Защо червените кръвни клетки трябва да бъдат отстранени, преди да съхранявате кръв от пъпна връв
От началото на развитието на полето лабораториите, които обработват пъпна връв за съхранение, започват да премахват плазмата (изчерпване на плазмата) и червените кръвни клетки (изчерпване на червените кръвни клетки), преди криоконсервиране на концентрата, съдържащ стволови клетки.
Основната причина за плазмения клирънс беше да се намали обемът на крайната единица, за да се улесни криогенирането. Плазмата съдържа протеини, но не и стволови клетки, така че не е необходима за трансплантационни терапии.
По същия начин червените кръвни клетки не помагат по време на трансплантация, така че те също не са необходими. Всъщност наличието на червени кръвни клетки по време на трансплантация може да бъде опасно по няколко причини. Първо, дори когато пациент и донор имат "перфектна" съвместимост, съответно имат една и съща HLA (човешки левкоцитен антиген) типология, те могат да имат различни кръвни групи. В такива случаи, ако червените кръвни клетки на донора се вливат в пациента, те могат да причинят „странични ефекти“. Тези реакции могат да бъдат сведени до минимум чрез хидратиране на пациента.
Най-важната причина, поради която червените кръвни клетки са опасни за пациента, е, че те обикновено не оцеляват в процеса на размразяване, за да бъдат използвани. Червените клетки се лизират по време на криоконсервацията - клетъчната мембрана се разкъсва, клетъчното съдържание, включително хемоглобина, прелива. Тези компоненти могат да влошат състоянието на пациентите, като повлияят бъбречната функция, с усложнения, които могат да бъдат фатални.
Поради всички горепосочени причини премахването на червените кръвни клетки от кръвта от пъпната връв преди криоконсервацията се превърна в стандартна практика сред публичните и частните банки на стволови клетки.
В момента повечето автоматизирани системи за обработка, използвани в лабораториите за банки със стволови клетки по света, извършват изчерпване (елиминиране) на плазмата и червените кръвни клетки с добро възстановяване на стволови клетки и предшественици, необходими за присаждане (ядрени клетки и CD34 +). Частичното изчерпване на червените кръвни клетки причинява много по-малко присъствие от тях в преработените единици, отколкото в прясно събраната пъпна кръв (цяла), така че цветът на крайния продукт е розов или светлочервен, а не тъмночервен като цвета на кръвта по време на събирането.
Единственият аргумент за това да не се извършва изчерпване на червените кръвни клетки преди съхранение на кръв от пъпна връв е, че някои клетки могат да бъдат загубени по време на центрофугирането - стъпката, необходима за отделяне на различните компоненти на кръвта. Повечето клетки обаче са гранулоцити, а не родоначалници и не са необходими за присаждане. От друга страна, ако червените кръвни клетки не се отстраняват от пъпната кръв преди съхранение, те трябва да бъдат отстранени чрез "измиване" след криоконсервиране и размразяване, дори преди употреба. Тази стъпка на измиване е друга възможност за загуба на клетки.
Пациентите с кръв от пъпна връв, при които не се отстраняват червените кръвни клетки, са много по-трудни за използване от пациентите. Когато криогенната единица се размрази, червените кръвни клетки се разпадат. Медицинската литература съобщава за сериозни реакции в случаите, когато тези единици са инфузирани, без да се разреждат или измиват. Настоящите препоръки от Националната програма за донорство на костен мозък НЕ са да се използват цели кръвни единици, без да се измиват или поне да се разреждат.
Измиването на цели единици кръв от пъпна връв след размразяване е техническо предизвикателство. Свободният хемоглобин и клетъчните отломки, освободени с разкъсването на мембраните на червените кръвни клетки, затрудняват разграничаването между ядрени клетки (включително стволови клетки), които лабораторните специалисти искат да запазят, спрямо остатъчния „супернатант“, който трябва да бъде отстранен. Разделянето на различни видове клетки след размразяване е по-трудно, тъй като има по-големи клетъчни загуби, отколкото при обработката на прясно събрана пъпна кръв. В допълнение, тестовете след размразяване при оценяване на единица са трудни за интерпретация.
В заключение, поради проблемите, причинени от боравенето с цяла кръв след криоконсервация и размразяване, както в банките на стволови клетки, така и в терапевтичните центрове - настоящите стандарти включват обработка за частично изчерпване на червените кръвни клетки и елиминиране на плазмата преди криоконсервация. Освен това всички публични банки, лицензирани от FDA (Администрацията по храните и лекарствата), обработват пъпна кръв за отстраняване на червените кръвни клетки и плазмата преди криоконсервиране на концентрата на стволовите клетки.
- Barker JN, Byam C, Scaradavou A. Как се отнасям: селекция и придобиване на несвързани присадки от пъпна кръв. Кръв 2011; 117: 2332-2339
- Barker JN, Scaradavou A. Противоречието на пълните с червени кръвни клетки единици от пъпна кръв. Кръв 2011; 118: 480 [Писмо до кръв; Отговор]
- Препоръки за NMDP за приготвяне на RBC-пълни единици от пъпна връв за инфузия, протокол NMDP IND 10-CBA, версия 7.0
