МЕХАНИЗМИ И МОДАЛИТИ НА ТЕЧНА ХРОМАТОГРАФИЯ

6-ТЕЧНА ХРОМАТОГРАФИЯ/МЕХАНИЗМИ И МОДАЛИТЕТИ

Хроматографът се състои от няколко части. Централният елемент е представен от колоната, която извършва разделянето на различните съединения. Този жизненоважен елемент обаче представлява само 1 до 2% от цената на цялата система.

Тази система включва:

- нагоре по течението 1 или повече помпи и инжектор
- надолу по течението 1 или повече детектори (универсални или специфични)

Следователно има много варианти, адаптирани към нуждите (или бюджета) на потребителите:

- така наречените системи изократичен или напротив способни да се образуват градиенти разтворители (това ще бъде обсъдено по-късно)
- много променливи детектори, повече или по-малко чувствителни, повече или по-малко специфични, повече или по-малко сложни. В тази област изборът е много широк, но всъщност повечето потребители имат UV детектори или спектрофотометри (UV или UV-VIS). Сред усъвършенстваните детектори можем да си спомним:

+ диодни детектори (непрекъснато измерване на дължина на вълната)
+ детектори за радиоактивност с непрекъснат поток
+ мас спектрометри, ЯМР спектрометри

Детектор

използване

Граница на откриване

Линейност

Рефрактометър

Около 700 ng/ml

UV фиксиран (254 nm)

Около 0,3 ng/ml

Спектро UV-VIS

Около 0,3 ng/ml

Около 0,008 ng/ml

Електрохимични

Около 0,001 ng/ml

Кондуктиметрична

Селективни (йони)

До 0,2% разлика
проводимост между 2 вещества

Реактор след колона

вижте UV или флуоресценция

Мас спектрометър

Варира по състав

Радиоактивност

Метаболитни анализи

Варира според изотопите

Областите на приложение на течната хроматография са много разнообразни и тази техника представлява много широко използван инструмент, който се използва за разделяне на минерални йони, малки органични молекули, както и на макромолекули (протеини, полинуклеотиди, органични полимери). Има един или повече подходящи хроматографски режими за всяка категория вещества. Всеки трябва да реши кой от тях е най-подходящ за работата, която иска да свърши !

Всъщност има прости общи правила, които позволяват обоснован избор на подходящия хроматографски режим; те се основават на параметри като размер, полярност и заряд на съединенията, които ще бъдат анализирани.