Клетъчна терапия за сърдечна недостатъчност при двойна торакотомия на плъхове за миокарден инфаркт и
Обобщение
Имплантирането на биотрансплантат за лечение на миокарден инфаркт, индуциран от LAD лигиране в модел на гризачи, е класически необходимо и за двете операции на отворено сърце. За да се намали смъртността и да се осигурят оптимални условия за свързване на твърди и свързани с клетки желатинови биоматериали, са разработени минимално инвазивни процедури.
Резюме
Въведение
Лигирането на лявата предна низходяща коронарна артерия (DAL) е златен стандарт за ИМ при модели с малки животни, което води до трансмурален инфаркт и зрял белег. Клетъчната терапия, прилагана в хроничната фаза на ИМ, изисква втора хирургическа интервенция. Обикновено се извършва стернотомия на средната линия, за да се позволи интрамиокардно инжектиране на клетъчна имплантация или епикардни биографти. Тези инвазивни хирургични процедури увеличават процента на следоперативна смъртност, време за възстановяване, болка и риск от инфекция. Представеният тук минимално инвазивен подход не само предотвратява такова пристрастие, но също така осигурява оптимална достъпност на сърцето за прилагане на лечение. ИМ и епикардиална имплантация на клетки, свързани с гел-подобна биоматрица, се извършват на биещо сърце чрез лява междуребрена торакотомия.
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Протокол
ЗАБЕЛЕЖКА: Lewis мъжки и женски плъхове, 200-220 g бяха настанени при стандартни лабораторни условия (12 h светъл и тъмен цикъл, вода ad libitum и храна, клетка IVC). Всички животни бяха третирани в съответствие с препоръките на FELASA и швейцарския закон за защита на животните.
1 Подготовка на клетки: Изолация на мезенхимни стволови клетки от костния мозък
2 Първа торакотомия и LAD лигиране
3. Пикардно приложение на лечение чрез второ торакотомично лечение
Необходим е абонамент. Моля, препоръчайте JoVE на вашия библиотекар.
Представителни резултати
Всички животни са се възстановили в рамките на 1 час след торакотомия. Раните зараснаха бързо. Не се наблюдава инфекция или оток.
Двойната лява торакотомия позволява оптимален достъп до сърцето (Фигура 1). Болката и следоперативната смъртност са ниски. Животното бързо се възстанови от операцията и напълня (фигура 2). Процентът на преживяемост на Kaplan Meir е бил 96% за първата торакотомия. Четири плъха над 104 умират при следващото приложение на 24-часово лечение от втора торакотомия. Процентът на преживяемост на Kaplan-Meir варира от 100%, когато животното е получило втора торакотомия, но без лечение (фалшиво), 96% от MSC и фибринова лепилна група или 86%, когато животното е получило MSC директно инжектирано в миокарда (фигура 3).
Ехокардиографска оценка в режим М, извършена 2 седмици след LAD лигиране, показва намаляване на съкращаващата фракция (FS) от 44 ± 3% на 22 ± 4%. Представянето на честотата на FS, регистрирано при 104 животни две седмици след LAD лигиране, е доказателство за повторяемостта на метода (Фигура 4). Коефициентът на вариация (CV) е 17%. В допълнение, ехокардиографията, извършена на 2 и 6 седмици след LAD лигиране, показва прогресия до сърдечна недостатъчност, предполагана от намалена фракция на изтласкване (EF) и увеличен обем на LV в диастола и систола. (фигури 4 и 5). Развитието на трансмурален инфаркт в фалшиво оперираната група е потвърдено от оцветяване на напречни сечения на сърцето на Goldner (Фигура 6).
