Първичен метастатичен първичен маточен миксосарком при зайци (доклад за патологичен случай)
(Случай на първичен маточен миксосарком с генерализирани метастази при заек. Патологичен доклад за случая
Обобщение. Авторите описват случай на първичен маточен миксосарком при 4-годишен труп от женски заек, с наднормено тегло и сив цвят, който е открит при патологично изследване. Злокачественият мезенхимен тумор се разви от лявата матка и направи паратуморални единични метастази в широкия лигамент на матката и отдалечени множество метастази във висцералния перитонеум и белите дробове. Хистопатологичното изследване както на първичните, така и на вторичните тумори показва повишена тумор-индуцирана неоангиогенеза, обширен кръвоизлив и некроза. При затлъстелия заек са наблюдавани тежки патологични некробиотични затлъстявания черен дроб, атрофия и липоматоза на панкреаса, освен това липонекроза в омента. Първичните и вторичните тумори показват позитивност към виментин и отрицателност към панцитокератин-, α-SMA-, клаудин-5. Индексът на етикетиране Ki-67 показва 18%. Авторите предполагат, че причините за дисеминираната интраваскуларна коагулопатия при заека са обширният кръвоизлив, некроза на туморите, индуцирана от тумора липонекроза на омента и кетоза.)
Миксосарком или миксоиден сарком е злокачествен тумор от мезенхимен произход, характеризиращ се с наличието на недиференцирани плеоморфни фибробласти и значително производство на извънклетъчен муцин (муцин). Хистопатологичните характеристики на тумора са звездовидни и вретеновидни туморни съединителнотъканни клетки, вградени в богата на слуз строма, образувайки хлабава клетъчна мрежа и характеризираща се с лек до умерен ядрен полиморфизъм (анизонуклеоза) и умерена митотична активност (22, 24, 25).
При зайци е докладван кожен миксосарком на врата, раменете, гърдите, корема и задните крайници от кожата (25), както и метастатичен миксосарком, причинен от онкогенен поксвирусоподобен вирус (6, 20, 21) и американски кухини ветеринарната литература подкожен миксосарком на лумбалния гръбначен мозък е описан при зайци (19).
В нашето изследване на случая миксосарком от матката и метастази в тялото е открит чрез хистопатологично и имунохистохимично изследване на смесен, сив, 4-годишен, нулипара женски домашен заек. Към днешна дата във ветеринарната литература е описан един хистологичен тип първичен тумор на матката при зайци (16).
Материал и метод
Медицинска история
Тя беше откарана мъртва в клиника за домашни любимци през септември 2011 г. от 4-годишен, сив, смесен женски заек. Според собственика животното е имало затруднения с дишането в дните преди да умре, не е яло и е загубило интерес към заобикалящата го среда. Заекът не е бил ваксиниран и не е бил бременна през целия си живот. Държали го сами в клетка, хранели го със заешка храна, ливадно сено, сух хляб и зеленчуци.
Трупът е транспортиран до Катедрата по патология и съдебна ветеринарна медицина на SZIE-ÁOTK за изследване.
Патологични и хистопатологични изследвания
При следкланичното изследване се вземат проби от различни органни лезии на трупа, които се съхраняват при стайна температура в продължение на 24 часа в 8% буфериран (PBS, pH 7,0) разтвор на формалдехид. Така получените проби от тъкани бяха адаптирани за по-нататъшна обработка с машина за подготовка на тъкан Shandon excesior. Автоматичната машина за подготовка на тъкани, по време на своята 14-часова програма, след 6-степенна възходяща серия алкохол (4х1 час, след това 2х1,5 часа) и 3-степенна възходяща серия ксилол (3х1 час) в 3 стъпки (3х80 минути) с парафин от 60 ºC (парафинов восък от гранули Shandon Histoplast) замърси пробите. Подготовката на тъканите беше последвана от вграждане на парафин. Секции с дебелина 3–4 μm бяха приготвени от конвенционални парафинови блокове и оцветени с хематоксилин и еозин с помощта на автоматизирана машина за оцветяване Shandon Varistain 24-4. Секциите бяха анализирани с помощта на светлинен микроскоп Nikon Optiphot-2.
Впоследствие, за имунохистохимични изследвания, срезовете бяха депарафинизирани два пъти в ксилол (2х10 минути), след това три пъти в алкохол (100%, 70% и 50% алкохол в продължение на 3x5 минути) и след това третирани с 1x PBS. измиване. Антигените се усвояват при висока температура в микровълнова печка (30 минути, 800 W), допълнена с целеви разтвор за извличане (DAKO; Glostrup, Дания, рН 6). Ендогенната пероксидазна активност се блокира с 0,3% H2O2 в метанол за 5 минути. За нашите експерименти бяха използвани следните антитела: антивиментин (миши моноклонални антитела, разреждане 1: 200), анти-α-гладкомускулен актин - α-SMA (миши моноклонални антитела, разреждане 1: 8000, Sigma, DAKO), антицитокератин AE1- AE3 (моноклонално мише антитяло), 1: 100 разреждане, DAKO), anti-Ki-67 (мишко моноклонално антитяло, 1: 100 разреждане, DAKO) и антиклаудин-5 (миши моноклонално антитяло, 1: 100 разреждане, Zymed Inc.) . Имунохистохимичните реакции бяха визуализирани с авидин-биотин имунопероксидазна система (DAKO LSAB2 Kit) и DAB (диаминобензидин) хромоген. Контрастното оцветяване беше извършено с хемалаун на Mayer. Бяха подготвени секции за отрицателен контрол без пропускане на първичните антитела.
При оценката на имунохистохимичните реакции, дегу маточният ангиоломиом е използван като външна положителна контрола за виментин, α-SMA, Ki-67 и клаудин-5 (7), съответно. холангиоцелуларен карцином от панцитокератин (8). Имунохистохимичните реакции се оценяват с помощта на светлинен микроскоп Nikon Optiphot-2 в 10 големи увеличения, произволно избрани зрителни полета. Въз основа на дела на туморните клетки, показващи положителен имунен отговор, беше използвана следната система за оценка: 0 (отрицателна) = 0–5%; 1 = 5-30%; 2 = 30-50%; 3 = Резултати