Авторадиография - Биология

Колко горещо е твърде горещо за живота дълбоко под дъното на океана?

Антибиотици от бактерии

Клетъчна миграция: новооткрита функция на известен протеин

Молекулярен компас за подравняване на клетките

Какво кара листата да стареят през есента

Демокрацията на лешоядите токачки

Околната среда на Ekembo: Хората също живееха в открити пейзажи

| Генетика | Земеделие, горско стопанство и животновъдство

Сортът пшеница е създаден чрез кръстосване на диви треви

Колко горещо е твърде горещо за живота дълбоко под дъното на океана?

Авторадиография

Тази статия или следващият раздел не са адекватно снабдени с подкрепящи документи (напр. Индивидуални доказателства). Следователно въпросните данни вероятно скоро ще бъдат премахнати. Моля, помогнете на Wikipedia, като проучите информацията и добавите добри доказателства. Повече подробности могат да бъдат дадени на страницата за разговори или в историята на версиите. И накрая, моля, премахнете този предупредителен знак.

биология

Авторадиография или Рентгенография (често съкращение AURA) описва визуализацията на химичен компонент от радиоактивни изотопи, първоначално чрез почерняване на фотографски филм, сега все по-често с помощта на радиационен детектор. Полученият запис е Авторадиограма Наречен.

Приложения

В продължение на три десетилетия авторадиографията беше неразделна част от анализа на ДНК последователността на Sanger. От последните години на 20-ти век обаче за анализ на последователността все по-често се използват флуоресцентни вместо радиоактивно маркирани ДНК нуклеотиди.

Авторадиографията се използва също при производството на рекомбинантни протеини, анализ на ензимни реакции или идентифициране на ензимни субстрати.

Използва се също във фармакокинетиката за провеждане на проучвания за освобождаване Абсорбция Разпределение Метаболизъм Екскреция (LADME).

екзекуция

Общото за всички приложения на авторадиографията е необходимостта от контрабанда на радиоактивни изотопи в анализираните молекули. Поради честата поява на съответните стабилни изотопи в биомолекулите и относително ниската им опасност често се използват радиоизотопите 14 C (въглерод), 35 S (сяра), 32 P (фосфор) и 3 H (тритий).

Бактериален щам, трансформиран с експресионен плазмид, се смесва с хранителна среда, която съдържа радиоактивно белязаната аминокиселина 35 S-метионин. 35 S-метионин е включен в рекомбинантния протеин, който е кодиран върху плазмида. Бактериалният екстракт се отделя чрез SDS-PAGE, гелът се изсушава и се нанася филм. След като филмът е „изложен“ на бета лъчите, излъчвани от изотопите, позицията на рекомбинантния протеин е видима върху разработения филм.

2-ри пример - анализ на ензимната активност

АТФаза, ензим, който разцепва нуклеотидния АТФ, се инкубира с радиоактивно белязан 32 P-ATP. Сместа се отделя след различно време чрез тънкослойна хроматография, хроматографската плака се изсушава и поставя върху филм. Почерняването на филма от 32 Р-фосфат отразява активността на ензима.