Микробиологична диагностика на антракс
Основният източник на инфекция са болни тревопасни животни, от които човек се заразява чрез пряк контакт, алиментарен, аерогенен или трансмисивен път. Най-често кожната форма на инфекция възниква с образуването на характерен антракс карбункул под формата на въглища (антракс), по-рядко - чревни, белодробни, септични форми. Методите за микробиологична диагностика на антракс са отразени в схема 6.
Схема 6. Микробиологична диагностика на антракс
Микроскопски метод.Тампоните от тестовия материал се оцветяват по Gram, Romanovsky-Giemsa, Rebiter (капсула), както и луминесцентен антракс серум. Откриване на големи грам-положителни ба, заобиколени от капсула в препаратицилиндри под формата на вериги позволяваспособността за поставяне на предварителна диагноза на антракс (фиг. 11 а). Като експресен диагностичен метод се използва RIF, с помощта на който се идентифицират характерни антраксни бацили под формата на пръчици със светещо жълтозеленият ръб (фиг. 11 б.).
Бактериологичен метод -инокулация на тестовия материал върху МРА, кръвен агар в чашки на Петри или PLET-арап с полимиксин В, лизозим, етилен диаминотетраацетат (EDTA) и талиев ацетат. Замърсен партньорриал от външната среда, от животни, от стари трупове се загрява предварително при 63 ° C за 15 минути, за да унищожи вегетативните форми на микроорганизмитенизми. Реколтата се поставя в термостат за един ден. След 20-24 часа инкубация на посевите при 37 ° C върху МРА, характерни груби колонии под формата на "медена глава"zy ", чиито ръбове при ниско увеличение на микроскопа имат вид на къдрави къдрици или„ лъвска грива "- фиг. 12. В бульона е типично задънен растеж, наподобяващ памук, докато околната среда оставапрозрачен. От утайката се правят цитонамазка и препарат за окачена капка. В цитонамазка, без капсули грам-положителни стрептобацили (rasпозиция под формата на дълги вериги под формата на "бамбукова пръчка"). За разлика от други почвени бацили, патогенът на антракс е неподвижен. За издаванеЗа чиста култура типичните колонии се субкултивират приshenny MPA.
Образуването на капсули може да бъде открито чрез биоанализ или чрез инокулация в бульон на Hottinger, върху специална среда, съдържаща разтвор на Hanks и 40% стерилен говежди серум, MPA с 0,7% натриев бикарбонат, среда Buza (3% гладен агар с 15% дефибринирана овча кръв), както и в дефибринирана конска кръв. Културите се отглеждат в продължение на 18-24 часа при температура 37 0 C в атмосфера от 5-7% CO2.
А б
Фигура: 11. Причинителят на антракс (Bacillus anthracis). a - оцветяване по Грам, b - RIF. x630
Фигура: 12. Колония Bacillus anthracis. x56
Идентификацията е подчертанаКултура на Ной Bacillus anthracis (3-ти ден от изследването) и диференцирането му от подобни непатогенни бацили се извършва чрез засяване с инжекция в желатин (втечняване под формата на рибена кост, обърната с главата надолу), изследване на биохимичните свойства, фаголизирането и инфекцията на животните . Чувствителността на културата къмтибиотици.
Един от характерните признаци на патогена на антракса е тестът "перлена огърлица". На повърхността на МРА в чашка на Петри с 0,5 и 0,05 U/ml пеницилин се инокулират 3 часабульонна култура на изолирания микроорганизъм, след 3 часа инкубация при 37 ° С се приготвят цитонамазки, в които се намират "перлени огърлици" под формата на заоблени стрептобацили от антракс под микроскопия. Почва баcilli запазват формата на пръчки, подредени във вериги.
Биологичните свойства на причинителя на антракс и подобни бацили са отразени в табл. 7.