Нови подходи за диагностика на асоциирани инфекции при пилета, Основният портал на фермата - всичко за

С. Федотов, М. Черных, Е. Капитонов, Алтай GAU

Проблемът с диагностиката на асоциирани инфекции в индустриалното птицевъдство придоби особено значение­значение поради промяна във формата на инфекциозна патология и появата на екзотични заболявания.

През последните години се наблюдава увеличение на специфичното­тегло на инфекциите, причинени от асоциации на опортюнистични микроорганизми. Те се характеризират с подчертан клиничен полиморфизъм, асоцииран­ним с едновременно действие на няколко агента­com, което усложнява интерпретацията на лабораторните резултати­изследвания, тъй като всеки от­смесените култури имат редица характеристики, комбиниращи­които могат да определят патогенния потенциал на патогените като цяло.

Установено е, че подобни заболявания ви пречат­феноменът на основния етиологичен агент, причинявам­инфекциозен процес и затрудняват извършването му­етиотропна анти-инфекциозна терапия. Така­структурата на самите микрофони не е напълно дешифрирана­роботизирани асоциации, ролята на някои компоненти на микроорганизмите в тяхното пряко или косвено влияние върху тялото на птицата не е достатъчно идентифицирана.

В същото време междубактериалните взаимодействия като един от механизмите за образуване на асоциации на микроорганизми и проява на техните патогенни свойства са недостатъчно проучени поради несъвършенство­набор от диагностични методи.

Анализирайки биохимичните промени в кръвта на клинично болна птица, данните от патологичната и анатомичната аутопсия и резултатите от морфологичните изследвания, може да се предположи, че естеството на патоморфологичните промени в структурата на фоликула­kulov на яйчника показва подчертан цитотоксичен ефект на инфекциозния агент. Гледане­Xia увеличава лимфоцитната инфилтрация на фоликулите­куларни и текални мембрани, увеличаване на броя­състояние на кръвни клетки и базофили на тъканите.

При пилета с патологични и анатомични признаци се нарушава­Ликулитният яйчник е бил замърсен със стафилококи, ешерихия коли, стрептококи и протеи през всички периоди на наблюдение. Максималният брой на такива птици е установен през периода на активно производство на яйца. Микрофлората е била предимно под формата на асоциации­докато организмите са по-видни­болести с ниска вирулентност като Staphylococcus aureus и хемолитични щамове на Escherichia.

Така че, от яйчниковите фоликули на пилета на възраст 150-250 дни, стафилококите се отбелязват по-често от други микро­организми - в 56 случая (63,64%). Включително от ки­с цервикална пръчка - през 14 (15,92%); с Е. coli­коя и стрептококи - в 8 (9,09%); със стрептококи - в 1 (1,14%); с Протей - в 7 (7,95%); с протея и червата­пръчка - в 4 (4,55%) и 22 (25,0%) - под формата на мо­некултури.

Ешерихия коли също се характеризира с висока степен на сеитба (42,05% от случаите), особено от сто­филококи (15,92% от случаите). Броят на птиците, които­изолиран е рояк от фоликулно съдържание­coli със стрептококи възлиза на 3 (3,41%) глави. При 2 (2,27%) случая се наблюдава при Proteus, при 8 (9,09%) - при стафилококи и стрептококи­коки, в 10 (11,36%) - под формата на монокултури.

В повечето случаи стрептококи и протеини­задържане на фоликули под формата на монокултури изолирани­само от трупния материал на възрастни пилета и сто­филококи и ешерихия коли бяха засяти и от труда­pov и насилствено убита птица.

В микробиологичната диагностика на репродуктивната­органи при клинично здрави пилета стафилококи­Ки, ентерококи и др. Не се засяват. Фоликули на тестисите­прякорите бяха с кръгла форма с различни размери. Съдържанието им е жълто на цвят, а консистенцията е със средна плътност.

Заболяванията на яйчниците при домашните птици имат полимикробни­етиология, водещата роля в която принадлежи предимно на опортюнистични микроорганизми­особено в асоциациите на факултативна анаеробна и анаеробна микрофлора. Нашите данни се потвърждават­са експериментите на Batra C.L., Singh B., Crewal C.S., SodhiS.S. (1982).

