактерии, предавани от храната. I. РЕЗУЛТАТИ 1. Сравнение на физико-химичните параметри на меда от различни фитогеографски региони. 46 2. Сравнение на съдържанието на полифеноли и общи флавоноиди в меда и прополиса в различни фитогеографски региони. 47 3. Анализ на антимикробната активност на меда и прополиса от различни фитогеографски региони по отношение на патогенни бактерии, предавани с храна. 48 II. ДИСКУСИЯ. 49 ЗАКЛЮЧЕНИЯ И ПЕРСПЕКТИВИ. 54 ОБОБЩЕНИЯ. 56 френски. 56 английски. 58 арабски. 60 БИБЛИОГРАФСКА ЛИТЕРАТУРА. 62 ПРИЛОЖЕНИЯ (НАУЧНО ПРОИЗВОДСТВО). 100
СПИСЪК НА ТАБЛИЦИТЕ Таблица 1. Сравнение на средните стойности на физикохимичните параметри на меда преди третиране с акарициди ... 26 Таблица 2. Сравнение на средните стойности на физикохимичните параметри на меда след третиране с акарициди ... 27 Таблица 3. Минимални концентрации инхибитор на мед (mg/ml) преди и след лечение с акарициди за всеки микробен щам. 32 Таблица 4. Минимална инхибиторна концентрация на етаноловия екстракт от прополис (µg/ml) преди и след третиране с акарициди за всеки микробен щам. 37 Таблица 5. Сравнение на средните стойности на физико-химичните параметри на меда според регионите. 46 Таблица 6. Сравнение на средните стойности на съдържанието на полифеноли и общи флавоноиди в меда и прополиса по региони. 47
Фигура 17. Специфична активност на глутатион S-трансферази (μm/min/mg протеин) на средното черво на новопоявили се работници след локално приложение на оксалова киселина.38 Фигура 18. Микроскопски изображения на чревния епител на пчела, третирана с оксалова киселина ( 3,5%). 39 Фигура 19. Микроскопски изображения на чревния епител на пчела, обработена с оксалова киселина (20%). 39 Фигура 20. Диаметри на зоните на инхибиране (mm) на бактериалния растеж от мед на нивото на всеки фитогеографски регион. 48 Фигура 21. Диаметри на зоните на инхибиране (mm) на бактериалния растеж от етаноловия екстракт от прополис на нивото на всеки фитогеографски регион. 49
Привличане сред пчелните паразити, Varroa destructor (Acari: Varroidae) (Anderson & Trueman, 2000) се счита за една от най-сериозните заплахи за Apis mellifera (de la Rúa et al., 2009; vanengelsdorp & Meixner, 2010; Brodschneider et, 2010; Chauzat et al., 2010; Dahle, 2010; Genersch et al., 2010; Guzmán-Novoa et al., 2010; Potts et al., 2010; Rosenkranz et al., 2010; Schäfer et al. ., 2010; Topolska et al., 2010; Vanengelsdorp et al., 2010; Noireterre, 2011; Martin et al., 2012). V. destructor е екзопаразитен пчелен акар, който се храни с хемолимфата си (Dahle, 2010; Martin et al., 2010; 2012; Nazzi et al., 2012). Той може да има три вида действие върху Apis mellifera: механично (Kanbar & Engels, 2003), вектор на много инфекциозни причинители на пчели (Weinberg & Madel, 1985; Tentcheva et al., 2004; Shen et al., 2005; Prisco et, 2011; Wendling, 2012; Dainat et al., 2012) и спойлер (Duay et al., 2003). Последиците от вароатозата върху пчелите са главно намаляване на телесното тяло, в концентрацията на протеини и хемолимфатни въглехидрати при поява (Smirnov 1978; De Jong et al., 1982, Weinberg & Madel, 1985; Achou & Soltani, 1997; Bowen -Waker & Gunn, 2001) и дълголетие (De Jong & De Jong, 1983; Schneider & Drescher 1987; Kovak & Craisheim, 1988, Amdan et al., 2004). Също така наблюдаваме ранна активна храна на работниците (Schneider & Drescher 1987) и трудности за оцеляване през зимата (Kovac & Crailsheim, 1988). Други физиологични характеристики се състоят от дегенерация на мастните тела и недоразвитие на хипофарингеалните жлези (De jong et al., 1982; De Jong & De Jong, 1983; Schneider & Drescher, 1987). Също така има промяна в онтогенезата и експресията на гликопротеините на сперматозоидите с намаляване на диаметъра на слузната жлеза и семенната везикула, както и в броя на сперматозоидите (Rinderer et al., 1999). Намаляване на размера на антеналния бич и броя на антенните сенсили (Abd EL-Wahab et al., 2006), както и намаляване на преживяемостта до появата (Rinderer et al., 1999); броят на пчелите, достигнали възрастта на полова зрялост (Collins & Pettis, 2001) и честотите на полетите (Schneider, 1987). Всички тези ефекти влияят отрицателно върху конкурентния процес на чифтосване (Bubalo et al., 2005). 4