От детската клиника и детската амбулатория в Д-р

От детската клиника и детската амбулатория в Dr. Детска болница на фон Хаунер към университета „Лудвиг Максимилианс“ в Мюнхен Директор: професор мед. Д-р h.c. D. Reinhardt Сравнение на четири ELISA за IgA антитела срещу човешка тъканна трансглутаминаза и IgA и IgG анти-глиадинови антитела и потвърждаване на търговски тест за откриване на секреторни IgA антитела срещу човешка тъканна трансглутаминаза и глиадин в изпражненията на университета „Лудвиг Максимилианс“ в Мюнхен Изпратено от Вероника Дил от Мюнхен 2009 г.

детската

С одобрението на Медицинския факултет на университета в Мюнхен Репортер: проф. Д-р С. Колецко Съдокладчик: Прив. Доз. Дорит Неглер проф. Д-р Р. Захачол проф. Д-р Д-р h.c. Дитрих Зайдел Ко-супервизия от служителя на доктора: д-р М. Каплер Декан: проф. Д-р мед. Д-р h.c. M. Reiser, FACR, FRCR Ден на устния изпит: 03/12/2009

1 Съдържание 1. Въведение. 4 1.1 Основи на цьолиакия. 4 1.1.1. Определение. 4 1.1.2. Разпространение на целиакия. 1.1.3. Клинична картина. 1.1.4. Рискови групи. 5 1.2. История на цьолиакия. 6 1.2.1. Именуване. 6 1.2.2. Етиология и терапия. 6 1.2.3. Патофизиология и диагностика. 7 2. Цел на работата. 10 3. Материал и методи. 11 3.1. Уча дизайн. 11 3.1.1. Серология. 11 3.1.2. Председател. 12 3.2. Статистическа оценка. 12 3.2.1. Статистически основи. 13 3.2.2. Корелация на двойните измервания. 14 3.3. Колектив от пациенти. 14 3.3.1. Серология. 14 3.3.2. Председател. 14 3.4. Вземане на проби. 14 3.4.1. Биопсия. 14 3.4.2. Серология. 15 3.4.3. Председател. 15 3.5. Хистология. 15 3.6. Изпълнение на теста. 3.6.1. общи тестови принципи на разследванията. 3.6.2. Материал. 17 3.7. Описание на серологичните тестове. 3.7.1. Тест от сайта за обвързване. 3.7.2. Биомед тест. 3.7.3 Тест от Eurospital. 23.

3 3.7.4. Тест за фармация. 3.8. Тест на стол от компанията Immundiagnostik. 26 4. Резултати. 27 4.1. Определяне на антитела в серума. 27 4.1.1. Група пациенти. 27 4.1.2. Критерии за включване. 29 4.1.3. Възрастово разпределение. 30 4.1.4. Находки от хистологично изследване. 30 4.1.5. Резултати от тестовете. 31 4.1.6. Резултати от теста в сравнение. 38 4.2. Определяне на антитела в изпражненията. 45 4.2.1. Група пациенти. 45 4.2.2. Възрастово разпределение. 46 4.2.3. Резултат от тест. 47 4.2.3.1. Резултати от ретроспективното проучване. 47 4.2.3.2. Резултати от проспективното проучване. 50 5. Дискусия. 53 5.1. Серология. 53 5.1.1. Група пациенти. 53 5.1.2. Възрастово разпределение. 56 5.1.3. Дефицит на IgA. 57 5.1.4. Методологични проблеми при провеждане на теста. 58 5.1.5. Резултати. 59 5.1.6. Дискусия на отделните производители. 61 5.1.7. Променливост в рамките на теста. 66 5.1.8. Променливост между теста. 67 5.2. Председател. 68 5.2.1. Пациентска група. 68 5.2.2. Вземане и обработка на проби. 68 5.2.3. Резултати. 69 6. Заключение. 71 6.1. Серология. 71 6.2. Изследване на изпражненията. 71 7. Резюме. 72

3 7.1. Въведение. 72 7.2. Методи. 72 7.3. Резултати. 73 7.3.1. Резултати от серологията. 73 7.3.2. Резултати от изследването на изпражненията. 73 7.4. Заключения. 73 8. Приложение. 75 8.1. Библиография. 75 8.2. Списък на съкращенията. 89 8.3. Денят на благодарността. 8.4. Продължи. 91

18 Bindazyme Human Anti Gliadin IgA EIA Kit, The Binding Site, Birmingham, England Bindazyme Human Anti Gliadin IgG EIA Kit, The Binding Site, Birmingham, England Bindazyme Human Anti Tissue Transglutaminase EIA Kit, The Binding Site, Birmingham, England Monkey Esophagus IFA Kit, The Binding Site, Бирмингам, Англия Автоматична миячка за микротитърни плочи Четец на микротитърни плочи (405 и 450 nm) флуоресцентен микроскоп с 495 nm възбуждащ филтър и 515 nm бариерен филтър Прецизни пипети 10 µl, 50 µl, 100 µl, 1000 µl 3.6.2.2. Изследване на изпражненията httg siga ELISA, компания Immundiagnostik AG, Bensheim, Германия Gliadin siga ELISA, компания Immundiagnostik AG, Bensheim, Германия Смесител Vortex Микротитър четец на плочи с филтър 450 nm Микротитър шейкър Центрофуга, 3000 пъти g Прецизни пипети с променливи обеми от 10-1000 µl стандартни

21 Резултат и гранична стойност Таблица 3: Гранични стойности на ЕМА, използвани от нас като част от анализа на резултатите (въз основа на гранични стойности, използвани в други проучвания) ЕМА отрицателна 15 - 15 - 15 - 40 U/ml Таблица 6: Посочена от производителя (Biomed) Гранична стойност за ендомизиев IgA Endomysium IgA отрицателна сива зона положителна 25 U/ml> 25 - 4U/ml Таблица 8: Гранична стойност за глиадин IgA отрицателна сива зона положителна IgA глиадин 1,5 U/ml таблица 9: От производителя (Eurospital) определена гранична стойност за httg IgA трансглутаминаза IgA отрицателно положително 100U/ml се разрежда 1: 1001 с пробен буфер (два етапа на разреждане) и се измерва отново. Резултат и гранична стойност Таблица 10: Гранична стойност за глиадин IgA/IgG и трансглутаминаза, дадени от производителя (Pharmacia) Глиадин IgA Глиадин IgG Трансглутаминаза Отрицателни 17 U/ml> 17 U/ml> 8 U/ml Дадените тук за оценка на ttg измерванията Нормалните стойности бяха определени въз основа на клинично проучване на A. Bürgin-Wolff и F. Hadziselimovic, Лаборатория за диагностика на целиакия, CH-4410 Liestal, Швейцария.