Изборът на ембриона

Ембрионална култура

изборът
Ембрионите се култивират в малки капки (20m l) от културен център депозиран в дъното на a Чаша Петри и покрити с масло, за да се предотврати изпаряването, да се ограничи обмяната на газ и да се предпази от замърсяване. Кутиите се съхраняват в инкубатор чиято температура е зададена на 37 ° C и чийто въздух е обогатен с CO2 (5%). За да не ги безпокоите, наблюдението на ембриони под микроскоп е ограничено до строгия минимум. Когато ембрионите трябва да бъдат преместени или променени в околната среда, те се обработват с помощта на много фина стъклена пипета (размерът на ембрион е около една десета от милиметъра) под a бинокулярна лупа оборудвани с a гореща чиния, в стерилна среда.

В края на 48 часа инкубация външният вид на оплодената яйцеклетка вече е съвсем различен. Състои се от няколко клетки и е заобиколен от a плик, наречен zona pellucida.

Това вече е ембрион, който може да бъде прехвърлен в майчината матка. Ендометриумът (вътрешната обвивка на матката) се е подготвил за възможен ембрион.

В края на оплождането, яйцето се разделя на 2 клетки, след това 4, след това 8 и т.н.. След седмица ще има около 200 клетки. След това тези клетъчни деления ще продължат, осигурявайки хиляди клетки, които ще се комбинират, за да образуват очертанията на бъдещите органи.

Всички тези етапи, от ден 1 (2 клетки) до месец 2, се наричат ​​ембрион. Впоследствие говорим за плод, при който постепенно предишните очертания се трансформират в крайни органи (милиарди клетки).

StatusWhenRepresentationPhoto
Зигота (оплоден ооцит)24 часа след оплождането
2 клетки30 часа след оплождането
4 клетки40 часа след оплождането
8 клетки60 часа след оплождането
Морула96 часа след оплождането
Бластоцист5 дни след оплождането

На практика при IVF това са първите наблюдавани ембрионални стадии: 2 дни след присъствието на гаметите това са етапи със средно 4 клетки.

Но културата може да бъде удължена до максимум 7 дни до стадия на бластоциста.

След 2 дни при 20% от опитите няма ембрион.

След 7 дни, при 35 до 40% от опитите, няма бластоциста.

Причините за ембрионалната нежизнеспособност са:

• наличие на някакви хромозомни аномалии,

• зрелостта на ооцитите, които са ги осигурили,

• може би качеството на спермата.

Система за класификация на ембриони по D2

Много несъвършено, след 2 дни култивиране, с оглед на морфологичния им вид, могат да бъдат идентифицирани ембрионите от незрели яйцеклетки. На този етап е доста променливо и можем да го опишем без да се увреждат клетките: брой, размер, форма, външен вид на клетките, външен вид на обвивките, zona pellucida и кумулусния облак, тяхната фрагментация и др.

Морфологията на ембриона върху D2 е най-използваният параметър повече от 25 години.

Успяхме да дефинираме „идеален“ ембрион и различни варианти, които са повече или по-малко отдалечени от него; и можем грубо да ги класифицираме според резултати:

Резултат, използван в лабораторията Eylau La Muette

1-ва цифра: броят на клетките

На 48 часа ембрионът обикновено има 4 клетки, други ще имат 2,3 или 5.

Оценката е тази на брой клетки: 4 клетки на 48 часа, 8 клетки на 72 часа ...

2-ра фигура: клетъчна редовност

Например, клетките (бластомери) на 4-клетъчния ембрион трябва да бъдат идентичен размер.

Оценката е 1 за типичен ембрион и 2 за нетипиченд. Буквата Т се използва също за Типично, а буквата А за Нетипично.

3-та цифра: степента на фрагментация

По време на клетъчното деление могат да се образуват фрагменти (малки парчета клетки). Когато ембрионът има над 50% фрагментация, шансовете му за развитие и имплантиране намаляват.

1: Степен на фрагментация от по-малко от 10%

2: степен на фрагментация между 10% и 50%

3: степен на фрагментация между 50% и 80%

4: степен на фрагментация над 80%

По този начин, ембрион ототлично качество, обикновени клетъчни и нефрагментирани ще бъдат оценени с 411, от друга страна, ще се забележи ембрион с лошо качество, с 4 неправилни и фрагментирани клетки 423 или 424.

4-точков ембрионален резултат, използван при IMR

Наблюдение Брой точки Общ резултат 1,2,3 или 4 точки
Разделени ембриони
Да1 точка
Не0 точки
Етап на клетъчното делене
4 клетки1 точка
Други етапи0 точки
Неправилни клетки (размер или форма)
Отсъствие1 точка
Присъствие0 точки
Фрагментация (по-голяма или равна на 20%)
Отсъствие1 точка
Присъствие0 точки