Санитарно-микробиологично изследване на оборудване, ръце и гащеризони на персонала
Бактериалното замърсяване се определя чрез изследване на микрофлората на тампони, направени от ръцете и повърхностите на изследваните обекти.
В зависимост от целите на изследването, измиванията определят:
1) общо бактериално замърсяване, изчислено на 1 cm 2 от изследваната площ;
3) наличието на златист стафилокок, земен псевдомонас и други патогенни микроби.
Изисквания за микробиологична чистота: не се допуска наличието на BGKP, Pseudomonas aeruginosa, Proteus, стафилококи в измиванията.
Избор на проби. Вземат се проби от работни маси, оборудване, ръце и гащеризони на персонала чрез промиване със стерилен памучен тампон.
Измиванията се вземат със стерилен памучен тампон или марлеви салфетки, с размери 5х5 см, стерилизирани в хартиени торбички или в чаши на Петри. За овлажняване на тампони и салфетки, 2 ml стерилен физиологичен разтвор се изсипват в стерилни епруветки. Салфетката се хваща със стерилна пинсета, навлажнена с физиологичен разтвор от епруветка, след избърсване на тестовия обект, поставен в същата епруветка.
При проверка на дребни предмети се измиват от повърхността на целия предмет. При проверка на обекти с голяма повърхност се правят измивания на няколко места на изследвания обект с площ приблизително 100-200 cm .
Измиванията от кожата на операционното поле и ръцете на хирурзите се правят със стерилни марлеви салфетки 5х5 см 2, потопени в неутрализиращ разтвор или във физиологичен разтвор. Ръцете на изпитвания се избърсват, започвайки от задната част на дланта, след това дланта, междупалтовите повърхности, нокътните легла и подгъбичните повърхности.
За определяне на общия брой на микробите в пробната промивка се добавят още 8 ml към 2 ml изотоничен разтвор на натриев хлорид, използван за овлажняване на тампона (или салфетката) и тампонът се измива старателно чрез разклащане със стъклени мъниста в продължение на 10 минути. Течността за измиване (1:10) се инокулира с метод на дълбочина, 0,5 ml на 2 чаши на Петри с MPA. Културите се инкубират при 37 ° С в продължение на 48 часа. След това се отчита броят на отглежданите колонии, като се преизчислява за 1 cm 2 от изследваната повърхност.
За определяне на BGKP сеитбата се извършва в обогатителната среда, за която тампон (марлена салфетка) се потапя в средата на Кеслер или 10-20% жлъчен бульон. След ден на инкубация при 37 ° C, субкултурата се извършва на среда Endo. След инкубация в термостат при 37 ° С в продължение на 18-24 часа, подозрителните колонии се микроскопират, субкултивират се в среда на Гис с глюкоза и се държат при 43 ° С в продължение на 24 часа.
За откриване на стафилококи засейте директно от тампона върху агар от жълтъчно-солена сол. Освен това като среда за съхранение се използват бульон с 6,5% натриев хлорид и бульон с 1% глюкоза, наляти 0,5 ml в епруветки, в които се инокулират 0,2-0,3 ml промивна течност. Инокулациите се инкубират при 37 ° С в продължение на 24 часа и след това се субкултивират върху плаки с FSA. Допълнителни изследвания се извършват съгласно общоприетия метод за откриване на стафилококи.
За идентифициране на Pseudomonas aeruginosa специални култури могат да бъдат пропуснати. Обикновено колонии от Pseudomonas aeruginosa могат да бъдат открити в кръвен агар или в среда Endo. Колониите, за които се подозира Pseudomonas aeruginosa, се субкултивират върху агарен наклон, съдържащ 2-5% глицерол или манитол. Колониите на Pseudomonas aeruginosa дават обилен растеж със зеленикав оттенък, мазна консистенция с характерна медена миризма на повърхността на агаровия наклон. Изолираната култура се оцветява по Грам, микроскопичните и хемолитичните свойства се определят чрез нанасяне върху плоча с кръвен агар.