Микробиологичните проучвания показват, че в птицефермите е възможно да се установи разпространението на стафилококови щамове от следните видове: St. ауреус (72,7%), Св. saprophyticus (13,6%) и St. epidermidis (13,6%). При по-нататъшно въвеждане на St. aureus са идентифицирали различни биологични варианти­Вие. И така, от пилета с клиника за фоликулит на яйчниците­бяха използвани biovars hominis, gallinae и A/B. В допълнение към тях, биоварът C/D се засява в птицефермата на Павловская, а канисът се засява в Молодежната. Въпреки това се наблюдава на­отрицателна корелация между биологични варианти на стафилококи от вида St. aureus, изолиран в двете птицеферми (r = 0,79).

В резултат на серологично типизиране на 78 ентеропатогенни култури, 87% от тях са назначени за серовари: 01, 02, 078, 09, 055, OIII и OI4I. В същото време ние приписваме 65,5% от културите на серотип 02, 3,3% на 078, 11,6% на 01, 11,6% на 09, OIII, OI4I, една култура на Е. coli на 055 и 2 култури на 055.­обиколки. По този начин културите са най-широко разпространени и вирулентни за лабораторните животни.­обиколки escherichy serovarov 01, 02, 078.

В процеса на изследване са идентифицирани три групи стрептококи: b-хемолитични (Str. Hemolyticus), причиняващи хемолиза на еритроцитите; а-зелен (STR. viridans), образуващ зелена зона на хемометаморфоза около колониите; нехемолитични стрептококи (Str. anhemolyticus), които не променят еритроцитите и не причиняват хемолиза на кръвен агар. От 32 стрептококови култури, изолирани в динамиката на пилешката болест, 14 са патогенни за белите мишки, което е 39,64%.

Изучаване на морфологичните и културно-биохимичните свойства на бактериите от рода Proteus, изолирани­от засегнатите фоликули бяха набрани. Протей, който разгражда глюкозата (K + G +) и захарозата, от­пренася се до вида мирабилис (Proteus mirabilis) и веднъж­изоставаща глюкоза (K + G +), захароза и малтоза - до вулгарни (Proteus vulgaris). Микробите от тази група се характеризират с висока степен на патогенност: 14 (57,33%) от 27 култури са патогенни за бели мишки.

Обобщаване на получените резултати, микробиологично­от техните проучвания отбелязваме, че стафилококите са изолирани от засегнатия яйчник, представени от Св. ауреус, Св. saprophyticus и St. epidermidis и E. coli като серовари 01, 02, 078. Strepto­коки и Protei vulgaris.

Получените резултати се потвърждават от изследвания­проучвания на Датския институт по болестите по птиците (Bisgaard M., Dam A., 1981). Те разкриха смесена микрофлора от засегнатите генитални органи на пилета в 16 случая (11%), докато неспецифичен растеж - в 3. За­открити 19 различни О-групи на Е. coli, най-често срещаният серотип 02.

Микробиологичното изследване на ембриони (1 проба - 5 ембриони на възраст 21 дни) разкрива 17 проби от Е. coli; 1 3 - Св. ауреус и Е. coli; 6 - Св. ауреус; 6 - Св. ауреус, Citrobacter frendi и Е. coli; 9 - Citrobacter frendi и E. coli.

Традиционно използвани таксономични методи­Идентифицирането на патогенни микроорганизми в птицефермите в Алтайски край се основава на използването на­различни хемотаксономични тестове, като специфична ензимна активност, способност за метаболизиране на захар или поддържане­растеж върху среди със селективни добавки.

Трудността при стандартизиране на условията на такъв тест­tov, както и естествената фенотипна променлива­присъщи на много микроорганизми, могат да причинят погрешно идентифициране.

До голяма степен бактериолозите продължават да­висят от морфологични и биохимични критерии­ev при определяне на микроорганизми, изолирани от патологичен материал и обекти в околната среда­заобикаляща среда.

