Заглавие на дипломната работа
Дипломна работа Заглавие на дипломната работа Влияние на тютюнопушенето върху липидния профил, както и избрани параметри на оксидативния стрес при здрави възрастни Автор Julia Pöschl Желана академична степен Magistra der Naturwissenschaften (Mag.rer.nat) Виена, 2011 Номер на изследване според учебния лист: A 474 Област на изследване според учебния лист: Дипломно обучение по хранителна наука Ръководител: о. Унив.-проф. Д-р Ибрахим Елмадфа
Страница III Благодарности Бих искал да използвам тази възможност, за да благодаря по-специално на родителите си и по-специално на майка си. Посвещавам тази работа на нея, за да й благодаря от сърце за нейната неограничена подкрепа, търпение и помощ по време на следването ми. Специални благодарности също отиват на г-н о. Унив.-проф. Д-р Ибрахим Елмадфа за поемането на темата ми за дипломна работа и приятелската подкрепа по време на работата ми, както и на моя съ-ръководител д-р. Елизабет Фабиан, която винаги беше до мен със съвети и действия въпреки пътнотранспортното си произшествие и дългия си рехабилитационен престой. Накрая обаче бих искал да благодаря на най-големия ми модел за подражание, баща ми. Неговата подкрепа ме укрепи, за да сбъдна мечтите си и да постигна целите си.
Страница VI 3.4.1. Метод. 26 3.4.2. Използвани материали и оборудване. 26 3.4.3. Изпълнение на определението. 27 3.4.4. Оценка. 28 3.5. Определяне на окисления LDL холестерол (oxldl). 29 3.5.1. Метод. 29 3.5.2. Използвани материали и оборудване. 29 3.5.3. Разреждане на пробите. 30 3.5.4. Изпълнение на определението. 30 3.5.5. Оценка. 30 3.6. Определяне на съвременни окислителни протеинови продукти (AOPP). 31 3.6.1. Метод. 31 3.6.2. Използвани материали и оборудване. 31 3.6.3. Изпълнение на определението. 31 3.6.4. Оценка. 32 3.7. Контрол на качеството. 32 3.8. Статистическа оценка. 33 4. Резултати. 34 4.1. Разпределение на възраст и пол. 34 4.2. Пушещо поведение. 37 4.3. Антропометрични параметри. 40 4.3.1. Височина. 42 4.3.2. Телесно тегло. 4.3.3.3. ИТМ. 44 4.3.4. Обиколка на талията. 44 4.3.5. Обиколка на тазобедрената става. 45 4.3.6. W/H съотношение. 46 4.4. Липиден профил. 47 4.4.1. Общ холестерол. 47 4.4.2. HDL холестерол. 48 4.4.3. Общ/HDL холестерол. 49 4.4.4. Триглицериди. 49 4.4.5. LDL холестерол. 50 4.4.6. LDL/HDL коефициент. 51 4.5. Параметри за определяне на оксидативен стрес. 52 4.5.1. Общ антиоксидантен капацитет (TAC). 52 4.5.2. MDA. 53 4.5.3. AOPP. 54 4.5.4. oxldl. 55
Ст. VII 5. Дискусия. 57 5.1. Разглеждане на целия колектив по отношение на различията между половете. 57 5.1.1. Липиден профил, антропометрия и сърдечно-съдов риск. 57 5.1.2. Пушене, оксидативен стрес и сърдечно-съдов риск. 60 5.2. Тютюнопушенето и неговият ефект върху липидния профил, антропометрията и сърдечно-съдовия риск. 64 6. Заключение. 66 7. Резюме. 69 8. Резюме. 71 9. Библиография. i
Страница IX Списък на фигури Фигура 2-1: Патогенеза на атеросклеротични възпалителни реакции. 13 Фигура 2-2: Оксидативен стрес. 18 Фигура 3-1: Разпределение на поведението на тютюнопушенето. 21 Фигура 4-1: Разлика между жените и мъжете по отношение на липидния профил и общия антиоксидантен капацитет (*: р 0.85 при жените и WHR> 1.00 при мъжете, има коремно затлъстяване и следователно повишен сърдечно-съдов риск ( ELMADFA, 2004). Намаляването на висцералните и подкожните телесни мазнини води до намаляване на сърдечно-съдовите рискови фактори и понякога подобрява липидния профил, кръвното налягане, кръвната глюкоза, HbA1cs и инсулиновата резистентност (HAUSTEIN, 2004).
