Определяне на хемоглобина в урината
Ако има голямо количество кръв в урината, те говорят за макрогематурия, малка примес от кръв - микрогематурия, се определя чрез микроскопско изследване - еритроцитите се намират в утайката - или с помощта на химични методи.
Хемоглобинът се открива с помощта на реакции:
- с гваякова киселина;
- с амидопирин;
- с бензидин;
- за експресен анализ се използват реактивни таблетки или тест ленти, произведени от различни компании.
Принцип на метода: хемоглобинът в кисела среда катализира реакцията на взаимодействие на водороден пероксид с някои съединения (гуаякова киселина, амидопирин, бензидин), в резултат на което се получават цветни съединения: с гуанова киселина - синьо, с амидопирин - виолетово, с бензидин - синьо.
Приготвяне на проби от урина: 1) изследвайте прясно събраната и добре разклатена урина в абсолютно чист контейнер: в стояща урина хемоглобинът се превръща в метхемоглобин, който няма способността да пренася кислород, което може да доведе до фалшиво отрицателни резултати; 2) концентрирайте хемоглобина и освободете урината от някои сродни вещества (миоглобин, хром, мед, йодид и калиев бромид), които дават подобен резултат на реакцията, за това изсипете 8-10 ml нефилтрирана урина в епруветка, добавете 2 мл ледена оцетна киселина и 4- 5 мл диетилов етер; съдържанието на епруветката се разклаща и се оставя в решетка за няколко минути, за да се отдели етилацетатният екстракт, в който преминава хемоглобинът; горният слой (екстракт от оцетен етер) се използва за провеждане на реакции.
Тест с гуаякова киселина
Реактиви: 1) Прясно приготвен наситен разтвор на гваякова киселина: в епруветка се добавя щипка гваякова киселина, добавят се 2–4 ml 96% етанол и се разтваря до оцветяване на силния чай; в реакцията се използва разтвор без утайка; 2) 3% разтвор на водороден прекис: добавете 27 части дестилирана вода към 3 части пресен перхидрол; разтворът се приготвя непосредствено преди употреба.