Молекулярно-генетични методи
Молекулярно-генетичните методи (ДНК диагностични методи) са голяма и разнообразна група от методи, предназначени да открият вариации в структурата на изследваната ДНК област. ДНК методите се използват в следните области:
1. За диагностика на моногенни и многофакторни наследствени заболявания.
2. За пренатална диагностика на моногенни заболявания или фетален секс (в случаите на X-свързано наследство).
3. В съдебната медицина за лична идентификация (геномни пръстови отпечатъци) и установяване на отношения.
4. За диагностика на инфекциозни заболявания.
5. За диагностика на рак.
Диагностичните възможности са свързани с изпълнението на програмата за човешкия геном. Списъкът на моногенните заболявания, диагностицирани чрез молекулярни методи и достъпни за пренатална диагностика: муковисцидоза, мускулна дистрофия на Дюшен-Бекер, хемофилия (А и В), фенилкетонурия, болест на Хънтър (мукополизахаридоза), адрено-генитален синдром, хорея на Хънтингтън, синдром на крехък X д-р.
През 1993 г. имаше 130 такива заболявания, през 1994 г. - 600, сега са дори повече. Вече е възможно да се диагностицира всяко наследствено заболяване, чийто ген е картографиран и достъпен за директна или индиректна диагностика.
В бъдеще ще може да се говори за „генетичен паспорт на новородени“, тоест, че скоро след раждането, с помощта на автоматизирана система, ще бъде възможно да се анализира целия спектър на най-често срещаните заболявания, както моногенни, така и многофакторна.
Молекулярно-генетичните методи могат да бъдат разделени на директни и индиректни.
Директна диагноза извършва се в случаите, когато структурата на гена вече е проучена. Включва ДНК секвениране, регистрация на промени в електрофоретичната подвижност на мутантни ДНК молекули, транслация на протеинов продукт in vitro и др. Непряко откриване на мутацииизползва се в случаите, когато структурата на гена не е известна и в същото време има информация за други структури, разположени в близост до гена - определяне на полиморфизма на дължините на рестрикционни фрагменти и др.
Нека разгледаме някои от тях.
ДНК секвениране - това е най-точният метод, тъй като ви позволява да определите структурата на гена и да идентифицирате всяка мутация. Техниките за секвениране са много трудоемки, изискват значителни инвестиции на материали и време и следователно не са намерили широко приложение в клиничната генетика, но се използват главно за дешифриране на човешкия геном.