Страница 5 Според Статистика Австрия, 44% от мъжете и 55% от жените в Австрия са с нормално тегло. 43% от мъжкото население се счита за наднормено тегло и 12% дори като затлъстяване. При женското затлъстяване, процентът е 13%. Във възрастовата група от 60 до 74-годишни честотата на наднорменото тегло и затлъстяването е най-висока и при двата пола (мъже: 19%; жени: 21%). Ако сега сравним резултатите от изследването на ИТМ от 2006/07 г. със специалните въпроси за микропреброяване на здравето през 1999 г., стигнахме до следния извод: Значителен ръст на хората със затлъстяване може да се наблюдава и при двата пола, и при всички възрастови групи. По отношение на степента на поднормено тегло (ИТМ 200 mg/dl или 5,2 mmol/l триглицериди:> 160 mg/dl или 1,8 mmol/l LDL холестерол:> 130 mg/dl или 3,4 mmol/l HDL холестерол: ph = 7.4 3.3 Определяне на малондиалдехид в плазмата 3.3.1 Метод Малондиалдехидът е продукт на разграждане на липидната пероксидация, поради което е важен метод за определяне на окислителното увреждане на биомолекулите. В хода на тази работа, определена от HPLC (WONG et al., 1996).
3.3.2. Използвани материали и устройства Таблица 3-3: Устройства за определяне на MDA Колона: LichroCART 125-4 Lichrosher 100 RP-18.5 µm, предпазна колона на Merck: LichroCART 250-4 Lichrosher 100 RP-18, 10 µm, Merck LaChrom Merck Hitachi Помпа за хроматографска система L-7100 Флуорисцентен спектрофотометър F-1050 Интегратор D-7500 Таблица 3-4: Реагенти за химикалите за определяне на MDA, използвани за тетраетоксипропан Sigma No. T-9889 етанол па Riedel de Haën No. Подвижна фаза A: B = 60:40 A: фосфатен буфер (предварително разтворете 6,8 g калиев дихидроген фосфат в 800 ml дестилирана вода; регулирайте pH = 6,8 с 1 M KOH; напълнете до 1 l с дестилирана вода; филтър) B: Обем на инжектиране на метанол 20 µl поток 1,0 ml/min налягане 85 bar Чувствителност 20 Дължина на вълната на излъчване: 563 nm Дължина на вълната на възбуждане: 532 nm време на работа 5 минути
Таблица 3-8: Реактиви PBS ABTS буферен разтвор Стандартен плазмен миоглобин H 2 O 2 празен 410 µl 400 µl - - 20 µl 170 µl стандартен 410 µl 400 µl 10 µl - 20 µl 170 µl проба 400 µl 400 µl - 20 µl 20 µl 170 µl След добавяне на H 2 O 2 към тестовата смес, ходът на екстинкция се измерва фотометрично при 734 nm за 6 минути. Това е времето, което най-високият стандарт на Trolox може да инхибира реакцията. 3.4.4. Оценка Крайните точки на 5-те стандарта и пробите се изразяват като проценти от заготовката. (Празна стойност на абс. - стандартна абс.)/Празна стойност на абс. = [%] (Празна стойност на абс. - проба на абс.)/Празна стойност на абс. = [%] Оценката се извършва чрез линейна регресия на стандартните нива, тъй като има пряка връзка между процентните проценти на стандартите и тяхната концентрация. Антиоксидантният капацитет на пробата е даден като mmol еквиваленти на Trolox (Trolox-Ä)/l. Таблица 3-9: Стандартни концентрации за оценка на TAC No. Trolox [2.5 mm] PBS буферна концентрация [µl] [µl] [mmol/l] Стандарт 1 100 400 0.5 Стандарт 2 200 300 1 Стандарт 3 300 200 1,5 стандарт 4 400 100 2,0 стандарт 5 100-2,5
