Рурски университет, Бохум Проф

Рурски университет Бохум проф. Д-р мед. Ulrich Mittelkötter Място на работа: Катаринен - ​​болница Unna Отдел по обща и висцерална хирургия Ролята на c-jun N терминалните кинази (JNK1 и JNK2) в модела на ниски дози DSS колит Встъпителна дисертация за получаване на докторска степен по медицина от висш медицински факултет в Рур Университет в Бохум, представен от Елизабет Фрик от Орск/Оренбург 2009

бохум

Декан: проф. Д-р G. Muhr Лектор: проф. Д-р U. Mittelkötter Съ-рефер: проф. Д-р A. Tannapfel Устен ден на изпита: 3 декември 2009 г.

Посветен на моето семейство с благодарност

3.1.1 DAI оценка: JNK1 -/- срещу JNK1 +/+. 33 3.1.2 Оценка на DAI: JNK2 -/- срещу JNK2 +/+. 34 3.2 Резултат за повреда на криптата (CDS) - хистологична оценка. 35 3.2.1 Оценка на CDS: JNK1 -/- срещу JNK1 +/+. 35 3.2.2 Оценка на CDS: JNK2 -/- срещу JNK2 +/+. 36 3.2.3 Обобщение. 38 3.3 Оценки на имунофлуоресценцията. 39 3.3.1 CD8 израз във Villi: JNK2. 39 3.3.2 CD4 израз във Villi: JNK2. 41 4 Дискусия. 43 4.1 Инхибиране на JNK и други MAPK при терапия на IBD. 43 4.2 DSS колит като животински модел. 44 4.3 Обобщение на собствените резултати. 45 4.4 Анализ на собствените резултати на фона на текущи проучвания. 47 4.5 Резюме. 50 5 Библиография. 52 Благодарности CV 2

Списък на съкращенията Фиг. Фигура AK антитела AS аминокиселина ATP аденозин трифосфат Bcl-1 B-клетъчна левкемия/лимфом 1 или приблизително CARD каспаза домейн за набиране CD клъстер на диференциация CDS Crypt Damage Score CED възпалително заболяване на червата CU улцерозен колит CY2 карбоцианин CY3 Индокарбоцианинов d ден DAI Индекс на активност на заболяването DAPI 4, 6-диамино-2-фенилиндол дихидрохлорид DMD-пимелинова киселина D-глу-мезо-диамино-пимелинова киселина ДНК дезоксирибонуклеинова киселина DSS декстран натриев сулфат ELK1 транскрипционен фактор ERK извънклетъчен сигнал регулирана киназа и др. et alii g grams GALT чревна асоциирана лимфоидна тъкан G-CSF гранулоцитен колония стимулиращ фактор GM-CSF гранулоцит-макрофаг колония стимулиращ фактор GMO генетично модифицирани организми HE хематоксилин/еозин HLA човешки левкоцити антиген ICAM-1 междуклетъчна адхезия молекула IEZ IFN интерферон епителиф IFFE интерферон епители Ig имуноглобулин II интерлевкин IMAC интерстинални макрофаги iv интравенозно JIP JNK-взаимодействащ протеин JNK c-jun NH2 терминална киназа kda Kilodalton ko избива l литър LBP LPS-свързващ протеин LPS липополизахарид LRR левцин богати повторения M моларен (mol/l) 3

MAPK митоген активирана протеин киназа MC болест на Crohn MCP-1 моноцит хемо атрактант протеин 1 MHC основен комплекс за хистосъвместимост мин. Минута (и) милион MIP1 макрофаг възпалителен протеин ml милилитър NBD нуклеотиден свързващ домен NF-kB ядрен фактор-kb NK клетки естествени клетки-убийци NOD Нуклеотидно свързващ и олигомеризационен домейн PBS фосфатно буфериран физиологичен разтвор, фосфатен буфер PCR полимеразна верижна реакция PP Peyer плаки PRR рецептори за разпознаване на патогени РНК рибонуклеинова киселина RT стайна температура SAPK стрес-активирана протеин киназа SCID тежка комбинирана имунна недостатъчност SEM стандартна грешка на средния STAT-3 сигнален преобразувател и активатор на транскрипция TGF-бета трансформиращ растежен фактор бета Th 1/2 клетки T-помощни клетки TJ плътно свързване TLR тол-подобен рецептор TNBS тринитробензен сулфонова киселина TNF тумор некроза фактор U единици за една нощ vs. срещу vwf von Willeband фактор WT див тип напр. например µ micro 4

Списък на таблици Таблица 1: Преглед на някои животински модели на колит. 21 Таблица 2: Изчисляване на клиничния резултат от параметрите загуба на тегло, качество на изпражненията и кръв в изпражненията (модифициран от Cooper et al., 1993). 25 Таблица 3: Хистологичен резултат за увреждане на лигавицата (модифициран от Egger, 1997). 28 Таблица 4: Първични антитела. 31 Таблица 5: Вторични антитела. 31 5

Списък на фигури Фигура 1: Класическа структура на митоген-активирана протеинкиназа (MAPK) каскада [22]. 15 Фигура 2: Молекулярна структура на DSS. 20 Фигура 3: Снимки на червата. 26 Фигура 4: Индекс на активността на заболяването: JNK1 -/- vs. JNK1 +/+. 34 Фигура 5: Индекс на активност на заболяването: JNK2 -/- vs. JNK2 +/+. 35 Фигура 6: Оценка на оценката на щетите на криптата: JNK1 -/- vs. JNK1 +/+. 36 Фигура 7: Оценка на оценката на щетите на криптата: JNK2 -/- vs. JNK2 +/+. 37 Фигура 8: Представителни HE изображения от дисталното дебело черво. 38 Фигура 9: CD8 експресия във вили на дисталното дебело черво (JNK2). 40 Фигура 10: IF изображения за CD8 експресия в JNK2 в дисталното дебело черво. 40 Фигура 11: Експресия на CD4 във ворсите на дисталното дебело черво (JNK2). 41 Фигура 12: IF изображения за CD4 експресия в JNK2 в дисталното дебело черво. 42 6

Превключени последователно каскади от стъпки на фосфорилиране, които усилват отговора чрез прогресията на предаване (усилване на сигнала). Сред голямата група протеинкинази наскоро семейството от т. Нар. Митоген-активирани протеинкинази (MAPK) придоби особено значение [59, 66]. Те включват c-jun N-терминалната киназа (JNK) и p38 киназа. Фигура 1: Класическа структура на митоген-активирана протеинкиназа (MAPK) каскада [22]. JNK се активира от MKK4 и MKK7. Тези MAPKK от своя страна се активират от различни MAPKinase кинази кинази (MAPKKK), които от своя страна се стимулират от стимули като фактори на растежа и стреса. 15-ти