В някои случаи идентификация и класификация­патогенни микроорганизми не отговарят на искането­самостоятелна ветеринарна практика. Това се дължи на присъствието­редица обстоятелства; основно: незадоволително­най-експресия на фенотипни признаци, предимно фактори на патогенност в бактериите при различни условия на тяхното отглеждане; съществуването на некултивирани бактерии; способност повече от 20 wi­патогенните бактерии преминават в състояние на­коя, характеризираща се с рязко намален метаболизъм­умствена дейност и временна загуба на способността за възпроизвеждане; наличието на генетичен механизъм, който постоянно променя антигенните детерминанти в организма гостоприемник, което, от една страна­ни, помага на патогена да оцелее в макроорганизма­аз, избягвайки влиянието на имунния отговор на гостоприемника, и от друга страна, води до лабораторни неуспехи­диагностика с използване на сероимунологични методи.

Трябва да се признае, че в лабораторната практика,­има естествени ограничения при използване­разработването на фенотипни методи за оценка на лекарствата­устойчивост на патогени, свързани с­фракции.

Дисково-дифузионен метод за определяне на чувствителността­резистентността към антимикробни лекарства е до­ветеринарен лекар на практика­лаборатории на територията на Алтай.

Основното му предимство е простота в изпълнение и икономическа наличност. Досега той остава предпочитаният избор за повечето лаборатории.­раториум.

В същото време неговите недостатъци са очевидни: методът на is­използва се при определяне на чувствителността към анти­биотика на ограничен брой микроорганизми; неизползваем е, ако микробът не се образува на повърхността­агар среден или хомогенен­морава с определена плътност или оформена морава­след 24-часова инкубация на бактерии и­bov - след 48 часа.

За изпълнението на метода е подходящ тесен кръг от пита.­среди, често не предназначени за отглеждане­този на взискателните микроорганизми. Зона за хранене­растежът на един микроб не винаги е адекватен на неговата истина­липса на чувствителност към антимикробна среда­стам и др.

В допълнение, резултатите от хемотаксономичните тестове могат да бъдат изкривени поради намаленото­активността на антимикробните лекарства в­дългосрочно отглеждане на микроорганизми­следователно низмът не е основата за оценка на тяхната чувствителност.

От представените примери се вижда, че ап­сенале модерни бактериологични лаборатории­птицеферми ratorii трябва да бъдат методи, поз­желаещи да се идентифицират, класифицират­за разграничаване и разграничаване на патогенни микроорганизми­ганизми, независимо от формата или състоянието.

В допълнение към традиционните начини за определяне­видовете, принадлежащи към причинителите­на свързаните инфекции, трябва да се обърне внимание на техните геномни характеристики. Това е особено важно за онези микроорганизми, които­които претърпяват адаптивни промени под въздействието на неблагоприятни фактори на околната среда, антибактериална терапия, при контакт с болни домашни птици и продукти от птици­лидерство.

Методите за индикация на микроорганизми трябва да съчетават скорост, специфичност, да имат мултиплекс функция и да съответстват на съвременното ниво на лабораторно развитие.

Днес те включват PCR и секвениране на чувствителността и специфичността, които са по-добри от всички хемотаксономични методи, които съществуват до момента, тъй като­ku идентифицират гени (нуклеинови киселини)­деца, а не антигени и антитела.

Използването на PCR диагностика за идентифициране на източника на появата на фокуса на инфекцията, идентифициране­изследване и изследване на причинителите на инфекциозни заболявания (асоциирани инфекции), както при тези­епизоотични и междуепизоотични­период ще ви позволи да наблюдавате промените в генетичните­структура на микроорганизмите, предсказват появата на нови варианти и създават адекватни­нови средства за защита и диагностични препарати­Вие. Освен това ви позволява да дефинирате на­присъствието на патогена през периода на т. нар. "серологичен прозорец", т.е. в интервала между момента на заразяване на организма и появата на антитела в количества, достатъчни за определяне.

PCR методът има няколко предимства пред хемотаксономичните методи. Към днешна дата материалната база за нейното успешно приложение е достатъчно развита. Всички нейни компоненти­(инструменти, комплекти за екстракция на ДНК, ензими и др.) са широко достъпни на пазара и стават достъпни. Въвеждането му ще позволи по-ефективно лечение и профилактика на заболявания, причинени от асо­причинени от инфекции.