Страница 32 3.6.4. Оценка Концентрацията на AOPP се оценява, като се използва директна, линейна стандартна крива, създадена от шест стандарта (концентрация: 0 µmol/l 100 µmol/l). 3.7. Осигуряване на качеството За да се потвърди качеството и точността на използваните методи, за всяко откриване бяха извършени както вътрешноизмерващ анализ (определяне на 10 от една и съща проба), така и междинен анализ (определяне на една и съща проба в пет различни дни) (Таблица 3.12). Таблица 3-12: Коефициенти на вариация (CV) на интра-анализ и параметър на интер-анализ Анализ CV на интра-анализ (%) CV на интер-анализ (%) Общо липиди 2,9 4,3 Общ холестерол 2,1 2,3 HDL холестерол 1,4 4, 3 триглицериди 1.6 2.4 MDA 0.4 1.5 TAC 0.3 0.8 AOPP 1.0 1.4 oxldl 1.4 3.6
Страница 33 3.8. Статистическа оценка Статистическата оценка на резултатите от анализа е извършена със статистическия софтуер SPSS 16.0 за Windows. Тестът на Колмогоров-Смирнов е проведен за проверка на отделните параметри за нормално разпределение и хомогенност на дисперсията. Средното сравнение на нормално разпределените характеристики се извършва с помощта на t-теста за независими проби, докато U-тестът на Mann-Whitney е използван за данни, които не са нормално разпределени. Анализите на линейна регресия са извършени според Пиърсън.
Страница 47 1,2 1 [a] [b] 0,8 W/H съотношение 0,6 0,4 0,2 0 Жени Мъже Пушачи Непушачи Бивши пушачи Фигура 4-6: Сравнение на съотношението W/H между отделните групи a: жени жени p 200 mg/dl или> 5,2 mmol/l. Като се има предвид общият сбор, стойността е била средно 5,2 ± 1,2 mmol/l и по този начин при 51% от изследваните лица над препоръчания референтен диапазон. Едва ли е имало разлики между половете, но е установена повишена стойност при 56% от пушачите, 49% от непушачите и 46% от бившите пушачи. Установени са и значително положителни корелации (дадена е р. 5. Тази стойност е надвишена само при 12% от изследваните лица, 36% от тях жени и 64% от тях мъже. Коефициентът се различава значително между половете (р 160 mg/dl и 1, 8 mmol/l, което следователно представлява повишен сърдечно-съдов риск. В сравнение между половете, изследваните мъже имат средно по-висока стойност от участващите жени (p 1,8 mmol/l е 10% при жените, за мъжете (20%) е два пъти по-висока, значителна разлика в сравнение със средната стойност-
Не беше възможно да се определи дали тестваният субект се описва като пушач, бивш пушач или строг непушач на 50-та стойност на триглицеридите (Таблица 4.4.). Рискът обаче е по-висок сред бивши пушачи (22%) и пушачи (16%) в сравнение с непушачите (8%). Резултатът от това проучване показва значителна корелация между теглото (GK: r = 0,311, p 130 mg/dl или 3,4 mmol/l, което се отнася за над 30% от участващите субекти. Значителна разлика (p 3, 4 mmol/l) и свързаният с това повишен риск от сърдечно-съдови заболявания е по-изразен при мъжете участници в проучването. Само малко под 60% от мъжете и 71% от жените са имали стойност на пушачи, p