Тумор некрозис фактор TNF-алфа - Synevo

Информиранii общи и препоръки за определяне на TNF-α

TNF (фактор на туморна некроза) е проинфламаторен цитокин, чието име произлиза от способността му да унищожава туморни клетки и да индуцира хеморагична некроза при трансплантирани мишки тумори. .

TNF-α (казектин) и TNF-β (лимфотоксин) първоначално са описани като цитотоксични фактори, произведени съответно от макрофаги и лимфоцити; Впоследствие беше установено, че TNF-α и TNF-β са два протеина, които показват хомология на 34% от аминокиселинните последователности 3; 5. И двата медиатора действат върху прицелните клетки чрез едни и същи рецептори и следователно имат сходни, но не идентични биологични ефекти.

Генът TNF-α е разположен на хромозома 6. При условия на денатурация TNF-α е негликозилиран 17 kDa протеин. Биологично активната форма на TNF-α е тример. В допълнение към тази разтворима форма, има мембранно свързана форма (28 kDa), разположена на повърхността на TNF-α-продуциращи клетки и която служи като резервоар за разтворимата форма, генерирана от протеолитично разцепване 3 .

TNF-α се произвежда не само от макрофаги и моноцити, но и от лимфоцити, мастоцити, неутрофили, кератиноцити, астроцити, микроглии, гладкомускулни клетки и някои туморни клетъчни линии 5. Големи количества TNF се освобождават при контакт на макрофаги, CD4 + Т лимфоцити и клетки естествени убийци (NK) с липополизахариди, бактериални продукти и интерлевкин 1 3 .

TNF-α действа директно чрез два различни повърхностни рецептора, наречени TNFR I и TNFR II, с различно молекулно тегло 3; 4; 5. Тези рецептори могат да бъдат идентифицирани във всички видове клетки, с изключение на еритроцитите. Части от тези рецептори се разцепват от протеази и достигат до извънклетъчната среда, образувайки разтворими рецептори; те действат като ендогенни инхибитори на TNF-α и по този начин регулират нивото на извънклетъчния TNF-α 4 .

TNF-α свързването с рецептора води до конформационни промени в рецепторната структура, което води до каскадно активиране на транскрипцията на други протеини, участващи в клетъчната пролиферация, възпалителния отговор и клетъчната апоптоза. TNF-α може да има локално паракринно действие (локалното повишаване на концентрацията на TNF може да причини основните признаци на възпаление: зачервяване, болка, топлина и подуване) или може да действа на разстояние, като ендокринните хормони 5. Поради наличието на своите рецептори в повечето тъкани, TNF-α упражнява голямо разнообразие от биологични ефекти:

цитолитични и цитостатични ефекти върху туморните клетки;
хемотаксичен ефект върху неутрофили 3;
увеличава пропускливостта на ендотелните клетки в региона с възпаление; те не само причиняват натрупването на имунни клетки, но също така оказват влияние върху процеса на коагулация;
активира различни метаболитни процеси в мускулните клетки и адипоцитите, за да осигури енергията, необходима за възпалителната реакция 1;
в макрофаги стимулира фагоцитозата и производството на простагландин Е2;
инсулиновата резистентност се увеличава в други тъкани;
активира остеокластите, като по този начин стимулира костната резорбция;
е растежен фактор за фибробластите и стимулира синтеза на колагеназа;
засилва пролиферацията на Т лимфоцити след стимулация с интерлевкин 2 3;
причинява анорексия и треска, действайки като ендогенен пироген 1;
е отговорен за синдрома на кахексия, свързан със злокачествени заболявания и повечето паразитни инвазии 5 .

Определянето на серумен TNF-α е маркер за системен възпалителен отговор (SIRS), свързан със сепсис, травма и сърдечна недостатъчност. Някои проучвания показват връзката на концентрацията на TNF-α в цереброспиналната течност със степента на активност при множествена склероза; от друга страна, определянето на TNF-α може да бъде полезно при разграничаване на бактериалния менингит от други причини за менингит 1 .

Проучванията при животни показват, че TNF-α участва в патогенезата на ревматоидния артрит и възпалителното заболяване на червата поради своя възпалителен ефект чрез активиране на ендотелните клетки и индуциране на неутрофилен хемотаксис. Поради тази причина лечението на тези състояния включва и TNF-α инхибитори: или анти-TNF-α моноклонални антитела (инфликсимаб, адалимубаб), или синтетични протеини на рецептор на антитяло, съответно TNFRII-IgG1 (етанерцепт) 5 .

Нивата на TNF-α могат да се използват при диагностициране на имунни нарушения и при проследяване на леченията, само във връзка с допълнителни клинични и параклинични данни 2 .

Обучение на пациента - на гладно (на гладно) или след хранене 2 .

Събран образец - венозна кръв 2 .

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан без антикоагулант, с/без отделящ гел 2 .

Количество прибрано - минимум 0,5 ml ser 2 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - интензивно хемолизиран, жълтеникав, липемичен или бактериално замърсен образец; проби, които не са пристигнали в лабораторията замразени 2 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - серумът се отделя чрез центрофугиране възможно най-скоро след пълното образуване на изварата и пробата незабавно ще бъде замразена при -20 ° C; проби, събрани извън лабораторните пунктове, ще бъдат транспортирани до контейнера, предназначен за замразени проби 2 .

Стабилност на пробата - серумът е стабилен за 1 месец при -20 ° C; не размразявайте/замразявайте 2 .

Метод - имунохимичен метод за откриване на хемилуминесценция (CLIA) 2 .

Референтни стойности 12 .

Тълкуване на резултатите

Повишени нива на TNF-α се регистрират при сепсис, травма, автоимунни и хронични възпалителни заболявания (ревматоиден артрит, анкилозиращ спондилит, болест на Crohn, псориазис), инфекциозни заболявания и отхвърляне на присадката 2 .