Сравнителни изследвания върху проникването и проникването през кожата в дифузионните клетки - PDF
От Института по фармакология, токсикология и фармация на Университета по ветеринарна медицина в Хановер Сравнителни проучвания за проникване през кожата и проникване в дифузионни клетки ИНАУГУРНА ДИСЕРТАЦИЯ За получаване на степен доктор по ветеринарна медицина (д-р мед. Ветеринар) от Университета по ветеринарна медицина в Хановер. Представено от Silke Riedel (родена Franzbach) от Gronau Hannover 23
Научен надзор: Унив.-проф. Д-р М. Кицман 1-ви рецензент: Унив.-проф. Д-р М. Кицман 2-ри рецензент: Унив.-проф. Д-р H.C. Ден за устен преглед на рака: 27, 23 май
Посветен с благодарност на родителите и семейството ми
1 ВЪВЕДЕНИЕ 1 2 ОБЗОР НА ЛИТЕРАТУРАТА 2 2.1 Структура и функция на кожата 2 2.1.1 Епидермис 2 2.1.2 Дерма 5 2.1.3 Хиподерма 7 2.1.4 Придатъци 7 2.1.5 Съдова система на кожата 8 2.2 Трансдермално проникване, проникване и абсорбция 9 2.2. 1 Бариерна функция на кожата 9 2.2.2 Проникване в кожата и фармакокинетика на локално прилагани вещества 12 2.2.3 Влияние върху проникването 19 2.3 Модели за изследване на транскутанното проникване и проникване 22 2.3.1 In vivo модели 22 2.3.2 In vitro модели 23 2.3.2.1 Дифузионни клетки 23 2.3.2.2 Модел на проникване в Саарбрюкен 26 2.3.2.3 Клетъчни култури и изкуствена кожа 29 2.3.2.4 Модели на перфузия 3 2.4 Бензоена киселина, тестостерон и хидрокортизон като тестови вещества за трансдермално проникване и проникване 32 3 МАТЕРИАЛ И МЕТОДИ 35 3.1 Изпитвани материали 37 3.2.1 Бензоена киселина 37 3.2.2 Хидрокортизон 37 3.2.3 Тестостерон 38 3.3 Дифузионни клетки 38
3.4 Извършване на експеримента 39 3.5 Откриване на изпитваните вещества 4 3.5.1 Ензимен имуноанализ 4 3.5.2 Определяне на бензоена киселина чрез течна хроматография под високо налягане (HPLC) 41 3.6 Статистическа оценка 43 4 РЕЗУЛТАТИ 44 4.1 Проникване и проникване на бензоена киселина 44 4.1.1 Кожа на плъхове 44 4.1.2 Кожа на куче 45 4.1.3 Кожа на кон 46 4.1.4 Кожа на свине 46 4.1.5 Кожа на крава 49 4.2 Проникване и проникване на хидрокортизон 51 4.2.1 Кожа на плъхове 51 4.2.2 Кожа на кучета 52 4.2.3 Кожа на кон 53 4.2.4 Кожа на свине 54 4.2.5 Кожа на крава 55 4.3 Проникване на тестостерон и проникване 57 4.3.1 Кожа на плъхове 57 4.3.2 Кожа на кучета 58 4.3.3 Кожа на кон 59 4.3.4 Кожа на свине 6 4.3.5 Кожа на говеда 61 5 ДИСКУСИЯ 63 5.1 Сравнение на местата на кожата в животинския вид 63 5.1.1 Проникване на бензоена киселина 63 5.1.2 Проникване на хидрокортизон 64
5.1.3 Пропускливост на тестостерон 65 5.2 Сравнение на видовете животни въз основа на телесни региони 66 5.2.1 Проникване на бензоена киселина 66 5.2.2 Проникване на хидрокортизон 69 5.2.3 Проникване на тестостерон 7 5.3 Сравнение на изпитваните вещества Бензоена киселина, тестостерон и хидрокортизон 73 5.4 Заключение 76 ИЗПЪЛНЕНИЕ 8 6 9 ПРИЛОЖЕНИЕ ТАБЛИЦИ 99
Списък на съкращенията A. Arteria Фиг. Илюстрация cm сантиметри cm² квадратни сантиметри ELISA ензимно свързан имуносорбентен анализ g грама C градуса по Целзий h часа HPLC високоефективна течна хроматография i.v. интравенозно l литър ln логаритъм m мъжки mg милиграм min минута ml милилитър mm милиметър µg микрограм µl микролитър µm микрометър n брой опити ng нанограма s. вижте стр. раздел на страница. таблица V. Вена w женска
32 (BRONAUGH et al. 1982b) Куче 12-45 (SCHWARZ и MEYER 1994) 1-45 (CREED 1958) Кон 25-45 (MEYER 22) 3-9 (TALUKDAR et al. 1972) Свиня 34-47 (m ) (MEYER 1986) 41-57 (w) 7-14 (MEYER и NEURAND 1975) говеда
32 (MEYER 21) 4-6 (GOLDSBERRY and CALHOUN 1958) Rindereuter 5-8 (SEEGERS 23) 6-2 (LUDEWIG et al. 1996) Таблица 1: Дебелина на епидермиса на окосмената кожа при различни видове (данни в µm)
3 На следващите фигури (фиг. 1-6) епидермисът (кожата на корема) на животинските видове, изследвани в тази работа, е показан хистологично. 1 2 3 4 5 6 5 µm Фиг. 1-6: Епидермис (коремна кожа) на плъх (1), куче (2), кон (3), прасе (4), говеда (5) и кожа на вимето (6)