ИНСТИТУТ ПО ГЕНЕТИКА, ФИЗИОЛОГИЯ И ЗАЩИТА НА РАСТЕНИЯТА чрез ръкопис С
ИНСТИТУТ ПО ГЕНЕТИКА, ФИЗИОЛОГИЯ И ЗАЩИТА НА РАСТИТЕЛИТЕ Като ръкопис C.Z.U. 633.854.78: 631.523 (043.2) НЕЧИФОР ВИКТОРИЯ ДЕЙСТВИЕ НА ГИБЕРЕЛИН НА СЛЪНЧЕВОДНА МИКРОСПОРОГЕНЕЗА (HELIANTHUS ANNUUS L.) 162.01. РАСТИТЕЛНА ГЕНЕТИКА Докторска дисертация по биологични науки Научен ръководител DUCA Мария, доктор хабилитат по биологични науки, университетски професор, академик Автор NECHIFOR Виктория КИШИНУ, 2018

4.2.1. Биоинформатика, характерна за гените CycD3, PCNA1, HIS1-3, H1.3. 73 4.2.2. Анализ на резултатите от експресията. 79 4.3. Изследване на генната експресия, участваща в сегрегацията на хромозомите MND1, AHP2, ASK1, DYAD. 83 4.3.1. Биоинформатиката, характерна за гените. 84 4.3.2. Анализ на резултатите от експресията. 89 4.4. Оценка на нивото на експресия на гени с функции във формирането и активността на клетъчните мембрани. 93 4.4.1. Биоинформатика, характерна за гените EXPA1, GSL12. 94 4.4.2. Анализ на резултатите от експресията. 96 4.5. Заключения в глава 4. 101 ОБЩИ ЗАКЛЮЧЕНИЯ И ПРЕПОРЪКИ. 103 БИБЛИОГРАФИЯ. 105 ПРИЛОЖЕНИЯ. 127 Приложение 1. Акт за прилагане на научни резултати в обучението. 127 Приложение 2. Акт за прилагане на научни резултати за усъвършенстване. 128 ИЗЯВЛЕНИЕ ЗА ОТГОВОРНОСТ. 129 Автобиографията. 130 4
СПИСЪК НА СЪКРАЩЕНИЯТА ABA абсцизова киселина AG3 гиберелинова киселина AIA - индолилова оцетна киселина AJ жасмонова киселина AS салицилова киселина ASC цитоплазматична андростерилност ASI индуцирана андростерилност BLAST Основен инструмент за търсене на локално подравняване BR брасиностероид CDK циклин зависими кинази CMP Secene PCylcate Dster Express Ester poll етикетиран) ET етилен FC промяна на гънките IGFPP Институт по генетика, физиология и защита на растенията MO Оптична микроскопия NCBI Национален център за биотехнологична информация NT - Pb нуклеотиди базови двойки PCNA - Пролифериращ ядреноклетъчен антиген PCR полимеразна верижна реакция RE ендоплазмен ретикулум SM мъжки стерилитет TAE Трис-ацетат-EDTA TBE Трис-борат-EDTA UV ултравиолетова светлина 8
хаплоидни ядра, образуващи тетради с микроспори. (Фигура 3.6, г). Плазмалемата на всяка стенна клетка става все по-удължена, така че да се простира вътре в стеблото, оставайки периферна. Към края на тетрадната фаза тези неправилно оформени, изглеждащи плазмодий клетки с интензивно полиплоидизирани ядра са разделени една от друга на радиалните си повърхности, докато средният слой е тънък и дегенерирал. Дълбоко контурирани, интензивно оцветени микроспори се наблюдават след разграждане на стената на чашата в микроспорангия на прашници от плодородни цветя, по-големи от 3,5 mm (Фигура 3.6, д). Фиг. 3.6. Поленовите стволови клетки в различни етапи на микроспорогенезата. Забележка: I плодородни растения, II растения с ASI; a, f лептотен; b, g пахитен; c, h деления; d, i тетрада; e, j микроспори x1600 (c, f); x640 (a, b, d, e, g, h, i, j) Постмейотично развитие на микроспорите: тяхното индивидуализиране и освобождаване от тетрадата, отлагане на първичния екзин, образуването на еквинулации се развиват според вида, подчертавайки постепенното, синхронизирано разпадане на тъканта тапет. Фиг. 3. 7. Лентови клетки в различни фази на микроспорогенезата Забележка: I плодородни растения; II растения с ASI; а и профаза I; б, е подразделения; c, g тетрада; d, h етап на микроспора. Скала 15 = µm. 57
Търсенето на ключови думи подчертава локуса: ACO58770.1, който кодира протеинова последователност от 68 аминокиселини, дефинирана като A4-подобно протеиново разширяване, частично [Helianthus annuus]. BLASTX на транскриптната последователност, изследвана с експанзин А4-подобен протеин [Helianthus annuus], показва много ниска степен на сходство (оценка: 72,4/72,4, покритие: 25%, Е стойност: 7e-22, идентичност: 66%) (Фигура 4.20, В). A B Фиг. 4.20. Анализ на последователността CCFT9238.b1_K05.ab1. чрез програмите BLASTN (A) и TBLASTX (B). Базата данни HELIAGENE [295] представя хипотетични слънчогледови транскрипти, функционално приписани на експанзини, с различна степен на експресия в различни органи, но тяхната генна последователност не показва сходство с транскрипта, изследван в тази статия. 4.4.2. Анализ на резултатите от експресията Анализът на експресията на гена GSL12 в слънчогледа, участващ в биосинтезата на калус, показва статистически значимо увеличение (p